Meme kanseri hücre hatlarında mammaglobin gen ekspresyonunun kitozan/SHRNA nanopleksleri ile baskılanmasına ilişkin in vitro çalışmalar
In vitro studies on inhibition of mammaglobin gene expression with chitosan/SHRNA nanoplexes in breast cancer cell lines
- Tez No: 573081
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ SUNA ÖZBAŞ TURAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Eczacılık ve Farmakoloji, Biotechnology, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: RNAi, Mammaglobin, Meme kanseri, Kitozan, shRNA, RNAi, Mammaglobin, Breast cancer, Chitosan, shRNA
- Yıl: 2019
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Farmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 114
Özet
Amaç: İnsan mammaglobin (hMAM), genellikle meme ve meme kanseri hücrelerinde eksprese edilen bir glikoproteindir. Meme spesifik hMAM'ın RNA interferans (RNAi) teknolojisi ile kısa saç tokası RNA (shRNA) kullanılarak baskılanması önemli bir gen tedavisi stratejisidir. Nükleaz degredasyonundan korunma ve hücreye giriş etkinliğini arttırmak için viral olmayan gen taşıyıcı sistem olarak kitozan; biyobozunur olması, toksik olmayışı ve katyonik yapısı sebebiyle sıklıkla tercih edilmektedir. Bu çalışmada, hazırlanan kitozan/mammaglobin shRNA nanoplekslerin aracılığıyla hMAM geninin baskılanmasının in vitro olarak incelenmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: shRNA'nın spektrofotometrik ve elektroforetik kontrolleri yapılmıştır. Kitozan/shRNA nanoplekslerinin partikül boyutu, zeta potansiyel, jel elektroforez, serum stabilitesi ve TEM görüntüleme analizleri yapılmıştır. Hücre kültüründe; tranfeksiyon sonrası mammaglobin miktarı ELISA ile ölçülmüştür ve MTT sitotoksisite, BrdU proliferasyon ve invazyon testleri yapılmıştır. Bulgular: Tam nanopleks oluşumu gözlenmiştir, nanopleks boyutlarının ve zeta potansiyel değerlerinin uygun olduğu belirlenmiştir. Nanoplekslerin shRNA'yı degredasyondan koruduğu görülmüştür. MTT sonuçlarına göre sitotoksik etki saptanmamıştır. Mammaglobinin ve invazyonun baskılandığı görülmüştür. Sonuçlar: Başarılı bir nanopleks yapısının oluştuğu, kitozanın shRNA için uygun bir taşıyıcı sistem olduğu ve kitozan/shRNA nanoplekslerinin meme kanserinde mammaglobini baskıladığı gösterilmiştir.
Özet (Çeviri)
Aim: Human mammaglobin (hMAM) is a glycoprotein and expression is limited to mammary gland and breast tumor cell lines. Suppression of breast specific hMAM using short hairpin RNA (shRNA) with RNA interference (RNAi) technology is an important gene therapy strategy. Nuclease degradation and poor cellular uptake limit the use of the molecule. Chitosan is one of most popular delivery system due to its biodegradability, non-toxicity and cationic structure. The aim of this study was to investigate the inhibition of hMAM gene in vitro conditions with chitosan/mammaglobin shRNA nanoplexes. Material and Method: Spectrophotometric and electrophoretic controls of shRNA were performed. Particle size, zeta potential, gel electrophoresis, serum stability and TEM imaging analyzes of chitosan/shRNA nanoplexes were carried out. In cell culture; the amount of mammaglobin after transfection was measured by ELISA and MTT cytotoxicity, BrdU proliferation and invasion tests were performed. Results: Fully nanoplexation at all ratios was observed. Appropriate particle size and zeta potential values of nanoplexes were obtained. Nanoplexes were observed to protect shRNA from degredation No cytotoxic effect was observed according to MTT results. It was observed that mammaglobin and invasion were suppressed. Conclusions: It has been shown that a successful complex structure is formed, chitosan is the safe and effective delivery system for shRNA and chitosan/shRNA nanoplexes suppress mammaglobin in breast cancer.
Benzer Tezler
- Kitozan/siRNA nanopleksleri ile mammaglobin gen ekspresyonunun meme kanseri hücre hatlarında baskılanmasına ilişkin in vitro çalışmalar
In vitro studies on impression of chitosan / siRNA nanoplexes and mammaglobin gene expression in breast cancer cell lines
ŞADİYE BURCU ÖZKAVAK
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyoteknolojiMarmara ÜniversitesiFarmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ SUNA ÖZBAŞ TURAN
- Meme kanseri hücre hatlarında mir-221-3P ve pak1 gen ifadesinin araştırılması
The investigation of mir-221-3P and pak1 gene expressions in breast cancer cell lines
TAYEB SADIQ TAYEP
Yüksek Lisans
Türkçe
2014
Tıbbi BiyolojiGaziantep ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. SERDAR ÖZTUZCU
- Meme kanseri hücre hatlarında keton cisimlerinin etkisi
Effect of ketone bodies on breast cancer cell lines
ZUHAL KAYA
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
BiyokimyaMarmara ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AHMET SUHA YALÇIN
- Meme kanser hücre hatlarında NEAT1 ve MİR-410-3P'nin ekspresyonlarının araştırılması ve metastaza etkilerinin belirlenmesi
Investigation of the expressions of NEAT1 and MIR-410-3P in breast cancer cell lines and determination of their effects on metastasis
CİHANGİR DOĞAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
Tıbbi BiyolojiPamukkale ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İBRAHİM AÇIKBAŞ
- Meme kanseri hücre hatlarında EGFR (Epidermal büyüme faktörü reseptörü) gen ekspresyonunun plazmid-bazlı mikrorna-7/kitozan kompleksleri ile baskılanmasına ilişkin in vitro çalışmalar
In vitro studies on impression of EGFR (Epidermal growth factor receptor) gene expression with plasmid-based microrna-7 / chitosan complexes in breast cancercell lines
PELİN BULUT
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyoteknolojiMarmara ÜniversitesiFarmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ SUNA ÖZBAŞ TURAN