Biochemical characterization of trehalase from wheat suspension culture
Trehalaz enziminin buğday süspansiyon kültüründen biyokimyasal karakterizasyonu
- Tez No: 119289
- Danışmanlar: PROF. DR. MERAL YÜCEL, PROF. DR. HALUK HAMAMCI
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Trehalaz, buğday, süspansiyon hücre kültürü, tuz stresi, trehaloz vı, Trehalase, wheat, suspension culture, salt stress, trehalose IV
- Yıl: 2002
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 72
Özet
oz TREHALAZ ENZİMİNİN BUĞDAY SÜSPANSİYON KÜLTÜRÜNDEN BİYOKİMYASAL KARAKTERİZASYONU Gençsoy, Beray Yüksek Lisans, Biyokimya Ana Bilim Dalı Tez Yöneticisi: Prof. Dr. Meral Yücel Ortak Tez Yöneticisi: Prof. Dr Haluk Hamamcı Mayıs 2002, 57 sayfa İndirgeme özelliği olmayan bir disakkarit olan trehaloz (cc-D- glucopyranosyl [1-1] a-D-glucopyranoside) şimdiye kadar bakteri, fungus, böcekler gibi çeşitli mikroorganizmalarda ve de bitkilerde bulunmuştur. Trehalozu glukoza hidrolizini katalizleyen enzim olan trehalaz (E.C.3.2.1.28) birçok bitki türünde gözlenmiştir. Bu çalışma, buğday CY-45 süspansiyon hücre kültüründen trehalaz enzim izolasyonu ve karakterizasyonu üzerine yoğunlaşmıştır. Bunun yanında, kontrol ve tuz stresi koşullan altında, trehalaz enziminin kinetik parametrelerine ve hücre kültürünün büyüme karakterizasy onuna da bakılmıştır. İlk olarak, trehalaz enzimi asidik koşullarda buğday süspansiyon hücre kültüründen izole edildi. Bütün karakterizasyon çalışmaları için ham özüt kullanıldı. Trehalaz enzim aktivite ölçümleri glikoz oksidaz peroksidaz kiti ileyapıldı. Optimum pH ve optimum sıcaklık sırayla pH: 6.3 ve 55°C olarak bulundu. Bu çalışmada, trehalazın özgül enzim aktivitesi pH: 6.3 ve 37°C de 0.0559 U/mg protein olarak tayin edildi. Kontrol ve tuz stresi altında bulunan buğday süspansiyon hücre kültürünün büyüme karakterizasyonu yapıldı. Yüksek tuz stresi koşullarında, süspansiyon hücre kültürlerinin yaş ağırlıklarının önemli ölçüde düştüğü gözlendi. Tuz stresinin trehalaz enzim aktivitesi üzerindeki etkisine bakıldı. Trehalaz enzim aktivitesinde 3 haftalık tuz stresi uygulamasından sonra düşüş görüldü. Kontrol süspansiyon hücre kültüründe Km ve Vmax değerleri sırasıyla 0.42 mM ve 0.067 U/mg protein olarak bulundu. Ay m değerler 0.1 M NaCl içeren süspansiyon hücre kültüründe 1.46 mM ve 0.053 U/mg protein olarak tayin edildi.
Özet (Çeviri)
ABSTRACT BIOCHEMICAL CHARACTERIZATION OF TREHALASE FROM WHEAT CELL SUSPENSION CULTURE Gençsoy, Beray M.Sc, Department of Biochemistry Supervisor: Prof. Dr. Meral Yücel Co-supervisor: Prof. Dr Haluk Hamamcı May 2002, 57 pages Trehalose (a-D-glucopyranosyl [1-1] a-D-glucopyranoside) a non reducing disaccharide has been found in diverse organisms such as bacteria, fungi, insects and also in plants. The enzyme trehalase (E.C.3.2.1.28) that catalyzes the hydrolysis of trehalose to glucose has also been detected in plant species. This study focused on isolation and characterization of trehalase enzyme from wheat CY-45 cell suspension culture. In addition, under control and salt stress conditions, kinetic parameters of trehalase enzyme and growth characteristics of suspension cultures were determined. As the first step, trehalase was extracted from wheat suspension culture under acidic conditions. All of the characterization studies were done by crude extract. The enzyme activity measurements were carried out by discontinuous assay using glucose oxidase-peroxidase kit. Optimum pH and optimum intemperature were found to be 6.3 and 55°C, respectively. Specific activity of trehalase was found to be 0.0559 U/mg protein at pH: 6.3 and 37°C. The growth characteristics of suspension cultures under control and different salt stress conditions (0.1 M and 0.2 M NaCl) were examined. At high salt stress conditions (0.2 M NaCl), wet-weights of suspension cultures significantly decreased. Effect of salt stress on trehalase enzyme activity was also studied. Trehalase enzyme activity decreased after 3 weeks of salt treatment. Km and Vmax values for control were found to be 0.42 mM and 0.067 U/mg protein, respectively. For 0.1 M NaCl treated samples, these values were found to be 1.46 mM and 0.053 U/mg protein, respectively.
Benzer Tezler
- Küçükbaş hayvan derilerindeki ılımlı halofil bakterilerin karakterizasyonu
Characterization of moderately halophilic bacteria found on the sheep and goat skins
PINAR ÇAĞLAYAN
Doktora
Türkçe
2015
BiyolojiMarmara ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MERAL BİRBİR
PROF. DR. ANTONIO VENTOSA
- Şeker pancarından izole edilen yumuşak çürüklüğüne neden olan pectobacterium betavsculorum'un biyokimyasal ve moleküler yöntemlerle karakterizasyonu
Characterization of pectobacterium betavasculorum isolated from sugar beet by biochemical and molecular methods
BELGACEM HATTAB
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
ZiraatSelçuk ÜniversitesiBitki Koruma Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. KUBİLAY KURTULUŞ BAŞTAŞ
- Purification and characterization of hexokinase isoenzymes from Rhizopus oryzae
Rhizopus oryzae'den heksokinaz izoenzimlerinin saflaştırılması ve karakterizasyonu
DİDEM DEDEOĞLU
Yüksek Lisans
İngilizce
2007
BiyokimyaOrta Doğu Teknik ÜniversitesiBiyokimya Ana Bilim Dalı
PROF. HALUK HAMAMCI
DR. ŞEYDA AÇAR
- Pamuk yaprak kurdu Spodoptera littoralis (Boisd.) (Lepidoptera: Noctuidae)'nda pyrethroid ve neonikotinoid direncinin biokimyasal karakterizasyonu
Biochemical characterization of pyrethroid and neonicotinoid resistance of spodoptera littoralis (Boisd.)(Lepidoptera: Noctuidae)
ABDOLLAH DINI POUR
- Biochemical characterization of newly identified lipases for utilization in lipase-catalysed reactions
Lipazla katalizlenen reaksiyonlarda kullanılmak üzere tanımlanan yeni lipazların biyokimyasal karakterizasyonu
DUYGU ELİF YILMAZ
Yüksek Lisans
İngilizce
2016
BiyomühendislikMarmara ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. NİHAT ALPAGU SAYAR