Sıçan duyusal sinir hücrelerinde kisspeptinin hücre içi kalsiyum sinyalleşmesi üzerine etkisi
Kisspeptin leads to calcium signaling in cultured rat dorsal root ganglion neurons
- Tez No: 674692
- Danışmanlar: PROF. DR. METE ÖZCAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyofizik, Biophysics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2021
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Fırat Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyofizik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 96
Özet
Bir hipotalamik nöropeptid olan kisspeptin, kemirgenlerde ağrı duyarlılığını değiştirdiği bilinen RF-amid ailesinin bir üyesidir. Ağrının hücresel modeli olan dorsal kök ganglionu (DKG) nöronlarında kisspeptin ve G protein-bağlı reseptör (GPR54)'ün eksprese edildiği ve kisspeptinin kemirgenlerde ağrı modülasyonu ile ilişkili olduğu bilinmektedir. Buna rağmen, kisspeptinin duyusal nöronlar üzerindeki etkileri ve mekanizmaları üzerine yapılmış bir çalışma henüz yoktur. Bu nedenle, bu çalışmanın amacı, kisspeptinin sıçan DKG nöron kültüründe hücre içi serbest kalsiyum ([Ca+2]i) seviyeleri üzerindeki nosiseptif/antinosiseptif etkilerini ve mekanizmasını araştırmaktır. Bu tez çalışmasında DKG nöronları primer hücre kültürü, 1-2 günlük Spraque- Dawley sıçanlar (n=20) kullanılarak hazırlanmıştır. DKG nöronları, 1 μmol Fura-2 asetoksi metil ester (AM) ile boyanmış ve [Ca+2]i yanıtları, 340 nm ve 380 nm'de eksitasyon ve 510 nm'de emisyon ile dijital görüntüleme mikroskobu kullanılarak 340 nm /380 nm oranındaki değişikliklerle ölçülmüştür. Farklı dozlarda (100 nM, 300 nM ve 1000 nM, en az 3 tekrar) kisspeptin-10 uygulamasının [Ca+2]i seviyelerine etkisi gözlenmiştir. Ayrıca hücre dışı kalsiyum yokluğunda, kisspeptinin, [Ca+2]i üzerine etkilerini ve bu etkileri Protein Kinaz C (PKC) yolağı üzerinden gösterip göstermediğini belirlemek için PKC inhibitörü şeletrin klorit (ChCl) ön muamelesi ile de etkileri gözlenmiştir. Kisspeptin-10'un, DKG nöronlarına uygulanması [Ca+2]i seviyesini doza bağımlı ve anlamlı olarak arttırmıştır. 340 nm/ 380 nm oranları sırasıyla (bazal 100,0±0.0 % vs kisspeptin): % 118,4±4,6 (100 nM kisspeptin, n=41, p
Özet (Çeviri)
Kisspeptin, a hypothalamic neuropeptide, is a member of the RF-amide family known to alter pain sensitivity in rodents. It is known that kisspeptin and G protein-coupled receptor (GPR54) is expressed in dorsal root ganglion (DRG) neurons, the cellular model of pain, kisspeptin is associated with pain modulation in rodents. Despite this, there are no studies yet on the effects and mechanisms of kisspeptin on sensory neurons. Therefore, the purpose of this study is to investigate the nociceptive/antinociceptive effects and mechanism of kisspeptin on intracellular free calcium ([Ca2+]i) levels in rat DRG neuron culture. In this thesis study, DRG neurons were prepared using primary cell culture, Spraque-Dawley 1-2 day old rats (n = 20). DRG neurons were loaded with 1 µM Fura-2 acetoxy methyl ester (AM) and intracellular free calcium responses were measured with excitation at 340 nm and 380 nm and emission at 510 nm by digital imaging microscopy with changes of the ratio 340 nm/ 380 nm. The effect of kisspeptin-10 administration at different doses (100 nM, 300 nM and 1000 nM, at least 3 replicates) on [Ca2+]i levels was observed. In the absence of extracellular calcium, the effects of kisspeptin were also observed with the Protein Kinase C (PKC) inhibitor chelerythrine chloride (ChCl) pretreatment to determine whether it exhibited its possible effects on [Ca2+]i signal via the PKC pathway. Bath application of kisspeptin-10 to DRG neurons increased [Ca2+]i levels in a dose-dependent and significant way. 340 nm / 380 nm ratios respectively (baseline 100.0 ± 0.0% vs kisspeptin): 118.4 ± 4.6% (100 nM kisspeptin, n = 41, p
Benzer Tezler
- Sıçan duyusal sinir hücre kültürlerinde kalsiyum-bağımlı potasyum kanallarının biyofiziksel ve farmakolojik yaklaşımlarla tanımlanması
Biophysically and pharmacologically identification of calcium dependent potassium channels in rat sense ganglion cell culture
K. TUĞRUL KUZGUN
- Opiorfinin nosiseptif kalsiyum sinyalleri üzerine etkisinin in vitro olarak sıçan duyusal sinir hücrelerinde araştırılması
An in vitro invastigation of the effects of ophiorphin on nociceptive calcium signaling rat sensory neurons
ÖMER FARUK KALKAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
FizyolojiKaradeniz Teknik ÜniversitesiFizyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AHMET AYAR
- Duyusal sinir hücrelerinde agomelatinin hücre içi kalsiyum sinyalleşmesi üzerine etkisi
The effect of agomelatine on intracellular calcium signaling in sensory neurons
BATUHAN BİLGİN
- Duyusal sinir hücrelerinde melatoninin voltaj bağımlı kalsiyum kanallarına etkisi
Effect of melatonin on voltage dependent calcium channels in sensory neuronal cells
METE ÖZCAN
- Ratlarda spinal kord yaralanmasında bevacizumabın etkilerinin araştırılması
An investigation of the effects of bevacizumab in spinal cord injury in rats
ALİ SAMET TOPSAKAL
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2022
NöroşirürjiKaradeniz Teknik ÜniversitesiNöroşirürji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERTUĞRUL ÇAKIR