Endoplazmik retikulum (ER) stresinin absans epileptik sıçanlarda katlanmamış protein yanıtına (KPY) etkisinin araştırılması
Investigating the impact of endoplasmic reticulum stress (ERS) on unfolded protein response (UPR) in absance epilectic rats
- Tez No: 518741
- Danışmanlar: PROF. DR. DENİZ ŞAHİN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Fizyoloji, Physiology
- Anahtar Kelimeler: Absans epilepsi, ER stresi, GRP78, ATF6, EIF2AK3, CACNA1H, Davranış, Endoplazmik retikulum, Epilepsi, Epilepsi-absans, Hayvan deneyleri, Katlanmış proteinler, Moleküler yapı, Sıçanlar, Talamus, Öğrenme, Absance epilepsy, ER stress, GRP78, ATF6, EIF2AK3, CACNA1H, Behavior, Endoplasmic reticulum, Epilepsy, Epilepsy-absence, Animal experimentation, Folded proteins, Molecular structure, Rats, Thalamus, Learning
- Yıl: 2018
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Kocaeli Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Fizyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Endoplazmik Retikulum (ER), transkripsiyon sonrası modifikasyonlardan başlayarak, proteinlerin doğru katlanmasına kadar birçok hücresel fonksiyonla ilişkilidir. Hücre içi kalsiyum dengesindeki bozulmalar, ER'in fizyolojik dengesini bozarak ER stresi oluşmaktadır. Nörodejenaratif hastalıkların patolojisinin ER stresi ile ilişkili olduğu söylenmekle birlikte epilepsi ile ER stres arasında ilişkiyi gösteren çalışmalar çok sınırlıdır. Çalışmamızın amacı, düşük ve yüksek doz Tapsigargin (Tg) uygulayarak uyarılan ER stresinin, Wistar Albino Glaxo/Rijswick (WAG/Rij) ırkı sıçanlarda davranış-öğrenme, epileptik aktivite üzerine etkilerinin, korteks ve talamus dokularında moleküler düzeyde etkilerinin araştırılmasıdır. Yöntem: Çalışmamızda 6-8 aylık WAG/Rij ırkı erkek sıçanlar kullanıldı. Epileptik aktivite, davranış-öğrenme testleri ve moleküler çalışmalar için ayrı gruplar oluşturuldu. Tg ve/veya Serum Fizyolojik(SF), Dimetil-sülfoksit(DMSO)'nun intraserebroventriküler uygulanabilmesi için kanüller ve/veya EEG kayıtları için elektrotlar yerleştirildi. Epileptik aktiviteyi değerlendirmek için EEG kayıtları alındı. Davranış-öğrenme deneyleri için lokomotor aktivite, pasif kaçınma ve water-maze testi yapıldı. Moleküler çalışmalar için GRP78 ve ERp57 protein değişimleri western blot tekniği, PERK, XBP-1, ATF6, CACNA1H mRNA ifadelerini incelemek için RT-PCR tekniği kullanıldı. Bulgular: 20 ng ve 200 ng Tg uygulaması lokomotor aktivite ve pasif sakınma üzerine etkili bulunmadı, water-maze testinde 200 ng Tg uygulaması, naif ve 20 ng Tg uygulanan gruba göre anlamlı düşüş görüldü. 20 ng Tg uygulamasında SWD aktivitesinin, 24. Saatte SF, DMSO ve 200 ng Tg gruplarına göre yüksek olduğu ve 48.saatte yüksek kaldığı tespit edildi. 20 ng Tg uygulanan grupta, talamus dokusunda GRP78 protein miktarı, Eif2ak3, CACNA1H ve XBP-1 mRNA ifadesinin arttığı gözlendi. 200 ng Tg uygulamasında talamus dokusunda ATF6 mRNA ifadesinde artış görüldü. Sonuç: Düşük doz ER stres koşullarında artan GRP78 protein miktarı, Eif2ak3, XBP-1 ve CACNA1H mRNA ifadesi, talamik nöronların hayatta kalma süreçlerini tetikleyerek SWD aktivitesi üzerine artırıcı etki gösterebilir. Yüksek doz ER stress koşullarında artan ATF 6 mRNA ifadesi pro-apoptotik süreçleri tetikleyerek SWD aktivitesini düşürmüş olabilir.
Özet (Çeviri)
Objective: Endoplasmic Reticulum(ER) is associated with many cellular functions, from post-transcriptional modifications to the correct folding of proteins. Disturbances in intracellular calcium balance disrupts the physiological balance of ER. Although studies have shown that the pathology of neurodegenerative diseases is associated with ER stress, studies showing a relationship between epilepsy and ER stress are very limited. The aim of our study was to investigate the effects of ER stress induced by low and high doses of Thapsigargin(Tg) on behavioral learning, epileptic activity, and molecular levels in cortex and thalamus tissues of Wistar Albino Glaxo/Rijswick (WAG / Rij) rats. Methods: 6-8 month old WAG/Rij male rats were used in this study. Separate groups were created for epileptic activity, behavioral-learning tests, and molecular studies. Electrodes for EEG recordings and cannulas for applying Tg, SF(Saline) and DMSO(Dimethyl sulfoxide) intracerebroventricularly, were placed on skull. EEG recors were taken to assess epileptic activity. Locomotor activity, passive avoidance and water-maze test were performed for behavior-learning experiments. RT-PCR technique was used to examine the expression of PERK, XBP-1, ATF6, CACNA1H mRNA and western blot technique to examine GRP78 and ERp57 protein changes. Results: 20 ng and 200 ng Tg administration were not effective on locomotor activity and passive avoidance, 200 ng Tg administration showed a significant decrease in water-maze test compared to naive and 20 ng Tg group. It was found that the activity of SWD in 20 ng Tg administration was higher than SF(Saline), DMSO and 200 ng Tg groups at 24th hour and had remained to be high in 48th hour. In the group treated with 20 ng Tg increased GRP78 protein amount, Eif2ak3, CACNA1H and XBP-1 mRNA expression in the talamus were observed. An increase in expression of ATF6 mRNA in the thalamus tissue was observed with 200 ng Tg administration. Conclusions: Increased level of GRP78 protein amount EIF2AK3, XBP-1 and CACNA1H mRNA expression in low-dose ER stress conditions may exert an enhancing effect on SWD activity by triggering survival processes of thalamic neurons. Increased ATF 6 mRNA expression in high-dose ER stress conditions may have reduced SWD activity by triggering pro-apoptotic processes.
Benzer Tezler
- Absans epilepsili WAG/RİJ sıçanlarda N-(P-amilsinnamoil) antranilik asitin hipokampal endoplazmik retikulum stresi ve kan-beyin bariyeri bütünlüğü üzerine nöroprotektif etkisinin araştırılması
Investigation of neuroprotective effect of N-(P-amylcinnamoyl) anthranilic acid on hippocampal endoplasmic reticulum stress and blood-brain barrier integrity in WAG/RİJ rats with absence epilepsy
GÜL BÜŞRA KAYA
- Endometriyoziste endometriyal kök hücrelerin endoplazmik retikulum (ER) stresinin araştırılması
Investigation of endoplasmic reticulum (ER) stress of endometrial stem cells in endometriosis
SELENAY HÜMEYRA FURAT RENÇBER
Doktora
Türkçe
2022
Histoloji ve EmbriyolojiKocaeli ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. YUSUFHAN YAZIR
- İskemik akut renal yetmezlikte oksidatif/nitrozatif stres ve endoplazmik retikulum (ER) stresinin etkileşimleri ve er stres yanıt proteini MANF/armet'in fonksiyonunun araştırılması
Investigation of the relationship between oxidative/nitrosative stress and endoplasmic reticulum (ER) stress and the function of manf/armet as an er stress response protein in ischemic acute renal failure
FADİME AYDIN KÖSE
Doktora
Türkçe
2014
BiyokimyaEge ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NEFİSE AYSUN PABUÇÇUOĞLU
DOÇ. DR. PETEK BALLAR
- Diyabetik ve normal hastalarda mesane kanseri dokusunda age (advanced end glycatıon product) ekspresyonu'nun gösterilmesi ve age akümülasyonu ile er (endoplazmik retikulum) stresinin mesane kanseri ile ilişkisi
Expression of advanced end glycation product in diabetic and non-diabetic patients bladder cancer tissues and relation between bladder cancer and advanced end glycation product and endoplazmic reticulum strees
KADİR KARKİN
Tıpta Uzmanlık
İngilizce
2019
OnkolojiÇukurova ÜniversitesiÜroloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUSTAFA ZÜHTÜ TANSUĞ
- Retinal pigment epitel hücrelerinde endoplazmik retikulum stresinin sifingolipid düzeyleri ve apoptotik yolak üzerindeki etkileri
Effect of er stress on sphingolipid levels and apoptotic pathways in retinal pigment epithelial cells
EBRU AFŞAR