Fitaz enziminin sulu ikili-faz ekstraksiyon sistemleri ile saflaştırılması ve karakterizasyonu
Purification and characterization of phytase by aqueous two phase extraction system
- Tez No: 691382
- Danışmanlar: PROF. DR. SEÇİL ÖNAL
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2021
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 120
Özet
Sulu ikili-faz sistemleri (ATPS) bir sıvı-sıvı ekstraksiyon tekniğidir. Proteinlerin, virüslerin, enzimlerin ve diğer biyomoleküllerin ekstraksiyonunda ve saflaştırılmasında kullanımı açısından yüksek potansiyele sahiptir. Bu nedenle endüstride ve bilimsel çalışmalarda büyük ilgi görmektedir. Sulu ikili-faz sistemleri kolay hazırlanması, hızlı ve yüksek verimle bir saflaştırma sağlaması, maliyetinin düşük olması gibi avantajlara sahiptir. Fitazlar (myo-inositol hekzakisfosfat fosfohidrolazlar), fitik asidi myo-inositol ve inorganik fosfatlara hidrolize ederek beslenme karşıtı etkilerinin ortadan kaldırılmasına yol açan enzimlerdir. Tek mideli hayvanların sindirim sistemlerinde fitaz aktivitesi eksikliği olduğundan, diyetlerine fitaz eklenmesi kalsiyum, magnezyum, fosfor ve proteinlerin temin edilebilirliğini arttırır. Fitazlar hem yem sanayi hem de gıda sanayinde uygulama bulan enzimlerdir. Bu tezde soya unundan izole edilen fitaz enziminin, Polimer/Tuz sulu ikili-faz ekstraksiyon sistemi kullanılarak saflaştırılması ve enzimin karakterizasyonu amaçlanmıştır. Sulu ikili faz sisteminin optimizasyonu gerçekleştirilmiş, enzim aktivitesine etki eden bazı parametreler incelenmiş ve enzimin kararlılığı çalışmaları yapılmıştır. %15 (w/v) PEG-4000, %15 (w/v) sodyum sitrat (pH 5,5; 25 ⁰C) kullanılarak hazırlanan sulu ikili-faz sisteminde fitaz enzimi tuzca zengin alt fazda toplandı ve 4,1 kat saflaştırıldı. Enzimin optimum pH ve sıcaklığı ise sırasıyla pH 4,5 ve 55 ⁰C olarak belirlendi. Enzimin KM ve Vmax değerleri sırasıyla 0,608 mM ve 0,06 U olarak belirlendi. Polimer-tuz tabanlı ATPS ile saflaştırılan soya fitazı geniş bir pH ve sıcaklık aralığında oldukça kararlı bir enzimdir. Geleneksel metodlara kıyasla, fitazın saflaştırılmasında kullanılan bu tek adımlı ekstraksiyon metodu basit, ekonomik ve etkili bir metod olup hazırlanan enzim preparatı ise sahip olduğu katalitik özellikleri bakımından gıda ve yem sanayindeki uygulamalarında kullanılabilecek uygun bir preparattır.
Özet (Çeviri)
Aqueous two phase systems (ATPS) is a liquid-liquid extraction technique. It has high potential for use in the extraction and purification of proteins, viruses, enzymes and other biomolecules. For this reason, it is of great interest in industry and scientific studies. Aqueous binary phase systems have advantages such as easy preparation, fast and high efficiency purification, and low cost. Phytases (myo-inositol hexakisphosphate phosphohydrolases) are enzymes hydrolyzing phytic acid to myo-inositol and inorganic phosphates leading to the elimination of its anti-nutritional effects. Since there is a lack of intrinsic phytase activity in the digestive tracts of monogastric animals, phytase addition to their diet results in increased availability of calcium, magnesium, phosphorus and proteins; which would be otherwise unavailable as bound to phytate. Phytases are enzymes that find applications in both the feed industry and the food industry In this thesis, it is aimed to purify and characterize the phytase enzyme isolated from soy flour by using Polymer/Salt aqueous two-phase extraction system. Optimization of the aqueous two phase system and some parameters affecting to the enzyme activity were investigated and enzyme stability studies were realized. The phytase enzyme was partitioned in the salt-rich bottom phase of % 15 (w/v) PEG-4000, % 15 (w/v) sodium citrate (pH 5,5; 25⁰C) aqueous two-phase system and purified with 4,1 fold. The optimum pH and temperature were determined as to be pH 4,5 and 55 ⁰C, respectively. The KM ve Vmax values were found as 0,608 mM and 0,06 U, respectively. The soybean phytase purified with a polymer-salt based ATPS is a very stable enzyme over a wide range of pH and temperature. Compared to the traditional methods this single-step extraction method used in purification of phytase is a simple, economical and effective method. The enzyme is a suitable preparation that can be used in food and feed applications due to its catalytic properties.
Benzer Tezler
- Properties and thermal inactivation kinetics of lipase and peroxidase from hazelnut in relation to natural hazelnut meal stability
Natürel fındık unundaki acılaşma ile ilgili olarak fındık lipaz ve peroksidaz enzimlerinin etkisizleştirme kinetiği
FERDA SEYHAN
- Effects of using phytase enzyme with different enzyme combinations on performance and egg quality characteristics in laying hens
Fitaz enziminin farklı enzim kombinasyonları ile kullanılmasının yumurta tavuklarında performans ve yumurta kalite özellikleri üzerine etkileri
ASMA ESSE YUSUF
Yüksek Lisans
İngilizce
2024
Beslenme ve DiyetetikErciyes ÜniversitesiTarım Bilimleri ve Teknolojileri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. YUSUF KONCA
DR. ÖĞR. ÜYESİ MAHMUT KALİBER
- Fitaz anziminin immobilizasyonu, karakterizasyonu ve fitat degradasyonunda kullanımı
Immobilization and characterization of phytase and its use in phytate degradation
EVRAN BIÇAK
- Tirmit (Lacterius volemus) mantarından saflaştırılıp karakterize edilen fitaz enziminin, magnetik kitosan nanopartiküller üzerine immobilize edilmesi ve gıda endüstrisinde kullanılabilirliğinin araştırılması
Immobilized phytase enzyme which was purifed from tirmit mushroom (Lactarius volemus) and characterizated onto magnetic chitosan nanoparticles and investigation of it's usability in the food industry
HİCRAN ÖNEM
Yüksek Lisans
Türkçe
2015
Mühendislik BilimleriAtatürk ÜniversitesiNanobilim ve Nanomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HAYRUNNİSA NADAROĞLU
- Broyler yemlerine katılan fitaz enziminin serum ve tibia düzeyi ile besi performansı üzerine etkileri
The Effects of phytase enzyme added to broiler feeds on performance and phosphorus levels of serum and tibia
GÜRKAN ARSLAN
Doktora
Türkçe
1999
Veteriner HekimliğiUludağ ÜniversitesiHayvan Besleme ve Beslenme Hastalıkları Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. MUSTAFA EREN