ING4 geninin aktarılması amacıyla gen taşıyıcı sistemler hazırlanması ve farklı kanser hücre kültürlerinde etkinliğinin gösterilmesi
Preparation of gene carrier systems for the delivery of ING4 gene and observing its effectiveness in different cancer cell cultures
- Tez No: 576276
- Danışmanlar: PROF. DR. AYŞE GÜLTEN KANTARCI
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoteknoloji, Eczacılık ve Farmakoloji, Biotechnology, Pharmacy and Pharmacology
- Anahtar Kelimeler: Katı Lipit Nanopartikül, Niozom, PEI, ING4, Hücre kültürü, Solid Lipid Nanoparticle, Niosome, PEI, ING4, Cell culture
- Yıl: 2019
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Farmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 125
Özet
Amaç: Tez kapsamında; ING4 genini taşıyan plazmid kullanılarak kanser hücrelerine yönelik tedavi amaçlı non-viral gen taşıyıcı sistemler geliştirilmesi ve çeşitli kanser hücrelerinde etkinliğinin gösterilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: pcDNA3.ING4 plazmid DNA'sı çoğaltılıp saflaştırıldıktan sonra, bu DNA'yı taşımak için üç farklı taşıyıcı sistem geliştirilmiştir: KLN, Niozom ve PEI-türevi polimerik nanopartiküller. KLN'lerin hazırlanması için sıcak mikroemülsiyon yöntemi kullanılmıştır. Niozom formülasyonu, ince film hidrasyon metodu modifiye edilerek hazırlanmıştır. Hidrofobik olarak modifiye PEI'ler, alifatik lipidler kullanılarak N-açilasyon yöntemi ile sentezlenmiştir. Bulgular ve Sonuçlar: Hazırlanan non-viral taşıyıcı sistemler ING4 gen bölgesini taşıyan plazmid DNA ile kompleksleştirildikten sonra belirtilen hücre kültürlerinde test edilmiş, bu hücrelerde proliferasyona etkisi gözlenmiştir: L929, MCF-10-A, MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-436, PC-3, Calu-1. ING-4 için hazırlanan taşıyıcı sistemlerin kanser hücrelerinde proliferasyonu baskıladığı gösterilmiştir. Taşıyıcı sistemlerin kanserli hücreler üzerindeki etkileri karşılaştırılmış, hangisinin daha etkili olduğu belirlenmiştir. Hazırlanan taşıyıcı sistemlerin sağlıklı hücreler üzerine etkisini gözlemlemek amacıyla L929 fare fibroblast hücreleri kullanılmıştır. Transfeksiyonun gözlenebilmesi için, ING-4 ile optimize edilen sistem yeşil floresans protein içeren plazmid ile kompleksleştirilmiştir. Transfeksiyon sonrası floresans görüntüleme yapan mikroskopta temsili fotoğraflar çekilmiş ve flow sitometride yapılan kantitatif analiz ile transfeksiyon etkinliği gösterilmiştir.
Özet (Çeviri)
Objective: Within the scope of the thesis; we aimed to develop non-viral gene delivery systems for the treatment of cancer cells using the plasmid carrying ING4 gene and demonstrating its efficacy in various cancer cells. Materials and Method: After replication and purification of pcDNA3.ING4 plasmid DNA, three different carrier systems have been developed to transport this DNA: SLN, Niosome and PEI-derived polymeric nanoparticles. Hot microemulsion method was used for the preparation of SLNs. Niosome formulation was prepared by modified thin-film hydration method. Hydrophobically modified PEIs were synthesized by N-acylation method using aliphatic lipids. Results and Conclusion: Non-viral carrier systems were tested in the indicated cell cultures after complexing with ING4 gene carrier plasmid DNA and their effect on proliferation was observed: L929, MCF-10-A, MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-436, PC-3, Calu-1. ING-4 carrier systems have been shown to suppress proliferation in cancer cells. The effects of carrier systems on cancer cells were compared for which was more effective. L929 mouse fibroblast cells were used to observe the effect of prepared carrier systems on healthy cells. To observe transfection; system that optimized with ING4 is complexed with the plasmid containing the green fluorescence protein. After transfection, representative photographs were taken on the fluorescence microscope and transfection efficiency was demonstrated by quantitative analysis in flow cytometry.
Benzer Tezler
- Investigating the effects of environmental conditions on PIM1 DNA structures and the Doxorubicin binding
Çevresel koşulların PIM1 DNA yapıları ve Doksorubisin bağlanması üzerindeki etkilerinin araştırılması
SABA OROUJI
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
BiyokimyaOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ÖZGÜL PERSİL ÇETİNKOL
PROF. DR. AYŞE ELİF ERSON BENSAN
- Pankreas kanser dokularında ING4 gen ifade seviyesinin ve P53 gen mutasyonlarının araştırılması
The investigation of ING4 gene expression level and p53 gene mutations in pancreatic cancer tissues
İBRAHİM HALİL YILDIRIM
Doktora
Türkçe
2010
GenetikGaziantep ÜniversitesiTıbbi Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. CELALETTİN CAMCI
PROF. DR. ECİR ALİ ÇAKMAK
- Gastrointestinal stromal tümörlerde malign davranış riskini belirlemede immünohistokimyasal olarak PHH-3, P53'ün değerlendirilmesi
Evaluation of PHH-3, P53 immunohistochemically in determining the risk of malignant behavior of gastrointestinal stromal tumors
EMRE ÖZCAN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2020
PatolojiKocaeli ÜniversitesiTıbbi Patoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ AHMET TUĞRUL ERUYAR
- Akut tek taraflı üreteral tam obstrüksiyona bağlı gelişen renal hasarın tedavisinde aminoguanidine tedavisinin etkinliğinin araştırılması: Rat modeli ile deneysel çalışma
Investigation of the effect with aminoguanidine treatment in renal damage due to acute unilateral ureteral complete obstruction. Experimental study on rat model
CANER EDİZ
- Farklı tarımsal atıkların Pleurotus eryngii yetiştiriciliğinde verim ve kalite üzerine etkisi
Effect of different agricultural wastes on yield and quality in cultivation of Pleurotus eryngii
GİZEM BAŞTUĞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
ZiraatÇukurova ÜniversitesiBahçe Bitkileri Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HATIRA TAŞKIN