Geri Dön

Primer hücre kültüründe, TGF-β ile oluşturulan deneysel akciğer fibrozıs modeli üzerinde yeni potansiyel antifibrotik moleküllerin etkisinin araştırılması

Investigation of the effect of new potential antifibrotic molecules on experimental lung fibrosis model induced with TGF-β in primary cell culture

PDF İndir

  1. Tez No: 912130
  2. Yazar: HÜLYA GÜVEN
  3. Danışmanlar: DR. ÖĞR. ÜYESİ SİBEL DOĞRU, DOÇ. DR. SERDAR ÖZTUZCU
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Eczacılık ve Farmakoloji, Göğüs Hastalıkları, Tıbbi Biyoloji, Pharmacy and Pharmacology, Chest Diseases, Medical Biology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2024
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Gaziantep Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Solunum Biyolojisi Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Temel Solunum Biyolojisi Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 74

Özet

İdiyopatik pulmoner fibrozis (İPF), patogenezi bilinmeyen, kötü prognozlu, ilerleyici, hayatı tehdit eden ve genellikle tanıdan itibaren medyan sağkalımı iki-beş yıl olan bir interstisyel akciğer hastalığıdır. İPF nadir görülen bir hastalık olmakla birlikte günümüzde tedavi seçenekleri oldukça kısıtlıdır. Bu amaçla primer fibroblast hücrelerini TGF- β ile indükleyerek oluşturduğumuz deneysel fibrozis modelinde yeni potansiyel antifibrotik kimyasallarının fibrozis üzerine etkisini araştırmaktır. Transforme edici büyüme faktörü-beta (TGF-β, 10ng/ml) ile sağlıklı fibroblast hücrelerinin uyarımını takip eden 72. saatinde hücrelerden RNA izolasyonu yapıldı. Fibrozis ile ilişkili olabilecek α-SMA geninin ekspresyonu qRT-PCR ile belirlendi. PCR sonucuna göre fibrozis modelinde kontrol grubuna kıyasla 4,5 kat α-SMA eksprese edildiği gözlemlendi. TGF-β 10ng/ml ile uyarılan sağlıklı fibroblast hücrelerinin 72. saatlerinde, kontrol gruplarında α-SMA ve col antikorlarının immünositokimyasal boyama sonucu reaksiyon izlenmezken fibrozis oluşturulan hücrelerde her iki belirtecin de güçlü bir şekilde boyandığı sonucuna varıldı. Çalışmamızda TGF- β varlığında ve yokluğunda, iki molekül (3, 3a) ve bunun dışında mevcut tedavide kullanılan antifibrotik ajan olarak potansiyel etkinliği bilinen Nintedanib ve Pirfenidon ise pozitif kontrol olarak kullanıldı. 3, 3a'nın MTT (3-(4,5- Dimethylthiazol-2- yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide) yöntemi ile fibrozis üzerindeki IC50 (inhibitör konsantrasyonu) değerleri araştırılmıştır. Sonuçlarımız; 3 ve 3a kimyasallarının TGF-β varlığında ve yokluğunda istatiksel olarak anlamlı bir hücre sitotoksisitesi oluşturduğu tespit ettik.

Özet (Çeviri)

Idiopathic Pulmonary Fibrosis (IPF) is a progressive, life-threatening interstitial lung disease of unknown pathogenesis, with a poor prognosis, and a median survival from diagnosis of usually two to five years. Although IPF is a rare disease, treatment options are currently very limited. For this purpose, we investigated the effects of new potential antifibrotic chemicals on fibrosis in an experimental fibrosis model that we created by inducing primary fibroblast cells with TGF-β. RNA was isolated from the cells at the 72th hour of following stimulation of healthy fibroblast cells with Transforming Growth Factor-Beta (TGF-β, 10 ng/ml). Expression of the α-SMA gene, which may be associated with fibrosis, was determined by qRT-PCR. According to PCR results, it was observed that α-SMA was expressed 4.5 times more in the fibrosis model compared to the control group. It was concluded that while no reaction was observed as a result of immunocytochemical staining of α-SMA and col antibodies in control groups at th 72th hour of healthy fibroblast cells stimulated with TGF-β 10ng/ml, both markers were strongly stained in fibrosis-induced cells. In our study, two molecules (3, 3a) and Nintedanib and Pirfenidone, which are known to have potential activity as antifibrotic agents used in the current treatment, were used as positive controls in the presence and absence of TGF-β. Cells cultured in 96-well plates were incubated with compounds and positive drugs at different concentrations (100 μM, 50 μM, 25 μM, 12.5 μM) dissolved with dimethyl sulfoxide for 24 hours at 37ºC in a 5% CO2 environment. The IC50 (inhibitory concentration) values of 3, 3a on fibrosis were investigated by the MTT (3-(4,5- Dimethylthiazol-2- yl)-2,5- diphenyltetrazolium bromide) method. In our results, we found that chemicals 3 and 3a caused statistically significant cell cytotoxicity in the presence and absence of TGF-β.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    838032

    Pterostı̇lbenı̇n antı̇-ı̇nflamatuar, antı̇oksı̇dan ve yara ı̇yı̇leşmesı̇ üzerı̇ndekı̇ etkı̇lerı̇nı̇n ı̇nsan dı̇şetı̇ fı̇broblastlarında ı̇n vı̇tro değerlendı̇rı̇lmesı̇

    In vitro evaluation of the anti-inflammatory, antioxidant and wound healing effects of pterostilbene in human gingival fibroblasts

    MUKADDES YEREBAKAN

    Diş Hekimliği Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Diş HekimliğiGazi Üniversitesi

    Periodontoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. GÜLAY TÜTER

  2. Tez No

    851100

    The development of the 3D micropatterned ECM (extracellular matrix) models of glioma-astrocyte co-culture: Investigating glioma migration and astrocyte reactivity

    Glioma-astrosit ko-kültürünün 3B mikrodesenli ECM (ekstraselülar matriks) modellerinin geliştirilmesi: Glioma migrasyonu ve astrosit reaktivitesinin incelenmesi

    NİLUFAR ISMAYİLZADA

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    BiyomühendislikKoç Üniversitesi

    Biyomedikal Bilimler ve Mühendislik Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ ŞADİYE EMEL SOKULLU

  3. Tez No

    878597

    Glioma hücrelerinde SIRT1 ve HSF1 etkileşiminin incelenmesi

    Investigation of SIRT1 and HSF1 interactions in Glioma cells

    İREM ÖĞÜTCÜ

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Biyoteknolojiİstanbul Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. EVREN ÖNAY UÇAR

  4. Tez No

    493298

    Primer astrosit kültüründe alfa sinüklein aşırı ekspresyonun nörotrofik faktörler ve reseptörleri üzerine etkisi

    The effects of alpha synuclein overexpression on neurotrophic factors and their receptors in primary astrocyte culture

    BÜŞRA ŞENGÜL

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2017

    Nörolojiİstanbul Üniversitesi

    Tıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. DUYGU GEZEN AK

  5. Tez No

    124292

    İnsan glioblastoma multiforme primer hücre kültüründe ve sıçan C6 gliom modelinde, tibolon ve medroksi progesteron asetat (MPA) tedavisi

    Tibolon and medroxy pregesterone acetate treatment on the primary human glioblastoma cell culture and on the rat C 6 malignant glioma model

    SERDAR BAKİ ALBAYRAK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2003

    Nöroşirürjiİstanbul Üniversitesi

    Nöroşirürji Ana Bilim Dalı

    DOÇ.DR. MURAT İMER

Geri Dön