Mide kanserinde HSP inhibitörlerinin etkinliğinin incelenmesi
Investigation of HSP inhibitors' efficacy in gastric cancer
- Tez No: 881859
- Danışmanlar: PROF. DR. YUSUF TUTAR
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Moleküler Tıp, Molecular Medicine
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2024
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Sağlık Bilimleri Üniversitesi
- Enstitü: Hamidiye Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Tıp Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Moleküler Tıp Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Amaç: Mide kanseri dünya çapında en yaygın görülen dördüncü kanser türü olmasına rağmen kansere bağlı ölümlerde ikinci sırada yer almaktadır. Erken evrede genellikle belirtisiz olması, özgün biyobelirtecinin bulunmaması ve rutin tarama protokollerinin olmaması nedeniyle maalesef hastaların çoğu ileri evrede tanı almaktadır ve sağkalım oranları düşmektedir. Bu çalışmada amacımız antitümoral etkinliği bilinen moleküler şaperon üyesi olan kinazolinon türevi bir HSP-90 (ısı şok proteini-90) inhibitörü olan MH4-CH3'ün, deubikuitinaz enzim inhibitörü olan IITZ-01'in ve kemoteröpatik 5-Fluorourasil'in mide kanseri hücre hattı HGC27 üzerindeki moleküler düzeyde etkilerini araştırmaktır. Gereç ve Yöntem: Çalışmamızda HGC27 hücre hattına MH4-CH3, IITZ-01 ve 5-Fluorourasil uygulanarak 48. saatte MTT yöntemi ile canlılık oranları ve IC50 değerleri belirlenmiştir. L929 sağlıklı fibroblast hücre hattında moleküllerin canlılık oranları ve IC50 değerleri aynı yöntemle belirlenerek seçicilik indeksleri hesaplanmıştır. RNA izolasyonu sonrası cDNA (komplementer deoksiribonükleik asit) sentezlenmiştir ve RT-qPCR (gerçek zamanlı kantitatif polimeraz zincir reaksiyonu) ile kanser yolak analizleri yapılmıştır. İlaçların apoptoz üzerine etkilerinin değerlendirilmesi için de Anneksin V analizlerinin yapıldığı akım sitometrisi cihazı kullanılmıştır. Bulgular: HGC27 hücre hattında MTT yöntemi ile 48. saatte IC50 değerleri MH4-CH3 için 6,6 µM, IITZ-01 için 1,25 µM ve 5-FU için 2,88 µM olarak saptanmıştır. Seçicilik indeksleri MH4-CH3 için 0,97, IITZ-01 için 5,66 ve 5-FU için 2,22 olarak hesaplanmıştır. RT-qPCR ile MH4-CH3 molekülünün apoptoz, hücresel yaşlanma, TP53, PI3K-AKT-mTOR yolaklarını etkilediği saptanmıştır. Akım sitometrisi ile MH4-CH3 için %2,44 erken ve %14,13 geç apoptotik, toplam %16,57 ile istatistiksel olarak anlamlı düzeyde (p<0,001) apoptozu uyardığı gösterilmiştir. Sonuç: MH4-CH3 molekülünün HGC27 mide kanseri hücre hattında gerek RT-qPCR yöntemiyle kanser genleri üzerinde yaptıkları değişiklikler üzerinden gerekse akım sitometrisinde istatistiksel olarak anlamlı bir şekilde apoptozu uyarması üzerinden etkin bir seçenek olabileceği düşünülmüştür. Ancak seçicilik indeksinin düşük olması nedeniyle kombinasyon tedavisi olarak kullanılabilmesi için sinerji çalışmalarına ihtiyaç vardır.
Özet (Çeviri)
Aim: Gastric cancer (GC) is the fourth most common cancer type worldwide and it ranks second in cancer-related deaths. Since GC is usually asymptomatic in the early stage and lacks specific biomarkers and routine screening protocols, most of the patients are diagnosed at an advanced stage leading to poor survival rates. In this study, we aimed to evaluate the effects of MH4-CH3 molecule which is a quinazolinone-derived HSP-90 (heat shock protein-90) inhibitor, IITZ-01 which is a deubiquitinase enzyme inhibitor, and the chemotherapeutic 5-Fluorouracil, on the gastric cancer cell line HGC27. Materials and Methods: In this study, MH4-CH3, IITZ-01 and 5-Fluorouracil were applied to the HGC27 cell line, and viability rates and IC50 values were determined by the MTT method after 48 hours of administration. In the L929 healthy fibroblast cell line, the viability rates and IC50 values of the molecules were determined by the same method and selectivity indices were calculated. After RNA isolation, cDNA (complementary deoxyribonucleic acid) was synthesized and cancer pathway analyzes were performed with RT-qPCR (real-time quantitative polymerase chain reaction). To evaluate the effects of drugs on apoptosis, a flow cytometry device was used with Annexin V method. Results: IC50 values 48th hour of admiinistration were found as 6.6 µM, 1.25 µM and 2.88 µM for MH4-CH3, IITZ-01 and 5-FU, respectively. Selectivity indices were calculated as 0.97, 5.66 and 2.22 for MH4-CH3, IITZ-01 and 5-FU, respectively. It was determined by RT-qPCR that MH4-CH3 molecule affects apoptosis, cellular aging, TP53, PI3K-AKT-mTOR pathways. By flow cytometry, it was shown that MH4-CH3 stimulated apoptosis at a statistically significant level (p<0.001), with 2.44% early and 14.13% late apoptotisis rates, a total of 16.57%. Conclusion: Considering the changes that MH4-CH3 molecule makes on cancer genes discovered by RT-qPCR and causing stimulation of apoptosis in a statistically significant way in flow cytometry, it was thought that the MH4-CH3 molecule could be an effective treatment option. However, due to its low selectivity index, synergy studies are needed before it can be used as a combination therapy agent.
Benzer Tezler
- Bıldırcın (Coturnix coturnix)sindirim kanalında Proventrikulus ve Gizzard) ısı şok proteini 70 (HSP70)'in immunohistokimyasal lokalizasyonu
Immunohistocchemical localization of Bıldırcın (Coturnix coturnix) heat shock protein (HSp70) in the digestive channel [Proventriculus and Gizzard]
DENİZ OKUDAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
BiyolojiSüleyman Demirel ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ KENAN ÇINAR
- Bromtimol mavisi, bromkresol moru ve klorfenol kırmızısı indikatörleri katılmış özel besiyerlerinin sütlerde antibiyotik belirtilmesine uygunluğu üzerine araştırmalar
Başlık çevirisi yok
ESENGÜL TUNCER
Yüksek Lisans
Türkçe
1985
Gıda MühendisliğiEge ÜniversitesiSüt Teknolojisi Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HASAN YAYGIN
- Bir pamuk iplikhanesinde fiili çalışma metodlarının incelenmesi ve mevcut işlemlerin standart sürelerinin saptanması
Başlık çevirisi yok
MÜRŞİDE KESEROĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
1985
İşletmeEge ÜniversitesiTekstil Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MUSTAFA NAZMİ ERCAN
- Kurbağa gastrik mukozasında K-H ATPaz enziminin kinetik özellikleri ve oluşturulan ülser modelinde enzim aktivitesi
Başlık çevirisi yok
SEYHAN TÜKEL
- Nar konsantresinin dondurularak ve kimyasal yöntemlerle saklanması sırasında meydana gelen değişmeler üzerine bir araştırma
Başlık çevirisi yok
İLHAN BODUR
Yüksek Lisans
Türkçe
1985
Gıda MühendisliğiEge ÜniversitesiTarım Ürünleri Teknolojisi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. YURDAGEL ÜNAL