Geri Dön

CRISPR-Cas9 sistemini ifade eden transgenik tütün bitkisinin elde edilmesi

Obtaining the transgenic tobacco plant expressing the CRISPR-Cas9 system

PDF İndir

  1. Tez No: 494832
  2. Yazar: DURSUNE MERVE KARATAŞ
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. MUSA KAVAS
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ondokuz Mayıs Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 53

Özet

ZFN, TALEN ve CRISPR yöntemleri DNA'da hedeflenen bölgeye bağlanabilmeleri sayesinde genom düzenlenmesinde sık kullanılan tekniklerdir. Hedeflenmiş nükleazların kullanımı sayesinde hedef genler mutasyona uğratılarak ya da genomdan çıkartılarak susturulabilmekte ya da genlerde hedeflenen nükleotidlerin değiştirilmesi mümkün olabilmektedir. Son yıllarda yeni nesil genom düzenleme aracı olarak düzenli aralıklarla bölünmüş palindromik tekrar kümeleri ile (CRISPRs)-ilişkili Cas9 nükleazları kullanılmıştır ve elde edilen sonuçlar bitki biyoteknolojisinde devrim yaratıcı nitelikte olmuştur. CRISPR-Cas9, çok yönlülüğü, düşük maliyeti ve yüksek verimliliği nedeniyle tercih edilerek genom düzenleme aracı olarak hızla benimsenmiştir ve yaygın şekilde kullanılmaktadır. Daha etkili genom düzenleme için CRISPR teknolojisinin optimizasyonuna yönelik çalışmalar yapılmakta olup, CRISPR sistemi kullanılarak yapılan genom mühendisliği çalışmalarına her gün yenileri ilave edilmektedir. Böylece bu tekniğin daha yaygın kullanılmasıyla mevcut çalışmalar bir adım daha ileriye taşınmış olacaktır. Bu tez çalışmasında tütün bitkisinde CRISPR-Cas9 sisteminin ilk basamağı olan Cas9 proteinlerinin ifade ettirilmesi hedeflenmiştir. Cas9 geni Agrobacterium tumefaciens aracılığıyla tütün bitkisine aktarılmıştır ve elde edilen aday transgenik bitkilerden rastgele seçilen tütün hatlarından PCR analizi ve higromisin analizi yapılmıştır.

Özet (Çeviri)

ZFN, TALEN, and CRISPRs are techniques frequently used in genomic regulation due to their ability to bind to target regions in DNA. The target genes can be silenced by mutation, genomic deletion, to possibly replace the targeted nucleotides in the genes using targeted nucleases. In recent years, Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPRs) – was used with Cas9 nucleases as a new generation genome editing tool, and the results have been revolutionary in plant biotechnology. CRISPR / Cas9 is rapidly adopted and widely used as the preferred genomic editing tool due to its versatility, design simplicity, low cost and high efficiency. The ease of designing the guide RNA targeting Cas9 to the desired DNA locus and the high specificity and efficiency of CRISPR-Cas9-mediated DNA breaks make the CRISPR-Cas9 genome editing tool extremely useful. Studies are being conducted to optimize CRISPR technology for more effective genomic regulation, and genomic engineering studies using the CRISPR system. Thus, the use of this technique, moves current work one step further and will allow the development of better quality yield and tolerant varieties of environmental factors. In this thesis, transfer of Cas9 gene into tobacco plant was optimized using Agrobacterium tumefaciens. PCR analysis and hygromycin analysis was performed on randomly selected tobacco lines from the candidate transgenic plants obtained.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    836731

    Investigating genetic and epigenetic regulators of human naive pluripotent stem cells

    İnsan naif pluripotent kök hücrelerinin genetik ve epigenetik düzenleyicilerinin araştırılması

    NİLYA KARASÜRMELİ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    Tıbbi BiyolojiKoç Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. TEVFİK TAMER ÖNDER

  2. Tez No

    519769

    Suppression of NFIb expression by gene targeting strategies

    NFIb ifadesinin gen hedefleme stratejileriyle baskılanması

    İBRAHİM OGUZ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    Genetikİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ASLI KUMBASAR

  3. Tez No

    444260

    Generation and validation of genome editing tools for mouse CatSper β & Ɣ using CRISPR/Cas9 and split-EGFP systems

    Fare CatSper β & Ɣ genlerinin CRISPR/Cas9 ve ayrık-EGFP sistemleri için genom değiştirme araçlarının oluşturulması ve doğrulanması

    YUSUF İŞERİ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2016

    Genetikİstanbul Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. NEVİN GÜL-KARAGÜLER

    YRD. DOÇ. DR. JEAN-JU L.CHUNG

  4. Tez No

    547218

    Drosophila melanogaster'de PGRP-LF geninin otoinflamasyon bakımından etkileştiği diğer genlerin genom çaplı ilişkilendirme modeliyle saptanması

    Determining the other genes interacting with the autoinflammation related pPGRP-LF gene of Drosophila melanogaster via genome wide association study

    HAZAL ÇALIŞKAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    BiyolojiHacettepe Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ERGİ DENİZ ÖZSOY

  5. Tez No

    761606

    The identification of the mechanisms of LRBA deficiency dependent defects in regulatory T-cell function

    Düzenleyici T-hücre fonksiyonunda LRBA eksikliğine bağlı hataların mekanizmalarının belirlenmesi

    PEGAH ZAHEDIMARAM

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    BiyolojiSabancı Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji-Genetik ve Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET SELİM ÇETİNER

Geri Dön