Geri Dön

Fibroblast hücrelerinden oktadesilamin bazlı katı lipid nanopartikül ile uyarılmış pluripotent kök hücrelerin eldesi

Obtaning induced pluripotent stem cells from fibroblast cells via octadecylamine based solid lipid nanoparticle

PDF İndir

  1. Tez No: 504888
  2. Yazar: HANİFE SEVGİ VARLI
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. NELİSA TÜRKOĞLU
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Genetik, Genetics
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Yıldız Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 95

Özet

Uyarılmış pluripotent kök hücreler (UPKH), laboratuvar koşullarında yetişkin somatik hücrelerin çeşitli transkripsiyon faktörleri kullanılarak genetik olarak yeniden kodlanması ile elde edilen pluripotent özellik kazandırılmış hücrelerdir. Sahip olduğu pluripotens özelliği sayesinde hemen hemen tüm hücre tiplerine dönüşebilme yeteneğine sahiptirler. Rejeneratif tıpta kullanımı etik sorunları ortadan kaldıran ve embriyonik kök hücreye alternatif bir kaynak olarak birçok hastalığın tedavisinde kullanılabilecek hücre kaynağıdır. Bu çalışmada fibroblast hücrelerden pluripotent kök hücreler elde edilmiştir. Hücrelere pluripotent kök hücre özelliği kazandıran Oct4, Sox2, Klf4 ve v-Myc transkripsiyon faktörleri ile birlikte yeşil floresan protein (GFP) geni içeren plasmid E.coli JM109 suşunda çoğaltılıp saflaştırılmıştır. Laboratuvarımızda önceki çalışmalarda sentezlediğimiz oktadesilamin bazlı katyonik lipid nanopartikülün (OLN) karakterizasyon çalışmaları yapılmış ve sitotoksisitesi L929 hücre hattı üzerinde yapılan MTT deneyi ile ölçülmüştür. OLN ile etkileştirilen plazmidler L929 hücre hattına aktarılmış, fibroblast hücrelerdeki transfeksiyon süreci invert mikroskopta GFP ışımasının takip edilmesi ile gerçekleştirilmiştir. Hücrelerdeki Oct4, Sox2, Klf4 ve v-Myc genlerinin ekspresyon varlığı RT-qPCR yöntemi ile belirlenmiştir. Elde edilen UPK hücreleri, yara iyileşmesinde kullanılmak üzere, laboratuvarımızda önceki çalışmalarda elde edilen selüloz bazlı hidrojel özellikte yara örtü malzemesi üzerine yüklenmiştir.

Özet (Çeviri)

Induced pluripotent stem cells (IPSC) are pluripotent cells that obtained from adult somatic cells by genetic reprogramming in vitro via transcription factors. Due to its pluripotency, it has the ability to differentiate into almost many cell types. The use of the IPSc cell source for regenerative purpose removes ethical problems about embryonic stem cells. In this study, pluripotent stem cells were obtained from fibroblast cells via for main transcription factors. The plasmid containing green fluorescent protein (GFP) gene with Oct4, Sox2, Klf4 and v-Myc transcription factors was amplified in E. coli JM109 strain and purified. Fibroblast cells were transfected with plazmid by using a lipid-based nano vehicle. Characterization studies of octadecylamine-based cationic lipid nanoparticle (OLN) synthesized in our laboratory were performed by zeta-sizer. The cytotoxicity of the nanoparticle was determined by MTT assay (ISO 10993-5) OLN- plasmid conjugates were transferred into the L929 cell line, and the transfection process in fibroblast cells was evaluated via screening GFP expression. Expression of the Oct4, Sox2, Klf4 and v-Myc genes in the cells were determined by the RT-qPCR. Then, the obtained UPS cells were loaded to a cellulose-based hydrogel wound dressing biomaterial which was designed in our previous studies.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    522520

    Fibroblast hücrelerinin küçük kimyasal moleküller aracılığı ile adipositlere direkt farklılaştırılması

    The direct differentiation of fibroblast cells into adipocytes through small chemical molecules

    ÖZGE BARIM

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    BiyolojiHaliç Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ AYYUB EBRAHIMI

  2. Tez No

    752383

    Sağlıklı insan uyarılmış pluripotent kök hücrelerinden kortikal nöron elde edilmesi

    Generation of cortical neurons from healthy human pluripotent stem cells

    MELİS TEMEL ÖZKILIÇ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    GenetikHacettepe Üniversitesi

    Kök Hücre Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FAHRİYE DUYGU ÇETİNKAYA

    DOÇ. DR. AYÇA ARSLAN ERGÜL

  3. Tez No

    284634

    Acrıdıne orange içeren phema nanopartiküller ile L929 fibroblast hücre hattının etkileşimi

    Interaction between phema nanoparticles including acridine orange and L929 fibroblast cell line

    ILGIM GÖKTÜRK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    BiyokimyaHacettepe Üniversitesi

    Kimya Bölümü

    PROF. DR. ADİL DENİZLİ

    PROF. DR. M. ALİ ONUR

  4. Tez No

    393923

    Primer beyin tümörlerinin etiyolojisinde KlF4, KlF4α, OCT3/4, SOX2, nanog ve C-MYC genlerinin rolünün araştırılması

    Researching the effects of KLF4, KLF4α, OCT3/4, SOX2, nanog and C-MYCin the etiology of primary brain tumors

    OĞUZHAN BAHADIR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    GenetikErciyes Üniversitesi

    Tıbbi Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. YUSUF ÖZKUL

  5. Tez No

    379632

    Kolon kanser hücreleri için altın kaplı manyetik yüklü transfeksiyon ajanlarının kullanılması

    Use of gold coated magnetically loaded nanoparticles in transfection of colon cancer cells

    DUYGU DENİZ USTA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    BiyomühendislikHacettepe Üniversitesi

    Biyomühendislik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ERHAN BİŞKİN

    DOÇ. DR. MUSTAFA TÜRK

Geri Dön