Preparation of ascorbate oxidase enzyme electrode and its usage for L-ascorbic acid determination
Askorbat oks1daz enz1m elektrodu hazırlanması ve l-askorb1kas1t tayininde kullanılması
- Tez No: 50707
- Danışmanlar: PROF.DR. ERHAN DİNÇKAYA
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyomühendislik, Bioengineering
- Anahtar Kelimeler: Ascorbate Oxidase, L- Ascorbic Acid, Enzyme Electrodes, Biosensors
- Yıl: 1996
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 54
Özet
Bu tezde, salatalıktan (Cucumis sativus L.) izole edilip kısmi olarak saflaştınlan Askorbat oksidaz [(L-Askorbat: oksijen oksidoredüktaz) (EC 1.10.3.3)] glutaraldehid yardımıyla jelatin ile çapraz bağlanarak, çözünmüş oksijen probu membranı üzerinde bir biyoaktif tabaka oluşturuldu ve L-askorbik aside duyarlı bir askorbat oksidaz enzim eiektrodu geliştirildi. Ölçümler enzimatik reaksiyon uyarınca L-askorbik asit konsantrasyonu ile orantılı olarak tüketilen oksijen düzeyinin belirlenmesi yoluyla çizilen standard grafikler yardımıyla gerçekleştirildi. Hazırlanan biyosensörün optimizasyon çalışmalarında en uygun askorbat oksidaz, jelatin ve glutaraldehid oranlan sırasıyla 24,8 U/cm^, 5,9 mgjelatin/cm^ ve %2,5 olarak bulundu. Optimum çalışma ortamı olarak 50 mM'lik pH:7,5 olan fosfat tamponunun kullanılması ve ölçümlerin 35°C de yapılması gerektiği sonucuna varıldı. Geliştirilen biyosensörün karakterizasyonu amacıyla yapılan çalışmalar sonucunda 5,0xl0~5 - 1,2x10“ 3 M L-askorbik asit konsantrasyon aralığında doğrusal sonuçların alınabildiği tespit edildi. Tekrarlanabilirlik denemelerinde (n=ll), 4,0xl0”4 MTlık L-askorbik asit konsantrasyonu için ortalama değer (x)=3,99xl0"4 M, standard sapma (S.S):±0,001 ve varyasyon katsayısı (V.K):%0,251 olarak bulundu. Ayrıca substrat spesifikliği, depo kararlılığı ve bazı maddelerin girişim etkileri araştırıldı. Son olarak bazı meyva ekstraktları ve vitamin tabletlerinde, geliştirilen biyosensörle L-askorbik asit tayini yapıldı ve elde edilen sonuçlar ve metodun duyarlılığı 2,6 diklorofenolindofenol metodu ile kıyaslandı. Anahtar ' Kelimeler : Askorbat Oksidaz, L-Askorbik Asit, Enzim Elektrodlan, Biosensörler
Özet (Çeviri)
In this thesis, ascorbate oxidase [(L-Ascorbate:oxygen oxidoreductase) (EC1. 10.3.3)], isolated and partially purified from cucumber (Cucumis sativus L.) was crosslinked with gelatine by using glutaraldehyde and a bioactive layer was formed on the dissolved oxygen probe, therefore, ascorbate oxidase enzyme electrode which was sensitive for L-ascorbic acid determination was developed. Measurements were carried out by standard curves which were obtained by the determination of consumed oxygen level, related to L-ascorbic acid concentration in the enzymatic reaction. In the optimization studies of the biosensor prepared, the most suitable ascorbate oxidase, gelatine and glutaraldehyde ratios were determined as 24.8 U/cm-, 5.9 mggelatine/cm^ and, 2.5% respectively. The phosphate buffer (50 mM, pH:7.5) and 35° C were established as providing the optimum conditions. The characterization studies proved a linearity in the ascorbic acid concentration range 5.0xl0~5-1.2xl0~3 M. The reproducibility experiments (n=ll) revealed that for 4x10-4 M L-ascorbic acid, the average value (x) was 3.99x10-4 M,standard deviation (S.D) was ±0.001 and, variation coefficient (C.V) was 0.251%. Moreover, substrate specification, storage stability and the interference effects of some substances were investigated. Finally, L-ascorbic acid determination in some fruit extracts and vitamin tablets was carried out. Both the results obtained and the sensitivity of the method were compared with the 2,6 dichlorophenolindophenol method.
Benzer Tezler
- Tavşan karaciğer paraoksonaz enziminin saflaştırılarak kinetik özellikleri, endojen substratları ve antioksidan özelliklerinin araştırılması.
Purification of rabbit liver paraoxonase enzyme and investigation of its kinetic properties, endogenous substrates and antioxidant properties.
TÜLİN BAYRAK
- 'Click' kimyası ile yeni ftalosiyanin türevlerinin sentezi
Synthesize of novel phthalocyanine derivatives with click chemistry
YUSUF YILMAZ
- The analysis of food additives and inorganic anions in bread by ion chormatographic method with conductivity detector
Ekmekte bulunan gıda katkı maddleri ve inorganik anyonların iletkenlik dedektörlü iyon kromatografik yöntem ile tayini
ZEYNEP MELİS ARKAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2020
Kimyaİstanbul Teknik ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GÜLÇİN YILMAZ
- Kitozanın yumuşak doku iyileşmesindeki etkisinin deneysel olarak incelenmesi ve hücre kültürü ile değerlendirilmesi
Experimental evaluation of the effect of chitosan on the soft tissue healing and evaluation with cell culture
MUHARREM GÜVERCİN
Doktora
Türkçe
2004
Sağlık EğitimiMarmara ÜniversitesiAğız, Diş, Çene Hastalıkları ve Cerrahisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KAMİL GÖKER
- Beyazlatma sonrası farklı yüzey işlemlerinin mine bağlanma dayanımı üzerine etkisi
The effect of different post-bleaching surface treatments on enamel bond strength
BÜŞRA ÇINAR
Diş Hekimliği Uzmanlık
Türkçe
2022
Diş HekimliğiSivas Cumhuriyet ÜniversitesiRestoratif Diş Tedavisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DİĞDEM EREN