Adipoz doku kökenli mezenkimal kök hücrelerin migrasyonunda YAP fosforilasyonunun incelenmesi
Investigation of YAP phosphorylation in the migration of adipose tissue-deri̇ved mesenchymal stem cells
- Tez No: 1023675
- Danışmanlar: PROF. DR. NACİYE DİLARA ZEYBEK
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biyoloji, Moleküler Tıp, Biochemistry, Biology, Molecular Medicine
- Anahtar Kelimeler: Abdominal yağ, Fibroblast büyüme faktörü, Fosforilasyon, Kök hücreler, Migrasyon, Fibroblast growth factor, Phosphorylation, Stem cells, Migration
- Yıl: 2026
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Kök Hücre Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Rejeneratif tıpta kullanılan mezenkimal kök hücrelerin (MKH) hücre tedavisindeki etkinliği, hedef bulma yeteneklerine ve yaralanma bölgesine göç edebilme özelliklerine bağlı olduğundan, migrasyon yeteneklerinin altında yatan mekanizmaların aydınlatılması önemlidir. Bu tez çalışmasında, FGF-2 ile uyarılan AdMKH'lerin migrasyonunda Hippo/Src sinyal yolu ilişkili YAP fosforilasyonunun araştırılması hedeflenmiştir. Bu amaçla, karın cilt altı yağ dokusundan izole edilerek karakterizasyonları yapılmış AdMKH'lere Hippo/Src sinyal yolu inhibitörleri (0.5 µM Verteporfin, 0.1 µM XMU-MP-1, 5 µM PP1 inhibitörü) sonrası FGF-2 uygulanmış, migrasyon için yara iyileşmesi ve transwell migrasyon testi yapılmıştır. Total YAP, TAZ, pYAP-S127, pYAP-Y357, total Src ve pSrc-Y416 proteinlerindeki değişimler 15 dakika, 1 saat, 12 saat ve 24 saat total hücre ektraktlarında Western blot analizi ile belirlenmiştir. FGF-2 ve inhibitörler ile kombine grupların 24 saat sitoplazma ve nükleer ekstraktlarında pYAP-Y357, YAP ve TAZ proteinlerindeki değişimler incelenmiş, YAP ve pYAP-Y357 lokalizasyonu immunfloresan işaretleme ile gösterilmiştir. Bu tez çalışmasında; AdMKH migrasyonunda FGF-2 uygulaması sonrasında çekirdekte pYAP-Y357 düzeyinin artan lokalizasyonu, Verteporfin'in total YAP'ın yanısıra total Src protein düzeyini ve AdMKH migrasyonunu azalttığı, XMU-MP-1 ve FGF-2'nin birlikteliğinde Hippo sinyal yolundaki artan baskılayıcı etki gösterilmiştir. FGF-2 ile uyarılan AdMKH'lerin migrasyonunda; Hippo sinyal yolunun baskılanmasının, Src aktivasyonu sonucu oluşan pYAP-Y357 ile YAP aktivasyonunun artışının ve pYAP-Y357'nin çekirdeğe lokalizasyonunun artmasının AdMKH'lerin horizontal yöndeki migrasyonda, TAZ'ın çekirdekte artan lokalizasyonunun ise vertikal yöndeki migrasyonda etkili olduğu saptanmıştır.
Özet (Çeviri)
Since the therapeutic efficacy of mesenchymal stem cells (MSCs) in regenerative medicine largely depends on their homing capacity and ability to migrate toward sites of injury, elucidating the mechanisms underlying their migratory behavior is of great importance. The aim of this thesis was to investigate the role of YAP phosphorylation via the Hippo/Src signaling pathway in the migration of FGF-2-stimulated AdMSCs. For this purpose, AdMSCs isolated from abdominal subcutaneous adipose tissue and characterized, were treated with Hippo/Src signaling pathway inhibitors (0.5 µM Verteporfin, 0.1 µM XMU-MP-1, and 5 µM PP1), followed by FGF-2 stimulation and their migration was assessed using wound healing and transwell migration assays. Changes in the total YAP, TAZ, pYAP-S127, pYAP-Y357, total Src, and pSrc-Y416 proteins were determined by Western blot analysis in total cell extracts at 15 minutes, 1 hour, 12 hours, and 24 hours. Changes in pYAP-Y357, YAP and TAZ protein levels in cytoplasmic and nuclear extracts at 24 hours were examined in FGF-2-treated and FGF-2-inhibitor-treated groups, and the localization of YAP and pYAP-Y357 was demonstrated by immunofluorescence staining. In this thesis it was demonstrated that following FGF-2 treatment AdMSCs, nuclear localization of pYAP-Y357 was increased, while Verteporfin reduces both total YAP, total Src protein levels and AdMSCs migration. Furthermore, the combined treatment of XMU-MP-1 and FGF-2 exhibited an enhanced inhibitory effect on Hippo pathway, the increase in YAP activation mediated by Src activation through pYAP-Y357, and the enhanced nuclear localization of pYAP-Y357 contributed to horizontal migration, whereas the increased nuclear localization of TAZ was associated with vertical migration.
Benzer Tezler
- Adipoz doku kökenli mezenkimal kök hücrelerin (ad-scs) kültürasyonunda ve adipositlere farklılaştırılmasında trombositten zengin plazmanın (prp) etkinliği
Effectiveness of platelet-rich plasma (prp) on cultivation and differentiation of adipose tissue-derived mesenchymal stem cells (ad-scs) into adipocytes
ŞÜKRAN NOYAN SAVAŞ
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
Tıbbi BiyolojiEge ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜLİNNAZ ERCAN
- Adipoz doku kökenli mezenkimal kök hücrelerin grafen-nanofiber matriks üzerinde nöronal farklılaşma potansiyelinin incelenmesi
Investigation of neuronal differentiation potential of adipose tissue derived mesenchymal stem cell on graphene-nanofiber biomaterial
ERTUĞRUL PINAR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2019
NöroşirürjiMarmara ÜniversitesiBeyin ve Sinir Cerrahisi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FERHAT HARMAN
- Adipoz doku kökenli mezenkimal kök hücrelerin, TLT4 üzerinden pankreas kanseri hücrelerindeki antikanserojenik etkilerinin incelenmesi
Investigation of anticarcinogenic effects of adipose tissue derivedmesenchymal stem cells on pancreatic cancer cells via TLR4
DEMET KAÇAROĞLU
Doktora
Türkçe
2023
OnkolojiSüleyman Demirel ÜniversitesiTıbbi Biyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NİLGÜN GÜRBÜZ
DR. ÖĞR. ÜYESİ SEHER YAYLACI
- Adipoz doku kökenli mezenkimal kök hücrelerden farklılaştırılan doğal öldürücü hücrelerin pankreas kanseri kök hücreleri ile ko-kültürü sonrasında potansiyal anti-kanser etkinliğinin incelenmesi
Investigation of the anti-cancer efficiency of natural killer cells differentiated from adipose tissue-derived mesenchymal stem cells co-cultured with pancreatic cancer stem cells
AYFER KARLITEPE
Yüksek Lisans
Türkçe
2016
BiyokimyaEge ÜniversitesiTıbbi Biyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. GÜLİNNAZ ERCAN
- Glukagon benzeri peptid-1'in adipoz doku kökenli mezenkimal kök hücrelerin kardiyomiyosite dönüşümüne etkisi
Effect of glucagon-like peptide-1 on differentiation of adipose derived mesenchymal stem cells into cardiomyocytes
ÖZGÜR TEKİN