Geri Dön

Yeni izolat Bacillus subtilis E6-5 suşundan proteaz: Üretim koşullarının optimizasyonu, kısmi saflaştırılması, karakterizasyonu ve deri endüstrisindeki potansiyel uygulamaları

Protease from new isolate Bacillus subtilis E6-5 strain: Optimization of production conditions, partial purification, characterization, potential applications in leather industry

  1. Tez No: 653777
  2. Yazar: BEHİCE ZEREN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. ELİF DEMİRKAN
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Biyoloji, Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2020
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Bursa Uludağ Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 171

Özet

Bu çalışmada, Bacillus subtilis E6-5 suşu proteaz kaynağı olarak kullanılmış ve farklı besi yerlerinde proteaz üretim kapasitesi açısından test edilmiştir. Proteaz üretimi için ortamın optimizasyonu besinsel ve fiziksel koşullar değiştirilerek elde edilmiştir. Maksimum proteaz üretimi, besi yeri bileşiminde, sükroz (karbon kaynağı), tripton (azot kaynağı) BaCl2 + CaCl2 (metal iyonları) kullanılarak elde edilmiştir. Maksimum proteaz üretimi için optimal fiziksel parametreler 35°C, pH 8.0, 150 rpm çalkalanma hızı, %4 inokülasyon miktarı, 72 saat inokülasyon yaşı olarak belirlenmiştir. Optimal besinsel ve fiziksel parametreler kombine edilerek elde edilen yeni modifiye ortamda proteaz üretiminde 5 kat bir artış sağlanmıştır. Saflaştırılmış proteazın optimal sıcaklık ve pH değeri sırasıyla 60°C ve 7.0 olarak belirlenmiştir. Termostabilite çalışmaları, enzimin termostabil olduğunu göstermiştir. Saflaştırılmış enzim Ca2+, K2+ ve Mn2+ varlığında aktiftir. Enzim bir metalloproteinazdır. Enzimin Vmax ve Km kinetik değerleri sırasıyla 3333 U/mL ve 1 mM olarak saptanmıştır. Moleküler ağırlığı yaklaşık 51.5 kDa olarak belirlenmiştir. Enzimin -20°C'de 45 güne kadar stabilitesini korunduğu belirlenmiştir. Deriden kıl gidermede enzimatik işlem kimyasal işlemden daha efektif bulunmuştur. Histolojik analizler, proteazın derilerin kalitesini arttırdığını göstermiştir. Bacillus subtilis E6-5 suşu proteazı, deri endüstrisinde kullanım potansiyeline sahip olabilir.

Özet (Çeviri)

In this study, Bacillus subtilis E6-5 strain was used as a protease source and tested for protease production capacity in different media. Optimization of the medium for protease production was obtained by modifying nutritional and physical conditions. Maximum protease production has achieved using sucrose (carbon source), tryptone (nitrogen source) and BaCl2 + CaCl2 (metal ions) in medium composition. The optimal physical parameters for maximum protease production were determined as 35°C, pH 8.0, 150 rpm agitation rate, 4% inoculum size, 72 hours inoculum age. In the new modified medium obtained by combining optimal nutritional and physical parameters, a 5-fold increase in protease production was achieved. The optimal temperature and pH of the purified protease were determined as 60°C and 7.0, respectively. Thermostability studies have shown that the enzyme is thermostable. The purified enzyme was active in the presence of Ca2+, K2+ and Mn2+. The enzyme was a metalloprotease. Vmax and Km kinetic values of the enzyme were determined as 3333 U/mL and 1 mM, respectively. The molecular weight was determined about 51.5 kDa. The activity of the enzyme was found to be stable up to 45 days at -20ºC. The enzymatic treatment was found to be more effective than the chemical treatment for hair removal from the skin. Histological analyses revealed that the protease has enhanced the quality of skins. The protease of Bacillus subtilis E6-5 strain may have the potential to be used in the leather industry.

Benzer Tezler

  1. Bazı yeni benzoksazol türevi schiff bazlarının sentezi, yapılarının aydınlatılması ve mikrobiyolojik etkileri üzerine çalışmalar

    Synthesis, structure elucidation and microbiological activity studies of novel schiff bases of benzoxazole derivatives

    BETÜL CEYLAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    Eczacılık ve FarmakolojiAnkara Üniversitesi

    Farmasötik Kimya Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ESİN AKI

  2. Yeni 2-(p-Sübstitüebenzil)-5-(2-Sübstitüeasetamido)benzoksazol türevlerinin sentezi, yapılarının aydınlatılması, mikrobiyolojik etkileri ve kantitatif yapı-etki ilişkileri çalışmaları

    Synthesis, structure elucidation, microbiological activity and quantitative structure-activity relationshipsstudies of novel 2-(p-Substitutedbenzyl)-5-(2-Substitutedacetamido)benzoxazole derivatives

    MUSTAFA ARISOY

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2007

    Eczacılık ve FarmakolojiAnkara Üniversitesi

    Farmasötik Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. ÖZLEM TEMİZ-ARPACI

  3. Termofilik geobacillus üyelerinin hücresiz süpernatantlarının antimikrobiyal etkilerinin taranması ve potansiyel bakteriyosin benzeri bir termostabil peptidin kısmi karakterizasyonu

    Screening of antimicrobial effects of cell-free supernatants of members of thermophilic geobacillus and partial characterization of a potential bacteriocine-like a thermostable peptide

    DENİZ ABACI

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    MikrobiyolojiAnkara Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ARZU ÇÖLERİ CİHAN

  4. Identification and biochemical characterization of novel bacteria associated with Triticum monococcum ssp. monococcum

    Triticum monococcum ssp. monococcum kökleri ile ilişkili yeni bakterilerin tanımlanması ve biyokimyasal karakterizasyonu

    ÖMER CAN ÜNÜVAR

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2021

    BiyokimyaBolu Abant İzzet Baysal Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ERCAN SELÇUK ÜNLÜ

  5. Investigation of antibiotic resistance, bacteriocin and enzyme production of haloversatile bacteria in salt used for skin preservation, controlling with an antimicrobial substance

    Deri korumasında kullanılan tuzda bulunan haloversatıle bakterilerin antibiyotik direnci, bakteriyosin ve enzim üretiminin araştırılması, bir antimikrobiyal madde ile kontrolü

    HAIDER SABAH ABDULHUSEIN ABDULHUSEIN

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    BiyolojiMarmara Üniversitesi

    Mikrobiyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. PINAR ÇAĞLAYAN