Geri Dön

Characterization and modulation by drugs and other effectors of bovine liver microsomal flavin monooxygenase (FMO)

Sığır karaciğer mikrozomal flavin monooksijenaz (FMO)'ın karakterizasyonu ve ilaçlar ile diğer efektörler tarafından modülasyonu

  1. Tez No: 153665
  2. Yazar: DENİZ FULYA BAŞER
  3. Danışmanlar: PROF. DR. ORHAN ADALI, PROF. DR. EMEL ARINÇ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: FMO, flavin monooksijenaz, metimazol, imipramin, klorpromazin, sığır karaciğer mikrozomu, karakterizasyon, modülasyon, efektör, FMO, flavin-containing monooxygenases, methimazole, imipramine, chlorpromazine, bovine liver microsome, characterization, modulation, effectors. IV
  7. Yıl: 2004
  8. Dil: İngilizce
  9. Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 124

Özet

oz SIĞIR KARACİĞER MİKROZOMAL FLAVİN MONOOKSİJENAZ (FMO) 'İN KARAKTERİZASYONU VE İLAÇLAR İLE DİĞER EFEKTÖRLER TARAFINDAN MODÜLASYONU Başer, Deniz Fulya Yüksek Lisans, Biyokimya Bölümü Tez Yöneticisi: Prof. Dr. Orhan Adalı Yardımcı Tez Yöneticisi: Prof. Dr. Emel Arınç Ocak 2004, 107 sayfa Flavin-içeren monooksijenazlar (FMO; E. C. 1.14. 13. 8), ilaçlar ve çevresel toksinlerin de dahil olduğu birçok değişik yabancı maddelerin, NADPH ve oksijene bağımlı oksidasyonunu katalize eden mikrozomal flavoprotein enzimlerdir. Azot, sülfür, fosfor ve selenyum heteroatomu içeren nükleofıller FMO'nun substratlarıdır. Sığır karaciğer mikrozomal FMO enzim aktivitesi, FMO enzimleri için çok özgün bir substrat olan metimazol kullanılarak karakterize edildi. 12 farklı sığır karaciğeri numunesinden mikrozomlar hazırlandı ve ortalama özgün FMO aktivitesi 2.37 ± 0.30 nmol/min/mg (Ortalama ± SH, n=12) olarak bulundu. Reaksiyon hızı 0.5 mg protein miktarına kadar doğru orantılı arttı. En yüksek FMO enzim aktivitesi 37 °C ve pH 8.0'de tespit edildi. FMO aktivitesi üzerine Triton X-100 ve Emulgen 913 deterjanlarının etkileri çalışıldı ve enzim aktivitesinin bu deterjanların herbirininreaksiyon ortamına eklenmesiyle tüm konsantrasyonlarda (0.1%- 1.0%) arttığı gözlendi. FMO enziminin metimazol substratı için görünen Vmax ve Km değerleri sırasıyla 1.23 nmol/dak/mg and 0.1 1 mM olarak bulundu. Sığır karaciğer mikrozomal FMO enziminin ısıya dayanıklılığı dört farklı sıcaklıkta çalışıldı; 24 °C, 37 °C, 50 °C ve 65 °C. Enzim aktivitesinin tamamen kaybolması için gereken inkübasyon süresi 65°C'de 5 dakika, 50 °C'de 10 dakika, 37 °C'de 6.5 saat olarak gözlendi. 24 °C'de 53 saatin sonunda halen %68 enzim aktivitesinin kaldığı görüldü. Sığır karaciğer mikrozomlarının imipramin ve klorpromazin gibi iki ilaç substratına karşı aktivitesi de ölçüldü ve sırasıyla 3.73 ve 3.75 nmol oksitlenmiş NADPH/dak/mg olarak tespit edildi. İmipramin ve klorpromazinin sığır karaciğer mikrozomal FMO enziminin metimazol oksidasyon aktivitesi üzerine etkileri belirlendi ve çalışılan tüm konsantrasyonların FMO enzim aktivitesini inhibe ettiği bulundu. Sığır karaciğer mikrozomal FMO aktivitesinin modülasyonu üç farklı ağır metal iyonuyla, Ni+2, Cd+2 ve Hg+2, çalışıldı. Herbir ağır metal iyonu için çalışılan diğer tüm konsantrasyonlar ve tüm metimazol konsantrasyonlarında (0.1, 0.2, 0.5, 1.0 mM), FMO enziminin metimazol oksidasyon aktivitesinin kontrole göre azaldığı görüldü. Ni+2, Cd+2 ve Hg+2 iyonları için Ki değerleri sırasıyla 0.5 mM, 0.085 mM, 4.6 uM olarak bulundu. Dixon eğrisinden üç ağır metal iyonu için de inhibisyon çeşidi nonkompetitif olarak gözlendi.

Özet (Çeviri)

ABSTRACT CHARACTERIZATION AND MODULATION BY DRUGS AND OTHER EFFECTORS OF BOVINE LIVER MICROSOMAL FLAVIN MONOOXYGENASE (FMO) Baser, Deniz Fulya M.S., Department of Biochemistry Supervisor: Prof. Dr. Orhan Adah Co-Supervisor: Prof. Dr. Emel Arınç January 2004, 107 pages The flavin-containing monooxygenases (FMO; E.C.I. 14. 13. 8) are microsomal NADPH and oxygen-dependent flavoprotein enzymes that catalyze the oxidation of a wide variety of xenobiotics, including drugs and environmental toxicants. Nucleophiles containing nitrogen, sulfur, phosphorus and selenium heteroatoms are the substrates of FMO. Bovine liver microsomal FMO enzyme activity was characterized using methimazole as substrate, which is a highly specific substrate for FMO. From 12 different bovine liver samples, microsomes were prepared and the average specific activity of bovine liver microsomal FMO was found to be 2.37 ± 0.30 nmol/min/mg (Mean ± SE, n=12). The rate of reaction was linear up to 0.5 mg of bovine liver microsomal protein. The maximum FMO enzyme activity was detected at 37 °C andat pH 8.0. Effects of detergents; Triton X-100 and Emulgen 913, on FMO activity were determined and found that enzyme activity increased by the addition of either detergent at all concentrations (0.1%- 1.0%). The apparent Vmax and Km values of bovine liver microsomal FMO for methimazole substrate were found as 1.23 nmol/min/mg and 0. 1 1 mM, respectively. Thermostability of bovine liver microsomal FMO was studied at four different temperatures; 24 °C, 37 °C, 50 °C and 65 °C. The incubation time required for the complete loss of enzyme activity was 5 minutes at 65 °C, 10 minutes at 50 °C and 6.5 hours at 37 °C. 68 % of the activity was still detectable at the end of 53 hours at 24 °C. Bovine liver microsomal activity towards two drug substrates, imipramine and chlorpromazine, was also determined and found to be 3.73 and 3.75 nmol NADPH oxidized/min/mg, respectively. Effects of two drug substrates, imipramine and chlorpromazine, on bovine liver microsomal FMO-catalyzed methimazole oxidation activity was also studied and found that they inhibit FMO activity at all concentrations studied. Modulation of bovine liver microsomal FMO activity was studied using three different heavy metal ions; Ni+2, Cd+ and Hg+2. At all other concentrations studied for each heavy metal ion and at all substrate methimazole concentrations (0.1, 0.2, 0.5, 1.0 mM), FMO-catalyzed methimazole oxidation activity decreased compared to control activity. Ki values for Ni+2, Cd+2 and Hg+2 were found to be 0.5 mM, 0.085 mM, 4.6 uM, respectively. From the Dixon plot, the pattern of inhibition for three heavy metal ions was observed to be noncompetitive.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    803566

    Periodontal hastalığa sebep olan periodontal patojenlerin klorhekzidin karbon dot bağlı kitosan nanopartiküller ile antibakteriyel etkinliğinin incelenmesi

    Investigation of the antibacterial effectiveness of chlorhexidin carbon dot loaded chi̇tosan nanoparticles agai̇nst periodontal pathogens to cause periodontal disease

    KUDRET SARI

    Diş Hekimliği Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2023

    Diş HekimliğiOrdu Üniversitesi

    Periodontoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. VAROL ÇANAKÇI

  2. Tez No

    853351

    Production and characterization of nanofiber structures for fast dissolving tablet applications

    Hızlı emilebilen tablet uygulamalaro için nanolif yapılarının üretii̇ ve karakterizasyonu

    JVANA ABI

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2024

    BiyoteknolojiKarabük Üniversitesi

    Biyomedikal Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ YASİN AKGÜL

  3. Tez No

    347756

    Akut ve kronik ağrıda amigdala'ya uygulanan CDP-kolin'in analjezik etkisinin tanımlanması

    Characterization of the analgesic effect of CDP-choline administered intra-amygdala in acute and neuropathic pain models

    HASRET YÜCEL ÖZBÖLÜK

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    Eczacılık ve FarmakolojiUludağ Üniversitesi

    Tıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MİNE SİBEL GÜRÜN

  4. Tez No

    405083

    Preparation, characterization and in vitro evaluation of multifunctional magnetic nanoparticles for targeted cancer therapies

    Çok fonksiyonlu manyetik nanoparçacıkların hedef kanser tedavisinde kullanılabilmesi için hazırlanması, karakterizasyonu ve in vitro çalışmaları

    MAİDE GÖKÇE BEKAROĞLU

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2015

    Biyoteknolojiİstanbul Teknik Üniversitesi

    Fizik Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. SEVİM İŞÇİ TURUTOĞLU

  5. Tez No

    201943

    Preparation and characterization of chitosan-polyethylene glycol microspheres and films for biomedical applications

    Kitosan-polietilen glikol mikroküre ve filmlerinin biyomedikal uygulamalar için hazırlanması ve karakterizasyonu

    İSMAİL DOĞAN GÜNBAŞ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2007

    Polimer Bilim ve TeknolojisiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Polimer Bilim ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. NESRİN HASIRCI

Geri Dön