Amino benzohidrazid türevi moleküller kullanılarak karaturp peroksidaz enziminin afinite kromatografisi tekniği ile saflaştırılması
Purification of the peroxidase enzyme with afinite chromatography technique using aamino benzohydrazide derivative molecules
- Tez No: 513938
- Danışmanlar: PROF. DR. HASAN ÖZDEMİR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Atatürk Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 85
Özet
Bu tez kapsamında bitki peroksidaz enzimlerinin saflaştırma çalışmalarına katkı sağlamak amacı ile 4-amino 2-nitro benzohidrazid, 4-amino 3-nitro benzohidrazid, 4- amino 2-bromo benzohidrazid ve 4-amino 3-bromo benzohidrazid molekülleri ligant olarak sentezlendi ve karaturp köklerinden peroksidaz enzimlerinin saflaştırılmasında kullanıldı. 4-amino benzohidrazid molekülleri metilbenzoat formlarından hidrazin sentezleri yapılarak karaturp POD enzimi üzerine inhibisyon etkileri incelendi. Sepharose-4B-L-Tirozin jel materyali, dönüşümlü inhibisyon gösteren moleküllere bağlanarak afinite jelleri sentezlendi ve tek kademede karaturp POD enziminin saflaştırılması gerçekleştirildi. 4-amino 2-bromo benzohidrazid molekülü kullanıldığında POD enzimi, karaturptan %28,5 verimle 258 kat, 4-amino 3-bromo benzohidrazid ile karaturptan %31,4 verimle 677 kat, 4-amino 2-nitro benzohidrazid ile karaturptan %33,8 verimle 613,3 kat, 4-amino 3-nitro benzohidrazid ile karaturptan %7,5 verimle 365,6 kat saflaştırıldı. Saflaştırılan enzimlerin saflığı ile molekül ağırlığı SDS-PAGE ile kontrol edildi. Karaturp POD enzimi için 43-47 kDa'da tek bant gözlendi. Sepharose-4B-L-Tirozin-4-amino-3-bromo benzohidrazid kolonu için kolon tutma kapasitesi, karaturp POD enzimleri için değişik pH, sıcaklık, iyonik şiddetlerde çalışıldı. Karaturp POD enzimi için optimum şartlar: pH 7,5, sıcaklık 15°C, iyonik şiddet 0,30 M olarak hesaplandı.
Özet (Çeviri)
In this thesis, it is aimed to contribute to the purification studies of plant peroxidase enzymes 4-amino 2-nitrobenzohydrazide, 4-amino 3-nitrobenzohydrazide, 4-amino 2- bromobenzohydrazide and 4-amino 3-bromobenzohydrazide molecules was synthesized as a ligand and was used for the purification of peroxidase enzymes from radish roots. 4 amino benzohydrazide molecules was synthesized from methly benzoate form to obtain benzohydrazide molecules and effects of inhibition on the black radish POD enzyme were studied. Sepharose-4B-L-Tyrosine gel material was synthesized by binding to molecules displaying alternating inhibition effect, and purification of the single-step POD enzyme was performed. When 4-amino 2-bromo benzohydrazide was used as a ligand for the black radish POD enzyme was purified 258 fold with a yield of 28.5%, 4- amino 3-bromo benzohydrazide 677 fold with a yield of 31.4%, 4-amino 2- nitrobenzohydrazide 613.3-fold with yield of 33%, 4-amino 3-nitro benzohydrazide 365,6 fold with yield of 7,5%. Molecular weight was controlled by purity of the purified enzymes by SDS-PAGE. Single band at 43-47 kDa was observed for the black radish POD enzyme. Column retention capacity for Sepharose-4B-L-Tyrosine-4-amino- 3-bromo benzohydrazide column was studied on different pH, temperature, ionic strengths for black radis POD enzymes. Optimum conditions for black radish POD enzyme was calculated as a pH 7.5, temperature 15 ° C, ionic strength 0.30 M.
Benzer Tezler
- Karaturp peroksidaz enziminin saflaştırılması ve benzohidrazidlerle inhibisyon kinetiğinin incelenmesi
Purification of black rudish peroxidase (POD) enzyme and investigation of inhibition kinetic with benzohydrazides
SERPİL GERNİ
- 4-amino benzohidrazid türevleri kullanılarak karaturp ve şalgamdan peroksidaz enziminin saflaştırılması
Purification of black radish and turnip pod enzymes using with 4-amino benzohydrazide derivates
AYKUT ÖZTEKİN
- Benzohidrazid türevleri kullanılarak horseradısh peroksidaz (HRP) enziminin tek basamakta saflaştırılması
One step purification of horseradish peroxidase (HRP) enzyme using benzohydrazide derivatives
ZÜLEYHA ALMAZ
- Horseradish peroksidaz (HRP) enzimi üzerine bazı benzohidrazidtürevlerinin etkisinin incelenmesi
Investigation of the effect of some benzohidrazidederivatives on horseradish peroxidase (HRP) enzyme
DENİZ EREL
- Börülce bitkisinden (Vigna unguiculata) afinite tekniği kullanılarak peroksidaz enziminin saflaştırılması ve karakterizasyonu
Purification of peroxidase enzyme from cowpea (Vigna unguiculata) using affinity technique and, characterization study
ŞEYMA TAŞBAŞI
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
BiyokimyaAğrı İbrahim Çeçen ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ AYKUT ÖZTEKİN