Geri Dön

İnsan plasental alkali fosfatazının kısmen saflaştırılması fizikokimyasal ve kinetik özelliklerinin incelenmesi

Physicochemical and kinetic properties of partially purified human placental alkaline phosphatase

  1. Tez No: 59639
  2. Yazar: AYTAÇ KESKİEĞE
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. KADİRHAN SUNGUROĞLU
  4. Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 1997
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ankara Üniversitesi
  10. Enstitü: Tıp Fakültesi
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 97

Özet

Özet İnsan plasentasından 29.1 kat saflaştınlan alkali fosfatazın spesifik aktivitesi 6.40 IU/mg olarak bulunmuştur. Saflaştırma işlemleri, pH 8.6 tris tamponuyla homojenizasyon, butanol ekstraksiyonu, amonyum sülfatla çöktürme, ısı muamelesi ve Sephadex G-200 jel filtrasyonu basamaklarını içermektedir. Kısmen saflaştınlmış enzimin lineweaver-Burk grafiği çizilerek 37°C'de 0.1M Glisin- lmM Mg^ tamponunda (pH 10.5) p-NPP substratı için Km değeri 0.5 mM olarak saptandı. Enzimin p-NPP substratı için optimum pH'sı 10.6 olarak bulundu. Yapılan ısı ile inaktivasyon çalışmaları sonucunda, enzimin 65°C'de aktivitesinin hemen hemen %100'ünü koruduğu, 78°C'de ise aktivitesinin tamamını kaybettiği gözlemlenmiştir. Daha sonra enzim üzerine teobromin, ferrözsülfat, sodium tiyosiyanat ve etanol'un etkileri denenmiştir. Bunlardan etanol ve ferrözsülfaun enzimi inhibe ettiği ve etanol için inhibisyon tipinin karışık nonkompetetif olduğu, ferrözsülfat için ise inhibisyon tipinin unkompetitif olduğu saptanmıştır. Teobromin ve sodyumtiyosiyanatm enzim aktivitesi üzerine hiçbir etkisi gözlemlenmemiştir.

Özet (Çeviri)

Summary Alkaline phosphatase of human placenta was purified 29.1 fold with a final specific activity of 6.40 IU/mg by a procedure involving homogenization with tris buffer pH 8.6, extraction with butanol, ammonium sulphate precipitation, exposure to heat and Sephadex G-200 gel filtration. The apparent Km value of the purified enzyme for p-NPP in 0.1 M glycine- ImM magnesium buffer, pH 10.5 at 37°C was calculated (estimated) to be 0.50 mM from Lineweaver-Burk plot. The enzyme had a pH optimum 10.6 for p-NPP. Heat inactivation studies showed that the enzyme remained almost 100% stable at 65°C but it was completely inactivated at 78°C. Subsequently, the effects of theobromine, sodium thiocyanate, ferrous sulphate and ethanol on ALP were investigated. The inhibition type for ferrous sulphate and ethanol were uncompetitive and mixed noncompetitive respectively. However theobromine and sodium thiocyanate did not affect enzyme activity.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    517175

    Application of carbocatalysts in water/wastewaterpractices: removal of endocrine disrupting compound bisphenol a

    Karbokatalizörlerin su/atıksu uygulamalarında kullanımı: endokrin bozucu bisfenol a kirleticisinin giderimi

    ILAHA GAFARLI

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    Çevre Mühendisliğiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Çevre Bilimleri Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. TUĞBA ÖLMEZ HANCI

  2. Tez No

    111915

    MRP1 (Multidrug Resistance-associated Protein 1) ile transfekte edilen 293 insan embriyonik böbrek hücre dizisinde MRP1 protein ekspresyonunun varlığının western blot ve flow sitometri ile gösterilmesi

    Demonsration of MRP1 (Multidrug Resistance-associated Protein 1) protein expression by western blotting and flow cytometry in 293 human embryonic kidney cell line

    İLHAN AKAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    BiyokimyaAkdeniz Üniversitesi

    Biyokimya Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. TOMRİS ÖZBEN

  3. Tez No

    709793

    Spinal anestezi yapılan sezaryen vakalarında göbek çevresi ve columna vertebralis uzunluğunun intraoperatif hipotansiyon ile ilişkisi

    The relationship between abdominal circumference and columna vertebralis length with intraoperative hypotension in cases of cesarean section undergoing spinal anesthesia

    BAHAR USLU BAYHAN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Anestezi ve ReanimasyonSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Anesteziyoloji ve Reanimasyon Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ALİ İHSAN YÜREKLİ

  4. Tez No

    699277

    Family conflicts in the plays of Eugene O'Neill, Sam Shepard and Harold Pinter

    Eugene O'Neill, Sam Shepard ve Harold Pinter'ın oyunlarındaki aile içi çatışmalar

    AYŞE GÜLSÜM KARAALİOĞLU

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2021

    İngiliz Dili ve Edebiyatıİstanbul Aydın Üniversitesi

    İngiliz Dili ve Edebiyatı Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. FERMA LEKESİZALIN

  5. Tez No

    777871

    Kendiliğinden düşük ile sonuçlanan kromozomal olarak normal veya sayısal anomaliye sahip trofoblastik dokularda, plasentogenezde aktivatör ve inhibitör etkili miRNA'ların ekspresyon seviyelerinin araştırılması

    Investigation of expression levels of activator and inhibitor miRNAs in placentogenesis in trophoblastic tissues with chromosomally normal or numerical anomalies that result in spontaneous abortion

    ELVİN KAZANCIOĞLU

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    GenetikGazi Üniversitesi

    Tıbbi Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MERAL YİRMİBEŞ KARAOĞUZ

Geri Dön