3D endometrium benzeri kültür sistemi kullanılarak in vitro implantasyon modelinin geliştirilmesi
Development of endometrium like 3D culture system using in vitro model implantation
- Tez No: 503897
- Danışmanlar: PROF. DR. HAFİZE SEDA VATANSEVER
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2017
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Manisa Celal Bayar Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 190
Özet
Amaç: Hem embriyo hem de kanser hücrelerinin invazyon modelinde kullanılabilecek üç boyutlu (3D) endometrium benzeri kültür sisteminin geliştirilmesi ve bu sisteme invaziv özellikte olan hücrenin ekimi ile epitelyal mezenkimal geçiş mekanizmasının araştırılması amaçlanmıştır. İn Vitro üç boyutlu endometrium benzeri kültür sistemi, poröz bakteriyel selüloz (BC), kollajen köpük (COL/K) ve kollajen fiber (COL/F) doku iskeleleri üzerine endometrium epitelyal hücre hattı (RL95-2) ile invaziv sferoid oluşturma özelliği olan trofoblast benzeri koriyokarsinom (JAR) hücre hatlarının tekli ve ikili ekimi sonucunda implantasyon, invazyon basamaklarında görülen epitelyal mezenkimal geçiş mekanizmasının araştırılması hedeflenmiştir. Gereç ve Yöntem: Çalışmada üretilen üç farklı tip doku iskelesi ile ticari olarak satın alınan RL95-2 ve JAR hücreleri kullanılmıştır. Hücreler uygun besiyerlerinde kültüre edilip, %80 konfluent olduktan sonra doku iskeleleri üzerine tekli veya ikili olarak ekilmiştir. Kültürün 3., 5., 7., 10. ve 14. günlerinde iskeleler %4 paraformaldehit ile fikse edilerek frozen kesitleri alınmıştır. Epitelyal belirteç olarak E-kaderin, mezenkimal belirteç olarak N-kaderin, Vimentin, α-SMA ve Syndecan-1 dağılımları indirekt immunoperoksidaz ya da immunofloresan boyama yöntemleri ile analiz edilmiştir. Doku iskelelerinin karakterizasyonu ise SEM yöntemi ile yapılmıştır. Bulgular: RL95-2 hücrelerinde E-kaderin, N-kaderin, Vimentin, α-SMA ve Syndecan-1 immunoreaktivitelerinin JAR hücrelerinden daha fazla olduğu, E-kaderin ve Syndecan-1 dağılımlarının RL95-2 hücresinde, N-kaderin ve Syndecan-1 immunoreaktivitelerinin de JAR hücrelerinde diğer belirteçlere oranla daha fazla olduğu görüldü. Doku iskelelerinin karakterizasyonu sonucunda; BC gözenek büyüklüğü 97 ± 28 µm, COL/K gözenek büyüklüğü 109 ± 21µm ve COL/F doku iskelelerinin çapının ise 0,67 ± 0,14 µm olduğu saptandı. Epitelyal mezenkimal geçiş belirteçlerinin her üç doku iskelesinde de boyandığı, fakat BC' un özellikle metastatik kurulacak modellerde JAR hücrelerinin kullanılmasında, COL/K doku iskelesinde JAR hücrelerinin 7. günde, RL95-2 hücrelerinin ise 14. günde mezenkimal özelliklerinin daha fazla olduğu, COL/F doku iskelesi kültüründe ise, RL95-2 hücrelerinin erken dönem kültürlerinde epitelyal özellikten mezenkimal özelliğe dönmesini desteklediği, RL95-2 ve JAR hücrelerinde E-kaderin, N-kaderin, Vimentin, α-SMA ve Syndecan-1' in kültürün 14. gününde daha fazla olduğu gözlendi. Sonuç ve Yorum: Farklı iskeleler kullanılarak geliştirilen 3D endometrium benzeri kültür sistemi ile hem kanser hücrelerinin invazyonu sırasında hem de embriyo implantasyonu sırasında görülen epitelyal mezenkimal geçiş mekanizmasının farklı günlerdeki ifadelerinde değişim saptandığı ve kurulan bu modellerin ileriki araştırmalar için bir ön çalışma niteliğinde olduğu düşünülmüştür.
Özet (Çeviri)
Aim: For using both embryo and invasion models, we aimed to investigate three dimensional (3D) endometrium-like culture system invasive culture and epithelial mesenchymal transition mechanism. Via in vitro three-dimensional endometrium-like culture system, epithelial mesenchymal transition in both implantation and invasion process were analyzed using single or combine culture of endometrium epithelial (RL95-2) and trophoblast-like chiocarcinoma (JAR) cell lines on bacterial cellulose (BC), collagen foam (COL/K) and collagen fiber (COL/F) porous scaffolds. Materials and Methods: Three different types of tissue scaffolds were used in the study and RL95-2 and JAR cells were purchased commercially. Cells were cultured on appropriate media, after 80% confluency of the cells, they were plated onto scaffolds separately or combine. On culture time; 3., 5., 7., 10. and 14. days, the scaffolds were fixed with 4% paraformaldehyde and frozen sections were taken. Distributions of E-cadherin as an epithelial marker, N-cadherin, Vimentin, α-SMA and Syndecan-1 as a mesenchymal marker were analyzed by indirect immunoperoxidase or immunofluorescence staining methods. Characterization of scaffolds were analyzed by SEM method. Results: In the RL95-2 cells, immunoreactivities of E-cadherin, N-cadherin, Vimentin, α-SMA and Syndecan-1 were higher than JAR cells, in addition, E-cadherin and Syndecan-1 immunoreactivities in RL95-2 cells, N-cadherin and Syndecan-1 immunoreactivities in JAR cells were significantly higher. After the characterization of the scaffolds BC pore size of 97±28 μm, a COL/K pore size of 109±21 μm and a COL/F tissue scaffold of 0, 67 ± 0,14 µm in diameter were detected. The epithelial mesenchymal transition markers were stained in all three scaffolds, however, for epitelial mesenchymal transition BC and JAR cells, the mesenchymal properties of JAR cells on day 7, RL95-2 cells on day 14 on COL/K tissue scaffold were higher, whereas COL/F scaffold was supported epithelial properties of RL95-2 cells, in addition, immunoreactivities of E-cadherin, N-cadherin, Vimentin, α-SMA and Syndecan-1 were higher on combine culture of RL95-2 + JAR cells on this scaffold at 14. Day of the culture time. Conclusion: The newly developed 3D endometrium-like culture system using different scaffolds was supported the epithelial mesenchymal transition mechanisms in both cancer cell invasion and embryo implantation during different culture periods and it can be a preliminary study for further research.
Benzer Tezler
- Serviks ve endometrium kanseri tedavisinde 3 boyutlu konformal radyoterapinin akut yan etkilerinin değerlendirilmesi ve 3 boyutlu konformal radyoterapi ile yoğunluk ayarlı radyoterapi tedavi tekniklerinin (planlamalarının) dozimetrik olarak karşılaştırılması
Evaluation of acute side effects in three-dimensional conformal radiotherapy in the treatment of cervical and endometrial cancer, and difference between three-dimensional conformal radiotherapy (3d-CRT) and intensity-modulated radiation therapy techniques (ımrt) as a dosimetric comparison
ÖZGÜR YILDIRIM
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2013
Kadın Hastalıkları ve DoğumPamukkale ÜniversitesiRadyasyon Onkolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. PAPATYA BAHAR BALTALARLI
- Endometriyum kanserinde manyetik rezonans görüntüleme ile kantitatif değerlendirmenin prognostik öneminin araştırılması
Investigation of the prognostic value of quantitative evaluation with magnetic resonance imaging in endometrial cancer
DUYGU KOÇ KELEŞ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2020
Kadın Hastalıkları ve DoğumSüleyman Demirel ÜniversitesiRadyoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ ŞEHNAZ EVRİMLER
- Anormal uterin kanamalı hastalarda transvajinal ultrason ve histeroskopi bulgularının karşılaştırılması
Investigation of transvaginal ultrasonography and hysteroscopy results in patients with abnormal uterine bleeding
MEHMET VEYSEL ARIN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2022
Kadın Hastalıkları ve DoğumTekirdağ Namık Kemal ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MEHMETBAKİ ŞENTÜRK
- Endometrium kanserinde myometrial invazyonun ve servikal tutulumun değerlendirilmesinde FLASH 3D ve VIBE 3D dinamik MRG sekanslarının karşılaştırılması
Comparison of FLASH 3D and VIBE 3D dynamic MRI sequences for evaluation of myometrial invasion and cervical involvement in endometrial cancer
DİLEK KILIÇ
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2014
Kadın Hastalıkları ve DoğumBaşkent ÜniversitesiRadyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NEFİSE ÇAĞLA TARHAN
- Üç boyutlu (3D) transvajinal ultrason ile belirlenen endomyometrial junctional zone kalınlığı ile histolojik kronik endometrit bulgularının uyumunun değerlendirilmesi
Evaluation of the concordance of endomyometrial junctional zone thickness determined by three-dimensional (3D) transvaginal ultrasound and histologic findings of chronic endometritis
İSMAİL ELMADAĞI
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2024
Kadın Hastalıkları ve DoğumAnkara ÜniversitesiKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YAVUZ EMRE ŞÜKÜR