Geri Dön

Development of insect resistant transplastomic potato lines against colorado potato beetle (Leptinotersa decemlineata)

Kolorado patates böceğine (Leptinotarsa decemlineata) karşı böceklere dayanıklı transplastomik patates hatları gelıştırılmessı

PDF İndir

  1. Tez No: 683923
  2. Yazar: MD JAKIR HOSSAIN
  3. Danışmanlar: DR. ALLAH BAKHSH
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Ziraat, Agriculture
  6. Anahtar Kelimeler: CPB, ekonomik zarar, böcek direnci, bacillus thuringiensis, transplastomik yaklaşım, Insect pests, economic damages, insect resistance, bacillus thuringiensis, transplastomic approach
  7. Yıl: 2021
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Niğde Ömer Halisdemir Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Tarımsal Genetik Mühendisliği Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Bitkisel Biyoteknoloji Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 173

Özet

Patates Böceğinden kaynaklanan ürün kaybının azaltılması amacıyla, patates kloroplastı, biyolistik gen tabancası aracılı transformasyon protokolüyle transforme edilmiştir. Bombalanan eksplantlar BAP (2.0 mg L-1), NAA (0.2 mg L-1), TDZ (2.0 mg L-1), GA3 (0,1 mg L-1) ve ayrıca seleksiyon için spektinomisin 50 mg L-1 içeren MS ortamında büyütülmüştür. Santae çeşidi en yüksek oranda (%85.7) transplastomik sürgün üretirken, Kuroda çeşidinin yaprak eksplantları en yüksek sayıda (%92) kallus indüklemiştir. Sürgün rejenerasyonu için Thiadiazuron daha yeterli (%41) bulunmuştur. Santae ve Challenger çeşitlerinin sürgün rejenerasyon etkililiğini (%9.6) Simply Red (%8.8) takip etmiştir. PCR amplifikasyonu 21 transplastomik filizin 16sı spektinomisine dayanıklı olarak sonuçlanmıştır. İlgili genlerin entegrasyonu, PCR ve Southern blot ile doğrulanırken, ekspresyon seviyesini kaydetmek için RT-qPCR ve ELISA kullanıldı. Görsel markör geni gfp'nin lokalizasyonu konfokal lazer taramalı mikroskop ile tespit edilmiştir. Transplastomik hatlar CPB'nin larva ve yetişkin aşamasında yüksek böcek ölümünü (%100) sağlamak için yeterli olmuştur. Sa7, SR5 ve Ch3 transplastomik hatları CPB'nin yetişkin ve larva instar aşamasında daha böcek öldürücü etki göstermiştir. İki insektisidal gene sahip transplastomik hatlarımızın, insektisite dirençli CPB'yi kontrol etmek için uygun bir çözüm olarak kalacağına inanıyoruz.

Özet (Çeviri)

Aimed to mitigate the CPB mediate crop losses, Potato chloroplast was transformed with biolistic gene gun mediated transformation protocol. Bombarded explants ( Leaves and internode) were cultured on MS medium supplemented with BAP (2.0 mg L−1), NAA (0.2 mg L−1), TDZ (2.0 mg L−1) as well as GA3 (0.1 mg L−1) where spectinomycin 50 mg L-1 was used as a selection agent. Leaf explants of cultivar Kuroda induced highest (92%) number of calli where cultivar Sante produced the highest (85.7%) transplastomic shoots. Thiadiazuron was found more proficient (41%) for shoot regeneration. Cultivar Sante and Challenger showed 9.6% shoot regeneration efficiency (%) followed by cultivar Simply Red (8.8%). PCR amplification yielded 16 transplastomic plantlets out of 21 spectinomycin resistant shoots. Target gene integration was confirmed by PCR and Southern blot, whereas the RT-qPCR and ELISA was used to record the expression level. Localization of visual marker gene gfp was conducted by Laser scanning confocal microscopy. The transplastomic lines were capable to ensure high mortality (100%) to both larvae and adult CPB where transplastomic lines Sa7, SR5 and Ch3 showed more insecticidal effects. Foliage consumption and weight gain of CPB feed on transplastomic leaves were lower compared to their control plants. We believe that our transplastomic lines with two insecticidal genes will remain a viable solution to control the insecticide resistant CPB.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    446578

    cry1Ac ve cry2A genlerine sahip böceğe dayanıklı tütün hatlarının geliştirilmesi

    Development of insect resistant tobacco lines expressing cry1Ac and cry2A genes

    TOLGA DİNÇ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2016

    BiyolojiNiğde Ömer Halisdemir Üniversitesi

    Tarımsal Genetik Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. ALLAH BAKHSH

  2. Tez No

    386429

    Yaralanmayla aktif olan AoPR1 promotörünün kontrolü altındaki CRY genlerinin protein üretimlerinin patateste sınırlandırılması

    Restriction of CRY gene protein production under the control of wound-induced AoPR1 promoter in potato

    HÜSEYİN ABDULLAH AHMED AHMED

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    BiyoteknolojiAnkara Üniversitesi

    Tarla Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SEBAHATTİN ÖZCAN

  3. Tez No

    515860

    Development of potato lines resistant to colorado potato beetle ( CPB ) using RNAi-based transformation approach

    RNAi yaklaşimi kullanilarak patates böceğine ( CPB ) dayanikli patates hatlarinin geliştirilmesi

    TAHIRA HUSSAIN

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    BiyoteknolojiNiğde Ömer Halisdemir Üniversitesi

    Tarımsal Genetik Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MEHMET EMİN ÇALIŞKAN

  4. Tez No

    297571

    Tohum böceklerine (Bruchidae:Coleoptera) dayanıklı transgenik fasulye (Phaseolus vulgaris L.) bitkilerinin elde edilmesine yönelik araştırmalar

    Researches on development of transgenic common beans (Phaseolus vulgaris L.) resistant to seed insects (Bruchidae:Coleoptera)

    SEVİL SAĞLAM

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2009

    BiyoteknolojiAnkara Üniversitesi

    Tarla Bitkileri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. CEMALETTİN Y. ÇİFTÇİ

  5. Tez No

    268470

    Development of analysis methods for cry1ac and sam-k gene lines in tomato using PCR and real-time PCR

    Domatesteki cry1ac ve sam-k gen hatları için PZR ve eş-zamanlı PZR kullanılarak analiz metodlarının geliştirilmesi

    SAHRA UYGUN

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2010

    BiyoteknolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. G. CANDAN GÜRAKAN

    DR. REMZİYE YILMAZ

Geri Dön