Partial purification and characterization of alkaline proteases from isolated Bacillus strains
İzole edilen Bacillus türlerinde alkalin proteaz enziminin kısmi saflaştırılması ve karakterizasyonu
- Tez No: 166336
- Danışmanlar: Y.DOÇ.DR. HAKAN BERMEK
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoteknoloji, Biotechnology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2005
- Dil: İngilizce
- Üniversite: İstanbul Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: İleri Teknolojiler Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
İZOLE EDİLEN BACILLUS TÜRLERİNDEN ALKALİN PROTEAZ ENZİMİNİN KISMİ SAFLAŞTIRILMASI VE KARAKTERİZASYONU ÖZET Proteazlar, proteinleri kısa peptitlere veya serbest aminoasitlere parçalayan ve organik çözücüler içinde peptit sentezini katalizleyen enzimlerdir. Proteazlann deterjan, gıda, deri, ilaç ve diğer biyoteknoloji endüstrilerinde birçok uygulama alanları vardır. Alkali proteazlar, bakteri, küf, maya gibi birçok çeşitli mikroorganizmalar tarafından üretilirler. Bakteriler arasında hücre dışı proteaz üretimi özellikle Bacillus türüne özgüdür. Bu çalışmada, deri sanayinin atık sularından farklı Bacillus türleri izole edilmiş ve proteaz enzimi üretimleri araştırılmıştır. Çeşitli deri fabrikalarından alman atık su numunelerinde mikroorganizmalar, özellikle de Bacillus türü aranmıştır. Dört farklı proteaz üreticisi olabilecek tür gözlenmiş ve Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus pumilus, Bacillus cereus olarak tanımlanmıştır. Türlerin tanımlanması ve proteaz üretiminin gözlenmesi standart test kitlerinin kullanımıyla gerçekleştirilmiştir. Bacillus türlerince üretilen proteazlara, amonyum sülfat ile çöktürme yöntemi uygulanmıştır. Elde edilen Bacillus pumilus proteazının çökeltileri konsantre edilmiş çözeltiler halinde UNO Q-6 iyon değiştirme kolon kromatografi sistemine yüklenmiştir. Kromatografi sonunda elde edilen aktif fraksiyonlar Millipore santrifüj üniteleri ile konsantre edilmiştir. Bu örneklerin molekül ağırlıkları SDS-PAGE yöntemi ile belirlenmiştir. Kısmi olarak saflaştmlan proteaz enzimlerinde sıcaklık ve pH'nın enzim aktivitesi ve stabilitesi üzerine olan etkileri incelenmiştir. Ayrıca metal iyonları ve çeşitli kimyasalların enzimlerin aktivitesi üzerinde olan etkileri de belirlenmiştir.
Özet (Çeviri)
PARTIAL PURIFICATION AND CHARACTERIZATION OF ALKALINE PROTEASES FROM ISOLATED BACILLUS STRAINS SUMMARY Proteases are enzymes that hydrolyze proteins to short peptides or free amino acids and catalyze peptide synthesis in organic solvents. Proteases have a large variety of applications in the detergent, food, leather, pharmaceutical and other biotechnology industries. Alkaline proteases are produced by a wide range of microorganisms including bacteria, moulds, yeasts. Among bacteria, Bacillus species are specific producers of extracellular proteases. In this study, different Bacillus species were isolated from the waste waters of tannery industry and they were screened for their ability to produce alkaline protease. Samples collected from different leather factories were screened for their content of microorganisms, specially for the genus. Four potential producers were examined and identified as Bacillus subtilis, Bacillus licheniformis, Bacillus pumilus and Bacillus cereus. Identification of the genus and detection of protease production were carried out by using detection kits. Extracellular alkaline proteases produced by these Bacillus isolates were purified to homogeneity by ammonium sulfate precipitation. Concentrated solution of Bacillus pumilus protease precipitates was loaded onto UNO Q-6 ion exchange column in a fast protein liquid chromatography system. Active fractions were concentrated with Millipore centrifugal filter unit. Their molecular weights were estimated by SDS- PAGE analysis. Effect of pH and temperature on the stability and activity of the purified enzymes were further studied. Effect of metal ions and chemicals on the activity of purified enzymes were determined. IX
Benzer Tezler
- Discovery of novel enzymes using proteomic approaches
Proteomik yaklaşımlar kullanılarak yeni enzimlerin keşfi
MERVE ÖZTUĞ KILINÇ
Doktora
İngilizce
2021
Biyokimyaİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
PROF. DR. NEVİN GÜL KARAGÜLER
DOÇ. DR. MÜSLÜM AKGÖZ
- Türkiye kaynaklı Bacillus spp.'lerin alkalen proteaz üretim kapasiteleri ve enzimlerin kısmen karakterizasyonu
Alkaline protease production capacity of Bacillus spp. isolated from Turkey and partial characterization of enzymes
NİLGÜN TEKİN
Yüksek Lisans
Türkçe
2008
MikrobiyolojiAnkara ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. CUMHUR ÇÖKMÜŞ
- Türkiye topraklarından izole edilen Bacillus sp. suşlarından proteaz üretimi, kısmi saflaştırılması ve karakterizasyonu
Protease production, partial purification and characterization from Bacillus sp. isolated from Turkish soil.
NİHAN SEVİNÇ
Yüksek Lisans
Türkçe
2010
BiyoteknolojiUludağ ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ELİF DEMİRKAN
- Toprak bakterilerinden ekstraselüler pektinaz üretimi, izolasyonu ve karakterizasyonu
Production, isolation and characterization of extraselular pectinase from soil bacteria
SEVİNÇ BERBER
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
MikrobiyolojiSivas Cumhuriyet ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ALİ FAZIL YENİDÜNYA
- Tuz Gölü'nden izole edilen halofilik mikroorganizmaların serin proteaz aktivitelerinin belirlenmesi ve kısmi saflaştırılması
The determination of serine protease activities of halophilic microorganism isolated from Tuz Lake and their partial purification
ALİ ARSLAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
BiyoteknolojiMuğla Sıtkı Koçman ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. GÜLTEN ÖKMEN