ING4 geninin aktarılması amacıyla gen taşıyıcı sistemler hazırlanması ve farklı kanser hücre kültürlerinde etkinliğinin gösterilmesi
Preparation of gene carrier systems for the delivery of ING4 gene and observing its effectiveness in different cancer cell cultures
- Tez No: 576276
- Danışmanlar: PROF. DR. AYŞE GÜLTEN KANTARCI
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Biyoteknoloji, Pharmacy and Pharmacology, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Katı Lipit Nanopartikül, Niozom, PEI, ING4, Hücre kültürü, Solid Lipid Nanoparticle, Niosome, PEI, ING4, Cell culture
- Yıl: 2019
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Farmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Tez kapsamında; ING4 genini taşıyan plazmid kullanılarak kanser hücrelerine yönelik tedavi amaçlı non-viral gen taşıyıcı sistemler geliştirilmesi ve çeşitli kanser hücrelerinde etkinliğinin gösterilmesi amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: pcDNA3.ING4 plazmid DNA'sı çoğaltılıp saflaştırıldıktan sonra, bu DNA'yı taşımak için üç farklı taşıyıcı sistem geliştirilmiştir: KLN, Niozom ve PEI-türevi polimerik nanopartiküller. KLN'lerin hazırlanması için sıcak mikroemülsiyon yöntemi kullanılmıştır. Niozom formülasyonu, ince film hidrasyon metodu modifiye edilerek hazırlanmıştır. Hidrofobik olarak modifiye PEI'ler, alifatik lipidler kullanılarak N-açilasyon yöntemi ile sentezlenmiştir. Bulgular ve Sonuçlar: Hazırlanan non-viral taşıyıcı sistemler ING4 gen bölgesini taşıyan plazmid DNA ile kompleksleştirildikten sonra belirtilen hücre kültürlerinde test edilmiş, bu hücrelerde proliferasyona etkisi gözlenmiştir: L929, MCF-10-A, MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-436, PC-3, Calu-1. ING-4 için hazırlanan taşıyıcı sistemlerin kanser hücrelerinde proliferasyonu baskıladığı gösterilmiştir. Taşıyıcı sistemlerin kanserli hücreler üzerindeki etkileri karşılaştırılmış, hangisinin daha etkili olduğu belirlenmiştir. Hazırlanan taşıyıcı sistemlerin sağlıklı hücreler üzerine etkisini gözlemlemek amacıyla L929 fare fibroblast hücreleri kullanılmıştır. Transfeksiyonun gözlenebilmesi için, ING-4 ile optimize edilen sistem yeşil floresans protein içeren plazmid ile kompleksleştirilmiştir. Transfeksiyon sonrası floresans görüntüleme yapan mikroskopta temsili fotoğraflar çekilmiş ve flow sitometride yapılan kantitatif analiz ile transfeksiyon etkinliği gösterilmiştir.
Özet (Çeviri)
Objective: Within the scope of the thesis; we aimed to develop non-viral gene delivery systems for the treatment of cancer cells using the plasmid carrying ING4 gene and demonstrating its efficacy in various cancer cells. Materials and Method: After replication and purification of pcDNA3.ING4 plasmid DNA, three different carrier systems have been developed to transport this DNA: SLN, Niosome and PEI-derived polymeric nanoparticles. Hot microemulsion method was used for the preparation of SLNs. Niosome formulation was prepared by modified thin-film hydration method. Hydrophobically modified PEIs were synthesized by N-acylation method using aliphatic lipids. Results and Conclusion: Non-viral carrier systems were tested in the indicated cell cultures after complexing with ING4 gene carrier plasmid DNA and their effect on proliferation was observed: L929, MCF-10-A, MCF-7, MDA-MB-231, MDA-MB-436, PC-3, Calu-1. ING-4 carrier systems have been shown to suppress proliferation in cancer cells. The effects of carrier systems on cancer cells were compared for which was more effective. L929 mouse fibroblast cells were used to observe the effect of prepared carrier systems on healthy cells. To observe transfection; system that optimized with ING4 is complexed with the plasmid containing the green fluorescence protein. After transfection, representative photographs were taken on the fluorescence microscope and transfection efficiency was demonstrated by quantitative analysis in flow cytometry.
Benzer Tezler
- Tebukonazolün Fusarium referans suşları üzerindeki etkisinin hücresel ve moleküler gösterimi
Cellular and molecular display of the effect of tebuconazole on Fusarium reference strains
ÖZLEM SEFER
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
Genetikİstanbul ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜLRUH ALBAYRAK
DOÇ. DR. EMRE YÖRÜK
- Exploring the propulsion performance of a gate rudder system as a novel energy saving device
Yenilikçi bir eenerji tasarruf cihazı olarak geçit dümen sisteminin sevk performansının incelenmesi
AHMET YUSUF GÜRKAN
Doktora
İngilizce
2024
Gemi Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiGemi İnşaatı ve Gemi Makineleri Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. UĞUR ORAL ÜNAL
- Kas invaziv olmayan mesane kanseri hastalarında rekürrens ve progresyon riski belirlemede nötrofil/lenfosit oranının yeri
The place of neutrophile/lymphocyte ratio for the detection of reccurence and progression in non-muscle invasive bladder cancer (NMİBC) patients
MAMMADBAGHIR AGHASIYEV
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2021
ÜrolojiSağlık Bilimleri ÜniversitesiÜroloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NURETTİN CEM SÖNMEZ
UZMAN CEMİL KUTSAL
- Yerli koyun ve keçilerde sol Fossa Paralumbalis' in makro-anatomik farklılıkları
Başlık çevirisi yok
K. OYA KAHVECİOĞLU
- Gemilerin manevra denklemlerinin bilgisayarla çözümü
The Solutions of equations of ship manoeuvres by the computer
EMİN KORKUT