Kan plazmasından eksozom izolasyon yöntemlerinin karşılaştırmalı analizi
A Comparative analysis of exosome isolation methods from blood plasma
- Tez No: 920065
- Danışmanlar: DOÇ. DR. ŞENAY VURAL KORKUT, PROF. DR. GÜLŞAH ÇEÇENER
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Tıbbi Biyoloji, Biyoloji, Biyokimya, Medical Biology, Biology, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Eksozom, eksozom izolasyon yöntemleri, boyut dışlama kromatografisi, ultrasantrifüj, biyomoleküler karakterizasyon, Exosomes, exosome isolation methods, size exclusion chromatography, ultracentrifugation, biomolecular characterization
- Yıl: 2024
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Yıldız Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Eksozomlar, hücreler arası iletişimde önemli rol oynayan ve birçok biyolojik süreçte yer alan ekstraselüler veziküllerdir. Son yıllarda, eksozomların biyobelirteç olarak kullanımı ve terapötik potansiyelleri üzerine yapılan çalışmalar büyük ilgi görmüştür. Ancak, eksozom izolasyonu için kullanılan yöntemlerin karşılaştırılması ve bu yöntemlerin etkinliğinin değerlendirilmesi üzerine literatürde sınırlı bilgi bulunmaktadır. Bu tez çalışmasında, eksozom izolasyonunda kullanılan çeşitli yöntemlerin verimlilik, saflık ve biyolojik işlev açısından karşılaştırılması amaçlanmıştır. Araştırma kapsamında, sağlıklı bireylerden alınan kan plazması örnekleri kullanılarak farklı son hızlarda ultrasantrifüj (UC) ve boyut dışlama kromatografisi (SEC) izolasyon teknikleri uygulanmıştır. İzole edilen eksozomlar, nanoparçacık izleme analizi (NTA), transmisyon elektron mikroskobu (TEM) ve Western blot yöntemleriyle karakterize edilmiştir. Ayrıca, izolasyon yöntemlerinin eksozomların biyomoleküler özellikleri üzerindeki etkisi incelenmiştir ve sonuçlar istatistiksel olarak değerlendirilmiştir. Elde edilen sonuçlar, boyut dışlama kromatografisinin istatistiksel olarak anlamlı ölçüde yüksek saflık ve verim sağladığını ortaya çıkarmıştır (*p<0,05). Bu bulgular, eksozom izolasyonunun standardizasyonu ve uygulama alanlarına uygun yöntemin seçimi konusunda önemli bilgiler sunmaktadır. Bu çalışma, eksozom biyolojisi ve uygulama alanlarına yönelik temel bir katkı sağlamayı hedeflemektedir. Mevcut tez, eksozom izolasyonunda ultrasantrifüjün farklı hızlarıyla kromatografik izolasyon yöntemini kıyaslayan ilk çalışmadır. Mevcut tez çalışmasının sonuçları, izolasyon protokollerinin optimizasyonu ile daha güvenilir ve tekrarlanabilir sonuçların elde edilmesine olanak tanıyarak literatüre katkı sağlamaktadır.
Özet (Çeviri)
Exosomes are extracellular vesicles that play an important role in intercellular communication and are involved in many biological processes. In recent years, studies on the use of exosomes as biomarkers and their therapeutic potential have attracted great interest. However, there is limited information in the literature on the comparison of the methods used for exosome isolation and evaluation of the efficiency of these methods. In this thesis, it was aimed to compare various methods used in exosome isolation in terms of efficiency, purity and biological function. Within the scope of the study, ultracentrifugation and size exclusion chromatography isolation techniques were applied at different final speeds using blood plasma samples taken from healthy individuals. The isolated exosomes were characterised using nanoparticle tracking analysis (NTA), transmission electron microscopy (TEM) and Western blot methods. In addition, the effect of isolation methods on the biomolecular properties of exosomes was analysed and the results were statistically evaluated. The results revealed that column chromatography provided statistically significant high purity and yield (*p<0.05). These findings offer crucial insights for the standardisation of exosome isolation and the selection of the most suitable method for various applications. This study aims to make a fundamental contribution to exosome biology and its applications. The present thesis is the first study comparing the chromatographic isolation method with different speeds of ultracentrifugation for exosome isolation. The results of the present thesis allow for more reliable and reproducible results by optimising the isolation protocols.
Benzer Tezler
- Therapeutic and diagnostic applications of extracellular vesicles
Hücre dışı keseciklerin terapötik ve diagnostik uygulamaları
TAMER KAHRAMAN
Doktora
İngilizce
2016
Tıbbi Biyolojiİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İHSAN GÜRSEL
DOÇ. DR. MAYDA GÜRSEL
- Atherosklerotik kalp hastalıklarında risk faktörleri
Risk factors in the coronary artery disease
MURAT SUHER
- Testosteron dihidrotestosteron ve östrojenin benign prostat hiperplazisindeki etyolojik rolleri
The roles of testosterone, dihydrotestosterone and estradiole on the etiology of benign prostatic hyperplasia
HALUK TOKUÇOĞLU
- Çocuklarda akut stres hiperglisemisinde hormonal değişikliklerin ve kısa süreli prognozun incelenmesi
Başlık çevirisi yok
AYGÜN DİNDAR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1987
Çocuk Sağlığı ve Hastalıklarıİstanbul ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Hemşireliği Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. HÜLYA GÜNÖZ
- Pulmoner hipertansiyon etyopatogenezinde prostasiklin ve lökotrien C4'ün rolü
Possible role of leukotrien C4 and prostacyclin in the development of pulmonary hypertension
ÜLKÜ AYBERK
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
1987
Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıGazi ÜniversitesiÇocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı