Protein encapsulation within oppositely charged polyelectrolyte complexes
Karşı yüklü polielektrolit kompleksleri içine protein enkapsüllemesi
- Tez No: 761945
- Danışmanlar: DOÇ. DR. AYŞE BAŞAK KAYITMAZER BÜYÜKOKUTAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyofizik, Biyokimya, Kimya, Biophysics, Biochemistry, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2022
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Boğaziçi Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 88
Özet
Bu çalışmada fizikokimyasal bir enkapsülasyon metodu olarak kullanılan koaservasyon ile enzim immobilizasyonu yapılması hedeflenmiştir. Bu kapsülleme teknolojisini kullanarak, ilaçlar ve enzimler gibi aktif maddeler, yüksek pH, organik çözücüler ve kaotik maddeler gibi istenmeyen çevre koşullarından korunabilirler. Bu araştırmada, sentetik bir homopolimer olan poli (dialildimetilamonyum klorür) (PDADMAC) ve bitki hücre duvarlarında bulunan bir karbonhidrat olan pektin ile kompleks koaservatlarını oluşturmak amaçlandı. Koaservasyon oluşumundaki en büyük kuvvet, PDADMAC üzerinde bulunan pozitif yüklerin ve pektinin negatif yüklerin elektrostatik etkileşimleridir. Kompleks koaservat fazı içinde protein kapsüllemesi hakkında daha fazla bilgi edinmek için katyonik bir polielektrolit olan PDADMAC ve anyonik bir polielektrolit olan pektinden oluşan kompleks koaservatların içerisine tripsin enziminin kapsüllemesi, makromoleküllerin karıştırma sırası değiştirilerek farklı tuz konsantrasyonlarında araştırıldı. Üç farklı karıştırma sırası gerçekleştirilmiştir. Ayrıca pektin-PDADMAC karışımının pH'ı altı farklı tuz konsantrasyonunda bulanıklık titrasyonları yapılmıştır. Koaservat mikro damlacıklarının oluşumu, bu tuz konsantrasyonlarında ışık mikroskobu ile gözlenmiştir. Tripsinin optimum pH'ı olan 7.5'ta pektinin iyonlaşma derecesini bulmak için potansiyometrik titrasyon deneyleri yapılmıştır. İlerleyen deneyler için en uygun eklenme sırası seçildi ve geri kalan tüm deneyler bu seçilen ekleme sırasına göre yapıldı. Daha sonra seçilen bu yöntemle tripsin, polielektrolit konsantrasyonları değiştirilerek enkapsülasyona olan etkisi incelenmiştir. En etkili kapsülleme yöntemi bulunduktan sonra enzim aktivitesi deneylerine yapılmıştır. En son dairesel dikroism ile tripsinin bu enkapsülasyon ile ikincil yapısının değişip değişmediği araştırılmıştır.
Özet (Çeviri)
In this study, it is aimed to perform enzyme immobilization with the coacervation, which is used as a physicochemical encapsulation method. By using this encapsulation technology, active agents like drugs and enzymes can be protected from several non-desirable conditions of the environment such as high pH, organic solvents, and chaotic agents. In this research, one of the objectives is to form complex coacervate droplets with poly (diallyldimethylammonium chloride) (PDADMAC) which is a synthetic homopolymer, and pectin which is a carbohydrate found in the cell walls of plants. The biggest driving force in the formation of coacervation is the electrostatic interactions of the positive charges in PDADMAC with the negative charges in pectin. To learn more about protein encapsulation within complex coacervates, encapsulation of trypsin enzyme within complex coacervates comprised of a cationic polyelectrolyte, PDADMAC, and an anionic polyelectrolyte, pectin, was investigated as a function of mixing order of macromolecules and at different salt concentrations. Three different mixing orders was performed. Additionally, turbidimetric titrations of pectin – PDADMAC mixtures were done at six different salt concentrations. Formation of coacervate microdroplets was observed by light microscopy at these salt concentrations. Potentiometric titration experiments were performed for pectin to find the degree of ionization of pectin at the optimum pH of trypsin, which is 7.5. For further experiments, the most appropriate mixing order is selected, and the remaining experiments are performed with that addition sequence. Then trypsin and polyelectrolyte concentrations were changed and its effect on encapsulation was examined. After determining the most effective encapsulation method, enzyme activity was measured. Finally, it was investigated whether the secondary structure of trypsin changed with encapsulation by circular dichroism experiments.
Benzer Tezler
- Protein yapısındaki makromoleküllerin salımını yapabilen biyobozunur polimer mikrokürelerin geliştirilmesi ve karakterizasyonu
Design and characterization of biodegradable polymer microspheres which can make controlled release of molecules with protein structure
HASAN COŞKUN
- Mikroakışkan sistem ile protein yüklü polimerik nanopartiküllerin üretimi ve karakterizasyonu
Production and characterization of protein loaded polymeric nanoparticles by microfluidic system
AYŞENUR BEZELYA
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
BiyoteknolojiAnkara ÜniversitesiFarmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ BERRİN KÜÇÜKTÜRKMEN
- Therapeutic potential of an immunosuppressive oligodeoxynucleotide encapsulated within liposomes on bleomycin-induced mouse model of lung inflammation and fibrosis
Lipozoma yüklenmiş immünbaskılayıcı bir oligodeoksinükleotidin bleomisin ile farede oluşturulmuş akciğer enflamasyonu ve fibrozu üzerindeki tedavi edici potansiyeli
GİZEM KILIÇ
Yüksek Lisans
İngilizce
2019
Allerji ve İmmünolojiİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İHSAN GÜRSEL
- Fabrication and functionalization of rGO containing polymeric materials
rGO içeren polimerik maddelerin yapımı ve işlevsellestirilmesi
MERVE ASLAN
- Spirulina platensis'ten elde edilen biyoaktif peptitlerin enkapsülasyonu ve antioksidan özelliklerinin belirlenmesi
Encapsulation of bioactive peptides obtained from spirulina platensis and determination of their antioxidant properties
EMİNE SİMGE KARLIĞA
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
Biyoteknolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiGıda Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ESRA ÇAPANOĞLU GÜVEN
DR. ÖĞR. ÜYESİ GAMZE TOYDEMİR ŞEN