Katı substrat fermentasyonu ile ham nişastayı parçalayan yeni bir fungal amilaz üretimi saflaştırılması ve biyokimyasal özelliklerinin belirlenmesi
The parts and raw starch solid substrate fermentation production of a new fungal amilaz determination of purification and biochemical properties
- Tez No: 177356
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. FİGEN ERTAN
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: amilaz, katı substrat fermentasyon, ham nişastasindirimi, saflaştırma, Penicillium brevicompactum, amylase, solid substrat fermentation, raw starch digesting, purification, Penicillium brevicompactum
- Yıl: 2008
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Trakya Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 85
Özet
Bu çalışmada, yeni bir ham nişasta hidrolizleyen fungal amilazın SSFyöntemi ile üretilmesi, saflaştırılması ve bazı biyokimyasal özelliklerininbelirlenmesi amaçlanmıştır.Ham nişastayı hidrolizleyen amilaz taraması sonucunda en iyi aktiviteyePenicillium brevicompactum' un sahip olduğu bulundu ve amilaz kaynağı olarakkullanıldı. Buğday kepeği, pirinç kabuğu ve ayçiçeği küspesi en iyi substratıbelirlemek için test edildi. En iyi katı substratın buğday kepeği olduğu belirlendi.Amilaz üretimi için katı substrat fermentasyon şartları optimize edildi.Optimum fermentasyon şartları, başlangıç nem içeriği % 55, nemlendirici ajan 0.1M sodyum fosfat tamponu (pH 5.0), üretim süresi 7 gün, aşı miktarı 2.5 mL veüretim sıcaklığı 30 oC olarak saptandı.Penicillium brevicompactum amilazı nişasta afinite metodu kullanılarak45.98 kez saflaştırıldı. Saflaştırılan enzimin çözünür nişasta için Km değeri 5.71mg/ml, Vmax değeri ise 666.6 U/ml olarak hesaplandı.Enzim 30-50 oC arasında ve pH 5.0 de maksimum aktivite gösterdi. 30 oC'de 45 dk. inkübasyondan sonra başlangıç aktivitesini %100 korudu. pH 4.0-5.0arasında kararlı idi.Mn+2, Cu+2 and Na+ iyonları enzim aktivitesini arttırırken Mg+2, K+, Fe+3ve EDTA enzim aktivitesini inhibe etti.P. brevicompactum ?-amilazının molekül ağırlığı SDS-PAGE ile 32.5 kDaolarak tespit edildi.
Özet (Çeviri)
In this study, it was intended to the production of new a fungal amylasewith solid state fermentation, purification and also to determine its somebiochemical properties.It was found that Penicillium brevicompactum had the best enzymeactivity according to raw starch degrading amylase screening methods, and P.brevicompactum was selected as amylase source.Wheat bran, rice husk and sunflower oil meal were tested to determine thebest solid substrate. Wheat bran was determined as the best solid substrate.The fermentation contitions were optimized for the production of amylase.The optimum fermentation conditions were found to be initial moisture level ofsolid substrate of 55 %, moistening agent of 0.1 M sodium phosphate buffer (pH5.0), incubation period of 7 days, inoculum concentration of 2.5 mL andincubation temperature at 30 oC.P. brevicompactum ?-amylase was purified 45.98 times by using starchaffinity method. The Km and Vmax values of ?-amylase for soluble starch were5.71 mg/ml, 666.6 U/ml respectively.This amylase showed maximum activity at between 30-50 oC and pH 5.0.Initial enzyme activity was kept to be 100% after incubation at 30 oC for 45 min.Enzyme was stable in the pH range of 4.0-5.0.This enzyme was activated by Mn+2, Cu+2 and Na+ ions, and inhibited byMg+2, K+, Fe+3 and EDTA.The molecular weight of P. brevicompactum ?-amylase was found as 32.5kDa by SDS-polyacrylamide gel electrophoresis.
Benzer Tezler
- Fungal mikroorganizmalar ile katı-faz fermentasyonuna tabi tutulan elma ve domates posasının besin madde bileşiminin kanatlı hayvanlar için yarayışlı hale getirilmesi
Fungal microorganisms with solid-state fermentation of apple and tomato pomaces food composition for poultry applicability
RAMAZAN TOSUN
Yüksek Lisans
Türkçe
2017
ZiraatSüleyman Demirel ÜniversitesiZootekni Ana Bilim Dalı
PROF. DR. SULHATTİN YAŞAR
- Lakkaz üretimi ve ham kültür filtratının tekstil boyalarının renginin ve toksisitesinin gideriminde kullanımı
Production of laccase and use of culture filtrate for the decolorization and detoxification of textile dyes
NESRİN ÖZMEN
- Lignoselülozik biyokütleden ön arıtımla kombine biyoetanol ve metan üretim proseslerinin geliştirilmesi
Development of Bioethanol and Methane Production Processes Combined with Pretreatment from Lignocellulosic Biomass
ELÇİN KÖKDEMİR ÜNŞAR
Doktora
Türkçe
2019
Çevre MühendisliğiAkdeniz ÜniversitesiÇevre Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. NURİYE ALTINAY PERENDECİ
- Tarımsal artıkların hayvan yemi olarak kullanımında Pleurotus eryngii'nin etkinliğinin araştırılması
The studies on the effectiveness of Pleurotus eryngii for the utilization of agricultural wastes as animal feed
NUMAN YILDIRIM
- Katı kültür fermantasyonunun domates posasının besin maddeleri kompozisyonuna etkisi
The effect of solid state fermentation on the ingredients of tomato pomage
KERİM DEMİRGÜL
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
ZiraatOndokuz Mayıs ÜniversitesiZootekni Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERGİN ÖZTÜRK