Mikroakışkan sistem ile eksozom izolasyonu ve kanser hücrelerini hedefleyen ilaç taşıyıcı sistem geliştirilmesi
Exosome isolation with microfluidic system and development of drug carrier system targeting cancer cells
- Tez No: 889855
- Danışmanlar: PROF. DR. ÖZGE ÇEVİK
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biyoteknoloji, Biochemistry, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Eksozom, Jurkat T hücresi, Meme Kanseri, Mikroakışkan sistem, Paklitaksel, Exosome, Jurkat T cell, Breast Cancer, Microfluidic system, Paclitaxel
- Yıl: 2024
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Aydın Adnan Menderes Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 121
Özet
Amaç: Meme kanserinde, üçlü negatif meme kanseri agresif ve klinik kötü prognoza sahip alt tipidir. Eksozomlar, hücrelerin haberleşmek amacıyla doğal olarak üretildikleri küçük boyutlu veziküller olup ilaç taşıyıcı sistem olarakda dikkat çekmektedir. Bu çalışmada Jurkat T-hücrelerinden salgılanan eksozomların mikroakışkan (MF) sistemle izole edilebilirliği ve eksozomlara paklitaksel (PTX) yüklemesinin meme kanseri üzerindeki etkilerinin araştırılması amaçlanmıştır. Gereç ve Yöntem: Jurkat T-hücrelerinden eksozomlar salımı uyarılarak MF ve ultrasantrifüj ile izolasyonları yapıldı. Eksozomların boyut analizleri ve karakterizasyonları (CD63 ve CD81) yapıldıktan sonra elektroporasyonla PTX yüklendi. MDA-MB-231 hücreleri üzerinde Exo-PTX'in hücre canlılığı MTT yöntemi, apoptotik etkisi Annexin V-FITC-PI ve JC-1 boyaması ile flowsitometride analiz edildi. Exo-PTX'in migrasyon üzerindeki etkisi Boyden Chamber yöntemi ile ve kemokinler üzerindeki rolü CXCR4/CXCL12 gen ekspresyon analizi ile belirlendi. Bulgular: Jurkat T hücrelerinden izole edilen eksozomların boyutlarının 100 nm altında olduğu ve CD63 ve CD81 belirteçlerini taşıdığı belirlendi. Exo-PTX'in (10μg/mL) ve PTX'in (15 nM) ve üzerindeki konsantrasyonlarda hücre canlılıklarını anlamlı bir şekilde azalttığı, erken ve geç apoptozda ise anlamlı bir artış olduğu, migrasyon yeteneklerinin azaltığı CXCR4/ CXCL12'nin gen ekspresyon düzeylerini baskıladığı belirlendi. Sonuç: T lenfositleri gibi süspanse olan hücrelerin MF sistemlerde sabit boyutta eksozom izolasyonu büyük avantaj sağlayabilir. Jurkat eksozomları kemoterapik ajanların etkinliklerini korumaları ve hücre içerisine girişini sağlamak için metastazik kanserlerin tedavisinde kullanılabilir.
Özet (Çeviri)
Objective: In breast cancer, triple negative breast cancer is an aggressive subtype with a poor clinical prognosis. Exosomes are small-sized vesicles produced naturally by cells for communication purposes, and they also attract attention as a drug carrier system. This study aimed to investigate the isolation of exosomes secreted from Jurkat T cells with a microfluidic (MF) system and the effects of paclitaxel (PTX) loading on exosomes on breast cancer. Materials and methods: Exosomes were isolated from Jurkat T-cells by stimulating exosome relase using MF and ultracentrifugation. After size analysis and characterization (CD63 and CD81) of exosomes were performed, PTX was loaded by electroporation. Cell viability of Exo-PTX on MDA-MB-231 cells was analyzed by MTT method, and its apoptotic effect was analyzed by flow cytometry with Annexin V-FITC-PI and JC-1 staining. The effect of Exo-PTX on migration ability was determined by the Boyden Chamber method and its role on chemokines was determined by CXCR4/CXCL12 gene expression analysis. Results: Exosomes isolated from Jurkat T cells were determined to be below 100 nm in size and carry CD63 and CD81 markers. Exo-PTX (10μg/mL) and PTX (15 nM) and above concentrations significantly reduced cell viability, there was a significant increase in early and late apoptosis, decreased migration abilities and suppressed the gene expression levels of CXCR4/CXCL12 determined. Conclusion: Isolation of exosomes of fixed size in MF systems from suspended cells such as T lymphocytes can offers an advantage. Jurkat exosomes can be used in the treatment of metastatic cancers to maintain the effectiveness of chemotherapeutic agents and ensure their entry into the cell.
Benzer Tezler
- Ülseratif kolit tedavisine yönelik mesalazin ve eksozomun mikroakışkan tabanlı sistem ile enkapsülasyonu
Encapsulation of mesalazine and exosome with microfluidic-based system for the treatment of ulcerative colitis
CEYDA KÖROĞLU ÖZMEN
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
BiyoteknolojiAnadolu ÜniversitesiFarmasötik Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜLAY BÜYÜKKÖROĞLU
- Fabrication of drug-loaded janus nanoparticles with microfluidic system
Mikroakışkan sistem ile ilaç yüklü janus nanopartiküllerin üretimi
TUĞÇE YEŞİLYURT
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
BiyomühendislikYıldız Teknik ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. CEM BÜLENT ÜSTÜNDAĞ
- Mikroakışkan sistem ile protein yüklü polimerik nanopartiküllerin üretimi ve karakterizasyonu
Production and characterization of protein loaded polymeric nanoparticles by microfluidic system
AYŞENUR BEZELYA
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
BiyoteknolojiAnkara ÜniversitesiFarmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ BERRİN KÜÇÜKTÜRKMEN
- Mikrofluidik sistemlerde hematopoetik kök hücre izolasyonu ve karakterizasyonu
Separation and characterization of hematopoietic stem cells by microfluidic systems
NİLGÜN OKŞAK
Doktora
Türkçe
2023
Fizyolojiİstanbul ÜniversitesiFizyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. DÜRDANE SERAP KURUCA
- Doku mühendisliği uygulamaları için mikroakışkan sistemi kullanarak sodyum aljinat film üretimi
Sodium alginate film production using microfluidic system for tissue engineering applications
BETÜL MUTLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
BiyomühendislikBursa Teknik ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ İSRAFİL KÜÇÜK