Van kedisi eritrositlerinden karbonik anhidraz enziminin (E.C.4.2.1.1.) saflaştırılması ve karakterizasyonu
Purification and characterization cf carbonic anhydrase (E.C.4.2.1.1.) enzyme from Van cat's erythrocytes
- Tez No: 182685
- Danışmanlar: Y.DOÇ.DR. HALİT DEMİR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Kimya, Biochemistry, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2006
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Yüzüncü Yıl Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 47
Özet
Bu çalışmada Van Kedisi eritrositlerinden karbonik anhidraz (E.C.4.2.1.1.)enzimi afinite kromatografisi yöntemi ile saflaştırılmış ve karakterize edilmiştir. Buçalışma için alınan kedi kanı, antikoagulantlı tüplere konuldu. Gerekli santrifüj vediğer işlemler yapıldıktan sonra kolona uygulanacak hemolizat haline getirildi.Kolona uygulanacak hemolizatın pH'sı katı Tris ile dengeleme tamponunun pH'sıolan pH=8.7'ye ayarlandı. PH'sı ayarlanmış hemolizat aktifleşmiş Sepharose 4-B-L-tirozin-sülfanilamid afinite kolonuna uygulandı. Kolondan alınan fraksiyonlardanaktivite gösterenler, kantitatif protein tayinleri için Coomassie blue yöntemiyle ve 595nm'de yapıldı. Bunun yanı sıra enzimin optimum pH'sı, optimum sıcaklığı ve iyonikşiddet etkisi incelendi. Sonra SDS-Page Jel elektroforezi ile enzimin saflığı kontroledildi. Enzimin optimum pH'sı 8.0, optimum sıcaklığı 40 oC olarak bulundu. İyonikşiddetin etkisi üzerine yapılan çalışmada ise en yüksek aktivite 0.12 M (NH4)2SO4konsantrasyonunda görülmüştür.Enzimin saflık derecesi SDS-Page Jel elektroforezi ile kontrol edildi ve tekbant görülerek saflığı ispatlandı.
Özet (Çeviri)
In this study, carbonic anhydrase (E.C.4.2.1.1.) enzyme obtained from VanCat?s erythrocyte was purified with affinity chromatography and characterized. Cat?sblood was put in anticoagulant tubes for this study. After necessary centrifuge andother operations it was converted hemolysate for column application. pH ofhemolysate was adjusted pH= 8.7 which is pH of balancing buffer with solid Tris.The hemolysate was applied to activated Sepharose 4B-Tyrosine-Sulpanilamideaffinity column. Quantitative protein analyse of active fractions was performed at 595nm with Coomassie blue method. In addition, optimum pH of enzyme, optimumtemperature and ionic strength effect was investigated. Then purification of enzymewas controlled with SDS-PAGE electrophoresis. Optimum pH of enzyme andoptimum temperature was found as 8.0 and 40 oC. The highest activity was seen inconcentration of 0.12 M (NH4)2SO4 as ionic strength.Purification of enzyme is controlled with SDS-PAGE electrophoresis andsingle band was seen as an evidence.
Benzer Tezler
- Van kedisi'nden 6-fosfoglukonat dehidrogenaz (E.C. 1.1.1.44) enzimi'nin saflaştırılması karakterizasyonu, kinetiği, inhibisyonu ve HPLC ile yönteminin geliştirilmesi
Purification, characterization, kinetic, inhibition and developing detection method with HPLC of 6-phosphogluconate dehydrogenase (E.C. 1.1.1.44) enzyme from van cat
SERPİL KILIÇ
- Van kedisi'nde görülen sağırlığın insidansı ve göz renklerine göre dağılımı üzerine araştırmalar
Study on the incidence of deafness in van cats and its distrubution by eye colors
FUNDA ALMAÇ ÇELİK
Doktora
Türkçe
2019
Veteriner HekimliğiVan Yüzüncü Yıl Üniversitesiİç Hastalıkları (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ABDULLAH KAYA
PROF. DR. AHMET FARUK KIROĞLU
- Van kedilerinde ön bacak iskeletinin bilgisayarli tomografi ile üç boyutlu olarak incelenmesi
Three-dimensional investigation by computed tomography of the forelimb skeleton in van cats
OSMAN YILMAZ
Doktora
Türkçe
2018
AnatomiYüzüncü Yıl ÜniversitesiAnatomi (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ZAFER SOYGÜDER
DOÇ. DR. ALPASLAN YAVUZ
- Van kedilerinde epifiz plaklarının kapanma sürelerinin radyolojik olarak belirlenmesi üzerine çalışmalar
The Radiological studies on determination of the closure times of epiphyseal plate in Van Cats
MUHAMMET FURKAN YİĞİT
Doktora
Türkçe
1998
Veteriner HekimliğiYüzüncü Yıl ÜniversitesiCerrahi (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. ALİ BELGE
- Van kedilerinde büyümeye bağlı iskelet gelişim bozukluklarının radyolojik vebiyokimyasal tanısı
Radiological and biochemical diagnosis of skeletal developmental disorders due to growth in Van Cats
İBRAHİM YURDAKUL
Doktora
Türkçe
2005
Veteriner HekimliğiVan Yüzüncü Yıl ÜniversitesiCerrahi (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BAHTİYAR BAKIR