CD19 eksikliğinde Foxp3 ekspresyonunun akan ölçerde değerlendirilmesi
Foxp3 expression in CD19 deficiency evaluation of flowing meter
- Tez No: 685512
- Danışmanlar: PROF. DR. İSMAİL REİSLİ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Allerji ve İmmünoloji, Allergy and Immunology
- Anahtar Kelimeler: B lenfositleri, Gen ifadesi, Mutasyon, Otoimmünite, T lenfositleri, T lenfositleri-düzenleyici, B lymphocytes, Gene expression, Mutation, Autoimmunity, T lymphocytes, T lymphocytes-regulatory
- Yıl: 2021
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Necmettin Erbakan Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: İmmünoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
CD19 eksikliği, B lenfosit defekti olarak tanımlanmıştır ve CD19'un mutasyonu olan hastalarda otoimmüniteye (sistemik lupus eritematozus, IgA nefropatisi) sebep olduğu gösterilmiştir. Fakat otoimmünite ilişkili transkripsiyon faktörü Foxp3 ekspresyonu hastalarda analiz edilmemiştir. Bu çalışma ile; CD19 eksikliğinde gelişen otoimmünite durumu ile Regülatör T hücre (Treg) leri arasında bir ilişki olup olmadığının araştırılması amaçlanmıştır. Çalışmaya, akan hücre ölçer ve genetik analizle CD19 eksikliği tanısı almış olan 3 hasta, bu hastalarla akrabalık ilişkisi bulunan ve genetik olarak doğrulanmış 11 taşıyıcı ve bu hastalarla akrabalığı olmayan 10 sağlıklı kontrol alınmıştır. Hasta, taşıyıcı ve kontrollerden alınan tam kan örneklerinden periferik kan mononükleer hücreler (PBMC) izole edilmiştir. İzole edilen PBMC'lerden CD3, CD4, CD25 ve CD127 ekspresyonlarını değerlendirmek amacıyla yüzey boyama işlemi, Foxp3 ekspresyonunun değerlendirilmesi için hücre içi boyama yöntemi gerçekleştirilmiştir. Boyama sonrası FACSCanto II akan hücre ölçerde yardımcı T lenfositlerin ve Treg hücrelerin yüzey belirteçlerinin ekspresyon yüzdeleri ve ortalama floresan yoğunlukları (MFI) ile ve intrasitoplazmik Foxp3'ün yüzde ve MFI değerleri belirlenmiştir. Hasta, taşıyıcı ve kontrol grubunun CD4+ T lenfosit ve Treg hücre belirteçlerinin ekspresyon yüzdeleri ve mean floresan yoğunluğu (MFI) değerleri karşılaştırıldı. CD4+ T lenfosit yüzdeleri ve Treg hücrelerin belirteçlerinin yüzde değerleri yönünden gruplar arasında istatistiksel olarak anlamlı bir fark saptanmamıştır (p>0.05). Hasta grubu, taşıyıcı grubu ve kontrol grubunun CD4+ T lenfosit MFI değeri ve Treg hücrelerin belirteçlerinin (CD4+ CD25+ CD127- , CD4+ FOXP3 ve CD4+ CD25+) MFI değerleri yönünden istatistiksel olarak anlamlı farklılık bulunmuştur (p=0,001). Kontrol grubunun CD4+ T lenfosit MFI değeri, taşıyıcı grup (p=0,003) ve hasta grubundan (p=0,033) istatistiksel olarak anlamlı derecede daha yüksektir. Benzer şekilde kontrol grubunun Treg hücre belirteçlerinin (CD4+CD25+CD127-, CD4+ FOXP3, CD4+CD25+) MFI değerleri de taşıyıcı ve hasta gruplarından istatistiksel olarak anlamlı derecede yüksektir. Bu çalışma ile CD19 eksikliği olan hastalarda ve taşıyıcılarda yardımcı T lenfosit ve Treg lenfositlerin belirteçlerinin MFI değerlerinin kontrole kıyasla düşük olduğu gösterilmiştir. Bu bulgumuz, CD19 eksikliği olan veya taşıyıcı olan bireylerde yardımcı T lenfositlerin etkilenmiş olabileceğini ve bozulmuş baskılayıcı fonksiyon sebebiyle T hücre aracılı otoimmünitenin gelişimi ile ilişkili olabileceğini düşündürmüştür.
Özet (Çeviri)
CD19 deficiency has been described as a B lymphocyte defect. It has been shown to cause autoimmunity (systemic lupus erythematosus, IgA nephropathy) in patients with CD19 mutation. With this study, it was aimed to investigate whether there is a relationship between the status of autoimmunity developed in CD19 deficiency and regulator T cells. The study included 3 patients who were diagnosed with CD19 deficiency by flow cell meter and genetic analysis, 11 carriers with a kinship relationship with these patients and genetically confirmed and 10 healthy controls who were not related to these patients. Peripheral blood mononuclear cells (PBMC) were isolated from whole blood samples from patients, carriers and controls. Surface staining was performed to evaluate the expressions of CD3, CD4, CD25 and CD127 from isolated PBMCs, and intracellular staining method was used to evaluate Foxp3 expression. After staining, expression percentages and mean fluorescence intensity (MFI) of helper T lymphocytes and Treg cells on the FACSCanto II flow cytometer and the percentage and MFI values of intracytoplasmic Foxp3 were determined. Expression percentages and mean fluorescence intensity (MFI) values of CD4+ lymphocyte and Treg cell markers of the patient, carrier and control groups were compared. There was not statistically significant difference between the groups in terms of CD4+ T lymphocyte percentages and percentage values of Treg cells (p>0.05). A statistically significant difference was found between the patient group, carrier group and control group in terms of CD4 + T lymphocyte MFI value and MFI values of the markers of Treg cells (CD4+ CD25+ CD127-, CD4+ FOXP3 and CD4+ CD25+) (p=0,001). The CD4+ T lymphocyte MFI value of the control group was statistically significantly higher than the carrier group (p=0,003) and the patient group (p= 0,033). Similarly, MFI values of Treg cell markers (CD4+ CD25+ CD127-, CD4+ FOXP3, CD4+ CD25+) of the control group were statistically significantly higher than the carrier and patient groups. In this study, it was shown that the MFI values of T helper T lymphocyte and Treg lymphocyte markers were lower in patients with CD19 deficiency and carriers compared to the control. This finding suggests that the function of helper T lymphocytes may be affected in individuals with CD19 deficiency or carriers, and may be associated with the development of T cell mediated autoimmunity due to impaired suppress or function
Benzer Tezler
- Periodontitisli bireylerin tükürük ve serum örneklerinde 8-hidroksideoksiguanozin (8-OHDG) ve forkhead BOX-O1 (FOXO1) seviyelerinin değerlendirilmesi
Evaluation of saliva and serum levels of 8-hydroxideoxyguanosine (8-OHDG) and forkhead BOX-O1 (FOXO1) i̇n periodontitis patients
ELİF SELİN GÜRBÜZ
Doktora
Türkçe
2023
Diş HekimliğiAnkara ÜniversitesiPeriodontoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MERAL GÜNHAN
- Investigation of immune impairment status in primary immune deficiency and spinal cord injury
Birincil bağışıklık yetersizliği ve omurilik yaralanmasında bağışıklık bozukluğu durumunun araştırılması
İREM EVCİLİ
Yüksek Lisans
İngilizce
2021
Genetikİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İHSAN GÜRSEL
- Kistik fibrozis dışı bronşektazi hastalarında immün yetmezlik sıklığı ve klinik parametrelerle ilişkisi
The frequency of immun deficiency in patients with non cf bronchiectasis and relationship with clinical parametres
MELAHAT BEKIR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2016
Göğüs HastalıklarıMarmara ÜniversitesiGöğüs Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BERRİN CEYHAN
- Derin yerleşimli veya tekrarlayan enfeksiyonlu çocuklarda immün sistemi değerlendirilmesi
Başlık çevirisi yok
ERKUT ÖZTÜRK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2009
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıSağlık BakanlığıKadın Hastalıkları ve Doğum Ana Bilim Dalı
DR. RENGİN ŞİRANECİ
- Deneysel interstisyel sistit modelinde intravezikal hyaluronik asit uygulamasının inflamatuar hücreler üzerine etkisinin değerlendirilmesi
The evaluation of intravesicale hyaluronic acid application effect at the inflammatory cells in the experimental model of interstitial cystitis
İLKER FATİH ŞAHİNER
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2015
Histoloji ve EmbriyolojiAkdeniz ÜniversitesiÜroloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AHMET DANIŞMAN