Geri Dön

Peroksidazın üç fazlı ayırma yöntemi ile pazıdan (Beta vulgaris L.var. cicla) saflaştırılması

Purificaton of peroxidase from chard (Beta vulgaris L. var. cicla) by three phase partitioning method

  1. Tez No: 531806
  2. Yazar: MEHMET YAMAN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. REFİYE YANARDAĞ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2018
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: İstanbul Üniversitesi-Cerrahpaşa
  10. Enstitü: Lisansüstü Eğitim Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 110

Özet

Peroksidazlar (E.C: 1.1.11.7) biyoteknoloji ve tıpta geniş bir alanda kullanılan enzimlerdir. Peroksidazlar doğada bitki hücrelerine, hayvan organ ve dokularına yaygın bir şekilde dağılmış hemoproteinlerdir. Pazı (Beta vulgaris L. var. cicla) dünyanın birçok bölgesinde besin olarak kullanılan bir sebzedir. Üç fazlı ayırma (TPP) yöntemi, enzim gibi doğal ürünlerin özütlenmesi, konsantre edilmesi ve saflaştırılması için kullanılan biyo-ayırma tekniğidir. Bu metod üç faz elde etmek için ham enzim çözeltisine tersiyer bütanol ve amonyum sülfat ilave edilmesini içerir. Bu teknik, biyomoleküllerin özütlenmesi ve saflaştırılması için kullanılan yeni bir ayırma prosesidir. Bu çalışmada, tek adımlı TPP yöntemi ile pazıdan peroksidaz enziminin saflaştırılması ve karakterizasyonu ilk defa yapılmıştır. Enzimin optimum pH ve optimum sıcaklık değerleri belirlenmiştir. Km ve Vmax değerleri Lineweaver – Burk grafiklerinden hesaplanmıştır. Bazı organik ve inorganik maddelerin pazı peroksidazı aktivitesi üzerine etkileri incelenmiştir. Bu çalışmada, 37oC, %60 (w/v) amonyum sülfata doyurulmuş ham enzim çözeltisi : tersiyer bütanol oranı 1:1 optimum koşulları ile saflaştırma 7.4 kata erişmiştir. Enzim aktivitesi için optimum sıcaklık ve pH değerleri sırasıyla 40oC ve pH 6.0 olarak belirlenmiştir. Km ve Vmax değerleri sırasıyla 2.597mM ve 480.800mU olarak saptanmıştır. Bu sonuçlara göre, TPP peroksidazın pazıdan saflaştırılması için ilgi çekici bir metoddur. TPP yöntemi, endüstride peroksidazın saflaştrılmasnda basit, tek adımlı, hızlı ve ekonomik olması bakımından önemli bir proses olarak düşünülebilir.

Özet (Çeviri)

Peroxidases (E.C:1.11.1.7) is one of the most widely used enzymes in biotechnology and medicine. Peroxidases are hemoproteins widely distributed in nature, which are found in plant cells, animal organs and tissues. Chard (Beta vulgaris L. var. cicla) is a vegetable appreciated in many parts of the world for its nutritional properties. Three phase partitioning (TPP) is a bioseperation technique, which has been used for the extraction, concentration and purification of enzymes as well as natural products. The method consists of simultaneous addition of ammonium sulfate and tertiary butanol to the crude enzyme extract in order to obtain the three phases. The technique is a novel separation process used for the extraction and purification of biomolecules. In this study, the purification and characterization of peroxidase from chard was carried out first time by using a single step TPP method. The optimum temperature and pH were determined. The Km and Vmax values were calculated from Linewear-Burk graph. In addition, the inhibitory effect of different organic and inorganic substances on chard peroxidase activities were investigated. In this study, at optimum conditions of 37oC and 60 % (w/v) ammonium sulfate along with 1:1 ratio of t-butanol to crude extract, the purification is enhanced 7.4 fold. The optimum temperature and pH for enzyme activity were determined as 40oC and pH 6.0, respectively. The Km and Vmax values were calculated as 2.597mM and 480.800mU respectively. In ındustry TPP can be considered as an attractive method for purification of peroxidase due to its quick, single step and economic features.

Benzer Tezler

  1. Önemli zeytin (Olea europaea L.) çeşitlerinin izoenzim polimorfizmleri ve genetik özellikleri

    Isoenzyme polymorphisms and genetic characteristics of important olive (Olea europaea L.) cultivars and types

    SEVDA DÜLGER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    ZiraatÇanakkale Onsekiz Mart Üniversitesi

    Bahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. MURAT ŞEKER

  2. Galium aparine L. bitkisinden peroksidaz ve katalaz enzimlerinin karakterizasyonu

    Characterization of peroxidase and catalase enzymes from the plant Galium aparine L.

    DUYGU YAMAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyokimyaSakarya Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÜLNUR ARABACI

  3. Peroxidase and lipoxygenase inactivation and ascorbic acid retention during blanching of peas greenbeans and carrots

    Bezelye, taze fasulye ve havucun haşlanması sırasında peroksidaz ve lipoksigenaz enzimlerinin etkilerinin yok edilmesi ve askorbik asitin tutunması

    BENAN GÜNEŞ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    1992

    Gıda MühendisliğiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    YRD. DOÇ. DR. ALEV BAYINDIRLI

  4. Citrus sinensis (L.) Osbeck (portakal) ve Citrus limon (L.) Burm.f. (limon) çiçeklerinden proteaz ve peroksidaz enzimlerinin saflaştırılması ve endüstride kullanımlarının araştırılması

    Purification of protease and peroxidase from Citrus sinensis (L.) Osbeck (orange) and Citrus limon (L.) Burm.f. (lemon) flowers and investigation of their usage in industry

    FATİH UÇKAYA

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2015

    BiyokimyaMuğla Sıtkı Koçman Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NAZAN DEMİR

  5. Açıklanamayan habitüel abortus olgularında oksidatif stres düzeyi (MDA) ve bazı antioksidant enzim aktivitelerin araştırılması

    İnvestigation of the level of oxydative stress and activity of some antioxydant enzymes on unaccountable habitual abortus cases

    SEYİTHAN GÜLER

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Kadın Hastalıkları ve DoğumYüzüncü Yıl Üniversitesi

    Kadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. İSMET ALKIŞ

    DOÇ. DR. BEGÜM YILDIZHAN