Ispanaktan aquaporin saflaştırılması ve etkinliğinin incelenmesi
Purification of aquaporin from spinach and investigation of its efficiency
- Tez No: 718126
- Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ ÖZLEM ÜNLÜER, PROF. DR. ARZU ERSÖZ, PROF. DR. EBRU BİRLİK ÖZKÜTÜK
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Aquaporin, ANADOLUCA, Kriyojel kolon, FPLC, Aquaporin, ANADOLUCA, Cryogel column, FPLC
- Yıl: 2022
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Eskişehir Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Lisansüstü Eğitim Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyokimya Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 61
Özet
Tez çalışmasında, birçok bitkide ve ayrıca doğadaki diğer birçok organizmada su moleküllerinin biyolojik membranlar boyunca hızlı ve aktif geçişinde rol oynayan aquaporin su kanalı proteinlerinin saflaştırılması ve etkinliğinin belirlenmesi amaçlanmıştır. Çalışmada aquaporin saflaştırılması için, afinite temelli bir ayırım kolonu dizayn edilerek, aquaporinin tek basamakta saflaştırılması sağlanmıştır. Bu amaçla, öncelikli olarak nano anti-aquaporin antibadi partikülleri ANADOLUCA (AmiNoAcid (monomer) Decorated and Light Underpining Conjugation Approach) metoduna göre sentezlenmiş ve karakterize edilmiştir. Nano anti-aquaporin antibadi partikül sentezinde, anti-aquaporin antibadi, fotosensitif rutenyum tabanlı amino asit monomeri bis(2-2ʹ-bipiridil)(MATyr)2-rutenyum (II), MATyr-Ru-MATyr, ile ANADOLUCA metoduna göre dekore edilmiş ve mikroemülsiyon polimerizasyonuyla nanopartikül olarak sentezlenmiştir. Ardından, aquaporin için spesifik bir kromatografik ayırım kolonu elde etmek amacıyla, sentezlenen nano anti-aquaporin antibadi partikülleri 2-hidroksietil metakrilat (HEMA) kriyojeline tutturulmuştuır. Ispanak ekstraktından aquaporin proteini, sentezlenen kriyojel kolonun Hızlı Protein Sıvı Kromatografisinde (FPLC) kolon dolgu maddesi olarak kullanılmasıyla tek basamakta saflaştırılmıştır. Saflaştırılan aquaporinin molekül ağırlığı, proteinin saflığı ve ayırım sırasındaki yapısal değişimleri karakterize edilmiştir. Böylece tez kapsamında yapılan çalışma ile spesifik etkileşim içeren, tekrar tekrar kullanılabilir yeni kolon dolgu maddesi dizaynı ile aquaporin tek basamakta yüksek saflıkta saflaştırılmıştır.
Özet (Çeviri)
In this study, it was aimed to purify and determine the efficiency of aquaporin water channel proteins, which play a role in the rapid and active passage of water molecules across biological membranes in many plants and also many other organisms in nature. For the purification of aquaporin, an affinity-based separation column was designed to purify the aquaporin in a single step. For this purpose, first anti-aquaporin antibody nanoparticles were synthesized according to the ANADOLUCA (AmiNoAcid (monomer) Decorated and Light Underpining Conjugation Approach) method and characterized. In nano anti-aquaporin antibody particle synthesis, anti-aquaporin antibody was decorated with photosensitive ruthenium-based amino acid monomer bis(2-2ʹ-bipyridyl)(MATyr)2-ruthenium (II), MATyr-Ru-MATyr, according to ANADOLUCA method and synthesized as nanoparticle by microemulsion polymerization. Then, the synthesized nano anti-aquaporin antibody particles were attached to 2-hydroxyethyl methacrylate (HEMA) cryogel to obtain a specific chromatographic separation column for aquaporin. Aquaporin protein from spinach extract was purified in one step by using the synthesized cryogel column in Fast Protein Liquid Chromatography (FPLC). The molecular weight and the purity of the purified aquaporin, the structural changes during separation were characterized. Thus, in this study, aquaporin was purified in a single step with high purity, with a newly designed reusable column containing specific interaction for purification of aquaporin.
Benzer Tezler
- Ispanaktan lutein ve β-karotenin bulutlanma noktası tekniği ile ekstraksiyonu
Cloud point extraction of lutein and β-carotene from spinach
BAHAR ER
Yüksek Lisans
Türkçe
2021
Gıda Mühendisliğiİnönü ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÖKHAN DURMAZ
- Ispanaktan ekstrakte edilen Zn-klorofil türevlerinin emülsiyon/soğuk jelleşme metodu ile mikroenkapsülasyonu
Microencapsulation of Zn-chlorophyll derivatives extracted from spinach by emulsion/cold gelation method
GÜLAY ÖZKAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2014
Gıda MühendisliğiEge ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. SEDA ERSUS BİLEK
- Ispanaktan elde edilen glutatyon redüktaz enziminin tayini için kare dalga katodik sıyırma voltametrisi ile yöntem geliştirilmesi
Development of a method for the determination of glutathione reductase enzyme from spinach by square wave cathodic stripping voltametry
HANDE AKAR
- Domates ve ıspanaktan doğal renk maddesi ekstraksiyonunda elektroplazmoliz uygulamasının etkilerinin araştırılması
Investigation on effects of electroplasmolysis treatment on extraction yield of natural colorants from tomato and spinach
EDA TOPRAK
Yüksek Lisans
Türkçe
2009
Gıda MühendisliğiCelal Bayar ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DR. HASAN YILDIZ
- Ispanak klorofilinin mikroenkapsülasyonu ve yumuşak şekerlerde renklendirici olarak kullanımı
Microencapsulation of spinach chlorophyll and its use as a colorant in soft candy
GÜLNUR ATÇEKEN
Yüksek Lisans
Türkçe
2023
Gıda MühendisliğiSelçuk ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MEHMET AKBULUT