Homosistein tayinine yönelik biyosensör geliştirilmesi
Development of a novel biosensor for homocysteine determination
- Tez No: 94074
- Danışmanlar: PROF. DR. AZMİ TELEFONCU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Homosistein, Yumurta kabuğu membranı, Biosensor, Enzim elektrodu, Homocysteine, Biosensor, Eggshell membrane, Enzyme electrode
- Yıl: 2006
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ege Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 98
Özet
Bu çalışmanın amacı sülfhidril grubu içeren bir amino asit olan homosistein için biyosensör geliştirmektir. Homosisteinin yüksek düzeylerinin Alzheimer hastalığı, oklüzif damar hastalığı, venöz tromboz, felç, kardiyovasküler hastalıklar, miyokardiyal enfarktüsde Ölüm oranı, diyabet, bunama gelişimi, gebelikteki düşükler, kanser oluşumu ve polimorfizm gibi birçok sorun ile ilişkisi araştırılmış ve çeşitli bulgular ortaya koyulmuştur. Özellikle kardiyovasküler sorunlar ile homosisteinin ilişkisi derinlemesine araştırılmıştır. Homosisteinin damar tıkanıklığı yarattığım gösteren teorik mekanizmalar açıklanmıştır. Plazma homosistein düzeyinin her 2.5 umol/L artışı kardiyovasküler hastalık riskini %10, felç riskini ise %20 artırdığı yapılan çalışmalarla bulunmuştur. Plazma homosistein düzeyi yüksek olan kardiyovasküler sorunlu kişilerde Ölüm oranının arttığı da yine yapılan çalışmalarda bulunmuştur. Bu nedenle hastanelerde homosistein tayini rutin olarak yapılır hale gelmiştir. Tayin sonucu elde edilen değer yüksekse vitamin takviyesi ile hastanın tedavisi yapılabilir. Çalışma kapsamında biyosensörün biyolojik komponenti olarak L- homosistein desülflndraz, yumurta kabuğu membranına immobilize edildi. Transdüser olarak seçilen amonyum seçici elektrod ile enzimatik reaksiyon sonucu oluşan amonyak potansiyometrik sinyale dönüştürüldü. Geliştirilen biyosensörün optimizasyonu için sıcaklık, pH, tampon konsantrasyonu, glutaraldehit miktarı, DTT miktarı ve ISA (iyonik şiddet ayarlayıcı tampon) tamponunun etkisi araştırıldı. Biyosensörün karakterizasyonu için ise tayin aralığı, operasyonel kararlılık, L-sistein ve L-metiyoninin girişim etkileri ve plazma total homosistein tayinine uygunluğu incelendi.
Özet (Çeviri)
Homocysteine is a sulphur containing amino acid. It is not found in natural protein structure but because of methionine metabolism it can be found in all cell types. The significance of homocysteine was first discovered at 1969 by Kilmer McCully. High levels of homocysteine in plasma is associated with coronary artery disease, cerebrovascular disease, Alzheimer's disease, myocardial infarction etc. In last decade homocysteine becomes a marker for atherosclerosis and myocardial infarction. Many methods have been developed for clinical determination of homocysteine such as immunoassay, HPLC and enzymatic assay. In this study, development of cheap and fast determination method for homocysteine was aimed. For this purpose, L-homocysteine desulfhydrase (E.C.4.4.1.2), (systematic name: L-homocysteine hydrogen-sulfide-lyase) was immobilized on eggshell membrane byvra crosslinking with glutaraldehyde. As our knowledge this enzyme has been used for first time in biosensing system. Extracted eggshell membrane was modified with homocysteine desulfhydrase and then modified membrane was placed to the surface of ammonium selective electrode which served as homocysteine biosensor. Homocysteine desulfhydrase catalyses reaction shown below: L-homocysteine + water * sulfide + ammonia + 2-oxobutirate Formed ammonia was detected by ammonium selective electrode and by this way homocysteine concentration was detected. For further optimization and characterization of biosensor, the effects of; enzyme loading, glutaraldehyde concentration, temperature, pH and ionic strength, ISA buffer, DTT concentration on the response of biosensor have been investigated in detail.
Benzer Tezler
- DNA ve protein analizine yönelik elektrokimyasal sensörlerin geliştirilmesi
Development of electrochemical sensors for DNA and protein analysis
ECE EKŞİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
BiyokimyaEge ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. KADRİYE ARZUM ERDEM GÜRSAN
- Akut miyokard enfarktüsü biyogöstergelerinden homosistein, miyoglobin ve yağ asiti bağlayıcı proteinin (FABP) girişimsiz tayini için ters iyontoforez tabanlı elektrokimyasal immünosensörün geliştirilmesi
Development of a reverse iontophoresis-based electrochemical immunosensor for the noninvasive determination of homocysteine, myoglobin and fatty acid binding protein (FABP), biomarkers of acute myocardial infarction
FATMA GÜLAY DER
Doktora
Türkçe
2024
Eczacılık ve FarmakolojiEge ÜniversitesiAnalitik Kimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MUSTAFA EMRAH KILINÇ
- Biyotiyollerin tayini için perilen diimid temelli floresans probların geliştirilmesi ve uygulamaları
Development of perylene bisimide based fluorescent probes for determination of biothols and their applications
ŞÜKRİYE NİHAN KARUK ELMAS
Doktora
Türkçe
2019
KimyaKaramanoğlu Mehmetbey ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. İBRAHİM YILMAZ
- Lökosit sistin düzeyinin belirlenmesi için bir lc ms/ms metodu geliştirilmesi
Development an lc ms ms method for the determination of leukocyte cystine level
ERHAN CANBAY
- Aza–bodipy compounds with fluorescent property for determination of bio–thiols
Biyo–tiyollerin tayini için floresan özellikli aza–bodipy bileşikleri
BLEDA CAN SADIKOĞULLARI
Yüksek Lisans
İngilizce
2019
Kimyaİstanbul Teknik ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. AYŞE ÖZDEMİR