Geri Dön

Fare embriyolarının tip III antifreeze protein ve human heat shock protein 70 ile vitrifikasyonu ve çözdürülmesi sonrası in vitro gelişim oranlarına etkisi

The effect of TYPE III antifreeze protein and human heat shock protein 70 added to freezing vitrification mediums of mouse embryos on in vitro development rates

PDF İndir

  1. Tez No: 655779
  2. Yazar: MUSTAFA BODU
  3. Danışmanlar: PROF. DR. MEHMET BOZKURT ATAMAN, DR. ALİ CİHAN TAŞKIN
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Veteriner Hekimliği, Veterinary Medicine
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2021
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Selçuk Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Dölerme ve Suni Tohumlama Ana Bilim Dalı​
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 74

Özet

Sunulan tez çalışmasında fare embriyolarının vitrifikasyon medyumlarına eklenen Antifreeze Protein tip III (AFPIII) ve Human Heat Shock Protein 70'in dondurma çözdürme sonrası in vitro gelişim ve hücre sayıları üzerine etkisi incelendi. Toplamda 10 adet dişi fareye senkronizayon amaçlı 10 IU PMSG enjeksiyonundan 48 saat sonra 10 IU hCG intraperitoneal olarak enjekte edildi. Fareler hCG enjeksiyonundan hemen sonra aynı kafeste 2 dişi 1 erkek olacak şekilde çiftleştirildi. Çiftleştirmeden 24 saat sonra farelerde vaginal plug oluşumu kontrol edildi ve vaginal plug bulunan fareler operasyon masasına alındı. Farelerin ötenazileri yapıldıktan sonra pronüklear aşamadaki embriyolar CO2 gerektirmeyen 150 IU hyaluronidaz içeren Human Tubal Fluid - 4-(2-hidroksietil)-1-piperazine etansulfonik asit (HTF-HEPES) medyumu içerisine aktarılarak kümülüsleri uzaklaştırıldı. Embriyolar donduruluncaya kadar ekilibrasyon medyumu içerisinde 37oC'de inkübatörde bekletildi. Pozitif control (K+), negatif control (K-), Antifreeze Protein tip III (AFPIII)'ün 200, 400 ve 800 ng/ml (AFPIII200, AFPIII400, AFPIII800) ve Human Heat Shock Protein 70 (HHSP70)'in 1, 2 ve 4µg/ml (HHSP70-1, HHSP70-2, HHSP70-4) dozları kullanılarak toplamda 8 grup oluşturuldu ve katı yüzey vitrifikasyon (solid surface vitrification, SSV) solüsyonu hazırlandı. Embriyolar bu medyumlarda vitrifikasyon yöntemi ile donduruldu. Dondurulan embriyolar, gelişim oranlarının belirlenmesi amacıyla çözdürülerek kültür medyumuna aktarıldı ve in vitro gelişim oranları 24, 48, 72 ve 96. saatlerde izlendi. Tam blastosist aşamasına gelen embriyolardan her gruptan 4'er tane alınarak iç hücre kitlesi (ICM), trofektoderm (TE) ve toplam hücre sayılarının belirlenmesi amacı ile Hoeschst 33258 ve propidium iyot (PI) boyaları ile boyandı. Elde edilen in vitro gelişim oranları, ICM, TE ve toplam hücre sayılarının istatistiksel analizleri SPSS 25.0 programı One – Way ANOVA ile yapıldı. Embriyoların in vitro gelişimleri açısından 0 ve 24. saatlerde elde edilen oranlar açısından gruplar arasında istatistiksel bir farklılık tespit edilemezken (p>0,05); 48, 72 ve 96. saatlerde elde edilen oranlar açısından gruplar arasında istaistiksel farklılıkların olduğu belirlendi (p

Özet (Çeviri)

In the thesis study presented, the effects of Antifreeze Protein type III (AFPIII) and Human Heat Shock Protein 70 added to vitrification medium of mouse embryos on in vitro growth and cell numbers after freezing and thawing were investigated. A total of 10 female mice were injected intraperitoneally with 10 IU hCG 48 hours after 10 IU PMSG injection for synchronization. Mice, after hCG injection, 2 females and 1 male were mated in same cage. 24 hours after mating, the condition of the vaginal plug in mice was checked and the mice with vaginal plugs were taken to the operating table. After the mice were euthanized, their cumulus was removed by transferring the embryos at the pronuclear stage into Human Tubal Fluid - 4-(2-hidroxyethyl)-1- piperazine ethanesulfonic acid (HTF-HEPES) not requiring CO2 and containing 150 IU hyaluronidase. The embryos were kept in equilibration medium at 37oC until they were frozen. Positive control (K+), negative control (K-), containing doses of Antifreeze protein type III (AFPIII) 200, 400 and 800 ng/ml (AFPIII200, AFPIII400, AFPIII800) and Human Heat Shock Protein 70 (HHSP70) 1, 2 and 4 µg/ml (HHSP70-1, HHSP70-2, HHSP70-4) a total of 8 groups was formed and solid surface vitrification (SSV) medium was prepared. Following the embryos were vitrified in these medium, they were thawed and transferred to the culture medium and in vitro development rates were followed at 24, 48, 72 and 96 hours. Four embryos at the full blastocyst stage were taken from each group and stained with Hoeschst 33258 and propidium iodine (PI) dyes in order to determine the inner cell mass (ICM), trophectoderm (TE) and total cell numbers. Statistical analyzes of obtained in vitro growth rates, ICM, TE and total cell numbers were performed with SPSS 25.0 program One-Way ANOVA. While there was no statistical difference among the groups in terms of in vitro development of embryos at the 0 and 24th hours (p> 0,05), It was determined that there were significiant statistical differences between the groups in the rates obtained at 48, 72 and 96 hours (p

Benzer Tezler

  1. Tez No

    853372

    Investigation of mechanoregulatory role of desmin protein

    Investigation of mechanoregulatory role of desmin protein

    NİLÜFER DÜZ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Tıbbi BiyolojiHacettepe Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. PERVİN RUKİYE DİNÇER

  2. Tez No

    433384

    Proteomik yaklaşımlarla nörodejeneratif mekanizmaların araştırılması ve tedaviye yönelik potansiyel hedeflerin belirlenmesi

    The investigation of neurodegenerative mechanisms by using proteomic approaches and determining potential therapeutic targets

    ÇİĞDEM ACIOĞLU

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    Moleküler TıpKocaeli Üniversitesi

    Tıbbi Genetik ve Moleküler Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HAKAN SAVLI

    YRD. DOÇ. DR. AHMET TARIK BAYKAL

  3. Tez No

    103240

    Fare embriyolarında kol ve bacak oluşumu üzerine retinoik asidin etkilerinin morfolojik olarak incelenmesi

    Başlık çevirisi yok

    OYA AKÇIN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2001

    Morfolojiİstanbul Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. LEYLA KUNTSAL

  4. Tez No

    288978

    Şeker hastalığının (Diabetes mellitus tip 1) kontrollü ovaryum stimülasyon uygulanmış fare oosit ve embriyolarının üzerindeki etkilerinin incelenmesi

    Investigation of diabetes(Diabetes mellitus type 1) effects on oocyte and embryos of controlled ovarian hyperstimulated mice

    ÖZCAN BUDAK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    BiyolojiKocaeli Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SÜREYYA CEYLAN

  5. Tez No

    838378

    CRISPR/CAS9 kullanılarak sığır preimplantasyon embriyolarının trofektoderm farklılaşmasında CDX2 rolünün araştırılması

    Investigation of CDX2 role in trophectoderm differentiation of bovine preimplantation embryos by using CRİSPR/CASs9

    EMEL TÜTEN SEVİM

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    BiyoteknolojiAkdeniz Üniversitesi

    Tarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. KEMAL KARABAĞ

Geri Dön