Damar endotel hücrelerinin büyümesi, çoğalması ve canlılığını koruyabilmesi için gerekli faktörlerin belirlenmesi ve bu faktörlerin fonksiyonlarının damar oluşumu üzerinden incelenmesi
Determining of the factors necessary for the growth, proliferation and survival of vascular endothelial cells and the functions of these factors
- Tez No: 810798
- Danışmanlar: DOÇ. DR. FURKAN AYAZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2023
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Mersin Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Biyoteknoloji Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 51
Özet
Anjiyogenez, mevcut damarlardan kılcal ve damarsal ağların tomurcuklanması yolu ile yeni damarlar oluşturması sürecidir. Oluşan damarsal ağların gelişimi, damarsal yapı etrafındaki hücrelerin sağlıklı olarak büyümesi için gerekli olan temel faktörlerin varlığı ile belirlenmektedir. Anjiogenez farklı faktörlerin sürece dahil olması ve bu faktörlerin uygun konsantrasyonlarının sağlanabilmesi gerekliliği nedeni ile oldukça karmaşık bir mekanizmadır. Anjiogenezin temel bileşenleri farklı özellikleri tetikleyen büyüme faktörleri, sitokinler ve sitokin reseptörleri olarak tanımlanmaktadır. Endotel hücreler ile birlikte kılcal damar duvarını oluşturan perisitler büyük öneme sahiptir. Anjiyogenez sürecinde kullanılan faktörleri içeren karışım doğru oranda olmalıdır ve bunu da üretebilen en iyi aday makrofaj hücreleridir. Yapılan çalışmada -80 ℃'de muhafaza edilen memeli makrofaj hücrelerinin (J774.2) sıcak su banyosu yardımı ile çözünmesi sağlanmıştır. Memeli makrofaj hücrelerine (J774-2) Roswell Park Memorial Institute Media (RPMI)+ %10 FBS %1+ %1 antibiotik [100 μg/MI pecillin and 100 μg/Ml streptomycin] içeren besi ortamı farklı oranlarda ilave edilerek 100 cm2'lik hücre kültürü plağında %90 konfluense ulaşana kadar (kültür kabının %90''ık alanını kaplayıncaya kadar) bekletilmiştir. Memeli makrofaj hücrelerinin in vitro ortamda salgıladıkları faktörleri ve miktarlarını belirleyebilmek amacı ile proteomik analiz yapılarak protein türleri ve miktarları incelenmiştir. Proteomik analiz sonucuna göre makrofaj hücrelerine ait taksonomi (J774-2) mus muskulus olarak doğrulanmıştır. Ayrıca HUVEC hücrelerine yapılan MTT analizi sırasında 24 saat, 48 saat ve 72 saat aralıklar ile besi yeri ilavesi (20 μl, 40 μl, 60 μl ,80 μl ve 100 μl ) yapılmıştır. Çalışmada deterjan reaktifi olarak (SDS) kullanılarak 570 nm' de absorbansta % hücre büyüme oranları değerlendirilmiştir. Damar oluşumunu arttıran faktörlerin etkilerinin takibi çalışma kapsamında florasan mikroskobu ile görüntüleri alınarak gerçekleştirilmiştir. HUVEC hücrelerinin damar oluşumuna etkisi liyofilize ve normal koşullar olarak iki aşamada yürütülerek raf ömrünün 6 aydan 18 aya kadar uzatılmasına katkısı araştırılmaktadır.
Özet (Çeviri)
Angiogenesis is the process of forming new vessels through budding of capillary and vascular networks from existing vessels. The development of the formed vascular networks is determined by the presence of the basic factors necessary for the healthy growth of the cells around the vascular structure. Angiogenesis is a very complex mechanism due to the involvement of different factors in the process and the need to provide appropriate concentrations of these factors. The basic components of angiogenesis are defined as growth factors, cytokines and cytokine receptors that trigger different properties. Pericytes, which form the capillary wall together with endothelial cells, are of great importance. The mixture containing the factors used in the angiogenesis process should be in the right ratio and the best candidate that can produce this is macrophage cells. In the study, mammalian macrophage cells (J774.2) stored at -80 ̊C were dissolved with the help of a hot water bath. A medium containing Roswell Park Memorial Institute Media (RPMI)+ 10% FBS 1%+ 1% antibiotic [100 μg/MI pecillin and 100 μg/Ml streptomycin] was added to mammalian macrophage cells (J774-2) at different rates, and 100 cm2 It was kept in the cell culture plate until it reached 90% confluency (covering 90% of the culture dish). Protein types and amounts were investigated by proteomic analysis in order to determine the factors secreted by mammalian macrophage cells and their amounts in vitro. According to the results of proteomic analysis, the taxonomy of macrophage cells was confirmed as (J774-2) mus musculus. In addition, medium addition (20 μl, 40 μl, 60 μl, 80 μl and 100 μl) was made at 24-hour, 48-hour and 72-hour intervals during MTT analysis on HUVEC cells. In the study, % cell growth rates were evaluated at absorbance at 570 nm using detergent reagent (SDS). Follow-up of the effects of factors that increase the formation of vessels was carried out by taking images with a fluorescent microscope within the scope of the study. The effect of HUVEC cells on vessel formation is carried out in two stages as lyophilized and normal conditions, and its contribution to extending the shelf life from 6 months to 18 months is investigated.
Benzer Tezler
- Differentiation of vessel wall cells from umbilical cord blood mesenchymal cells for vascular tissue engineering
Damar doku mühendisliği amacıyla kordon kanı mezenkimal hücrelerinden damar duvarı endotel hücre farklılaşması
PINAR HÜNER OMAY
Doktora
İngilizce
2016
Biyomühendislikİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HAKAN BERMEK
- Lactobacillus rhamnosus G28.2'den elde edilen ekzopolisakkaritin anti-kanser etkilerinin in vitro yöntemlerle araştırılması
Investigation of anti-cancer effects of exopolysaccharide obtained from Lactobacillus rhamnosus G28.2 in vitro methods
GİZEM TANLAK SARI
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyoteknolojiEskişehir Teknik Üniversitesiİleri Teknolojiler Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AYŞE TANSU KOPARAL
- Development and structural determination of antiangiogenic recombinant antibody structures for cancer treatment
Kanser tedavisine yönelik antianjiogenik rekombinant antikor yapılarının geliştirilmesi ve yapısal tayini
MELİS DENİZCİ ÖNCÜ
Doktora
İngilizce
2022
Biyomühendislikİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GİZEM DİNLER DOĞANAY
DR. AYLİN ÖZDEMİR BAHADIR
- Identification of potential atherogenic miRNA markers in exosomes formed in an in vitro vascular smooth muscle cell and endothelial cell culture models
In vitro vasküler düz kas hücresi ve endotel hücre kültür modellerinde oluşturulan eksozomlarda potansiyel aterojenik miRNA belirteçlerinin tanımlanması
FATIMA HACER KURTOĞLU BABAYEV
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
Moleküler TıpKoç ÜniversitesiHücresel ve Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KEMAL BAYSAL
DR. ZELAL ADIGÜZEL
- Investigation on the effects of mechanical forces on endothelial and monocytic cell behaviour by using microfluidic systems
Mikroakışkan sistemler kullanılarak mekanik kuvvetlerin endotel ve monosit hücre davranışı üzerine etkilerinin incelenmesi
SEMRA ZUHAL BİROL
Doktora
İngilizce
2018
Bilim ve Teknolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiNanobilim ve Nanomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. LEVENT TRABZON