Polifosfat kinaz geni silinmiş mutant Streptomyces coelicolor suşunda oksidatif stres, polifosfat ve demir metabolizmaları arasındaki moleküler ilişkilerin araştırılması
Investigation of molecular relationships between oxidative stress, polyphosphate and iron metabolism in a mutant Streptomyces coelicolor strain with deleted polyphosphate kinase gene
- Tez No: 934926
- Danışmanlar: PROF. DR. SEDEF TUNCA GEDİK
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoteknoloji, Genetik, Biotechnology, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2025
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Gebze Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Lisansüstü Eğitim Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 90
Özet
Polifosfat (poliP) tüm organizmalarda bulunan önemli bir enerji ve fosfat depolama polimeridir. Streptomyces'te poliP kinaz (PPK) geninin silinmesi, antibiyotik aşırı üreten bir fenotiple sonuçlanmıştır. Bununla birlikte, yüksek antibiyotik üreticisi Streptomyces ∆ppk suşlarının endüstriyel kullanımı, oksidatif strese karşı artan duyarlılıkları nedeniyle mümkün olamamaktadır. Demir, çeşitli hücresel süreçler için gerekli bir elementtir, ancak aşırı demir, özellikle Fenton reaksiyonu yoluyla oksidatif stres oluşturur. İlginç bir şekilde, poliP'nin demire bağlanarak biyolojik kullanımını dolayısıyla oksidatif stresi azaltabildiği bilinmektedir. Bu çalışmanın amacı Streptomyces coelicolor 'da poliP metabolizması, demir homeostazı ve oksidatif stres arasındaki ilişkileri aydınlatmaktır. Bunun için, demir içeren ve demir içermeyen ortamlarda büyütülen yabani tip (WT) ve ∆ppk suşlarının üç biyolojik tekrarlı olacak şekilde karşılaştırmalı proteomik analizleri yapılmıştır. Sonuçlar, S. coelicolor'da ppk geninin silinmesinin demir yokluğunda bile toplam proteomu önemli ölçüde değiştirdiğini ve PPK'nın hücresel metabolizmada ne kadar önemli olduğunu göstermiştir. Özellikle enerji metabolizması ve protein katlanmasında rol oynayan proteinler ∆ppk mutantında WT'ye göre daha bol miktarda bulunmuştur. Demir varlığında ise fosfat metabolizması, oksidatif stres yanıtı ve translasyonda yer alan proteinlerin bolluğunun ∆ppk mutant suşunda WT'ye göre daha yüksek olduğu tespit edilmiştir. Proteom analizi dışında, çalışma kapsamında yüksek antibiyotik üreticisi ∆ppk suşunun oksidatif stres hassasiyetini gidermek için katalaz ve alkil hidroperoksit reduktaz genlerinin yüksek düzeyde ifade edilmesine yönelik çalışmalar da yürütülmüştür. Bildiğimiz kadarıyla, bu çalışma Streptomyces'te demir homeostazı, oksidatif stres ve polifosfat arasındaki ilişkiyi aydınlatan ilk çalışmadır.
Özet (Çeviri)
Polyphosphate (polyP) is an important energy and phosphate storage polymer present in all organisms. In Streptomyces, the deletion of the polyP kinase (PPK) gene resulted in an antibiotic-overproducing phenotype. However, the industrial use of highly antibiotic producing Streptomyces ∆ppk strain is not feasible due to their increased susceptibility to oxidative stress. Iron is an essential element for various cellular processes, yet excess iron generates oxidative stress, particularly via the Fenton reaction. Interestingly, polyP can sequester iron, reducing its bioavailability and thus oxidative stress. The aim of this study was to elucidate the relationships between polyP metabolism, iron homeostasis and oxidative stress in Streptomyces coelicolor. To achieve this, comparative proteomic analyses were conducted on three biological replicates of wild-type (WT) and ∆ppk strains grown in iron-containing and iron-free media. The results indicated that even in the absence of iron, the deletion of ppk gene of S. coelicolor significantly altered the total proteome, thereby confirming the importance of PPK in the cellular metabolism. For instance, proteins involved in energy metabolism and protein folding were more abundant in the ∆ppk mutant than in the WT strain. In the presence of iron the abundance of the proteins involved in phosphate metabolism, oxidative stress response, and translation was found to be higher in the ∆ppk mutant strain than in the WT. In addition to the proteome analysis, the study sought to overcome the oxidative stress susceptibility of the ∆ppk strain, a high antibiotic producer, by overexpression of catalase and alkyl hydroperoxide reductase genes. To the best of our knowledge, this is the first study to elucidate the relationship between iron homeostasis, oxidative stress, and polyphosphate in Streptomyces.
Benzer Tezler
- The network between polyp, lon protease and secondary metabolite production in Streptomyces coelicolor A3(2)
Streptomyces coelicolor A3(2)'de polip, lon proteaz ve sekonder metabolit üretimi arasındaki ilişki
NAGİHAN GENEL
Doktora
İngilizce
2025
BiyomühendislikGebze Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEDEF TUNCA GEDİK
- Polifosfat kinaz (PPK) yoksunluğunun Streptomyces coelicolor'da antibiyotik biyosentezine etkisi
The effect of polyphosphate kinase deficiency on antibiotic production in Streptomyces coelicolor
İREM YALIM
Yüksek Lisans
Türkçe
2010
BiyolojiGebze Yüksek Teknoloji EnstitüsüBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. SEDEF TUNCA GEDİK
- Bacillus thuringiensis polifosfat kinaz genine (ppk) ait olası promotorun transkripsiyonel aktivitesinin ölçülmesi
Measurement of transcriptional activity of putative Bacillus thuringiensis polyphosphate kinase gene (ppk) promoter
CEYDA KETENCİ
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
BiyolojiGebze Yüksek Teknoloji EnstitüsüMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. SEDEF TUNCA GEDİK
- Çok kopyalı polifosfat kinaz ve ekzopolifosfataz genlerinin potansiyel ekspresyonunun Streptomyces coelicolor'ın ağır metal toleransına ve fosfat depolamasına etkisi
The effect of potential expression of multiple copies of polyphosphate kinase and exopolyphosphatase genes on Streptomyces coelicolor?s heavy metal resistance and phosphate storage
ÜMMEHAN SAVAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2010
BiyoteknolojiGebze Yüksek Teknoloji EnstitüsüBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. SEDEF TUNCA GEDİK
- Studies on testing polyphosphate deficient Streptomyces coelicolor as a host for homolog and heterologous expression of valuable products
Polifosfat yoksunu Streptomyces coelicolorun değerli ürünlerin homolog ve heterolog ifadeleri için konak olarak test edilmesi çalışmaları
BUSE ÇINAR
Yüksek Lisans
İngilizce
2020
BiyolojiGebze Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SEDEF TUNCA GEDİK