Geri Dön

In vıtro ortamda, erişkin ve çocuk kanserleri sağaltım modelinde, mikro çevrenin apoptotik yolak üzerine etkileri

Effects of microenvironment on apoptotic pathway in adult and children cancers therapy models, in in vitro environment.

PDF İndir

  1. Tez No: 193210
  2. Yazar: YASEMİN BASKIN
  3. Danışmanlar: PROF. DR. NUR OLGUN
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Onkoloji, Oncology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2006
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Dokuz Eylül Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Temel Onkoloji Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.

Özet

Amaç ve Hipotez: Yeni sağaltım stratejilerinin geliştirilmesi ve uygulanan kemoterapistratejilerinin daha etkin kılınması amacıyla yapılan çalışmalarda önemli hedeflerden biri detümör mikro çevresi ve doğal anti tümör sistemlerdir. Tümör hücresi ile mikro çevresiarasında çok sayıda etkileşmenin, tümör hücresinin yaşamında etkin rol aldığınıdüşünülmektedir. Reaktif oksijen ve nitrojen ürünlerini kapsayan mikro çevrenin, farklımetabolitler oluşturarak hücresel süreçlerde farklı yolakları etkileyebileceği bilinmektedir.Sağaltım süreçlerinde, apoptotik yolakta, RNS ve ROS temelli mikro çevre bileşenlerininetkileri, sağaltım stratejilerinin gelişmesini ve kemoterapi sağaltımının daha uygunkompozisyonda kullanılmasını amaçlayan yeni bir çalışma alanıdır. Bu çalışmanın amacı invitro bir kanser sağaltım modeli oluşturarak, reaktif oksijen ve nitrojen temelli bir mikroçevrenin apoptotik yolağı ve sağaltım süreçlerini nasıl etkilediğini göstermektir.Yöntem: SHSY5Y, Kelly HeLa ve HEp-2 hücre hatlarında in vitro sağaltım modelioluşturuldu. ROS ve RNS temelli mikro çevre modellerinin deneysel tasarımında; L-Arg,GSNO, SIN-1, H2O2, baskılayıcı olarak L-NAME, SOD, Ebselen, Aminoguanidine.Bicarbonate, viral enfeksiyon modeli olarak BHV-1 kullanıldı. Hücreler üzerine oluşansitotoksik etkiler MTT ve XTT yöntemleri ile değerlendirildi. Apoptotik hücre ölümü için,Hoechst 33342 / Propidyum iyodid çekirdek boyaması, (in situ TdT-mediated dUTP nick endlabeling technique) TUNEL tekniği, apoptozun erken dönemde saptanması için Annexin Vişaretlemesi uygulandı. Nitrik oksit yanıtları Griess Ayıracı ile total nitrit olarakdeğerlendirildi.Bulgular ve sonuç: Servikal karsinoma hücre hattında mikro çevre değişikliğine yanıtınaraştırıldığı deneylerde, L-Arg (endojen NO donörü), doza bağımlı olarak, apoptotik yolağıuyarmıştır. Ortamda süperoksit bulunduğu durumlarda, NO uyarıldığında, hücresel ölüm1sinerjik olarak artmıştır. Endojen NO uyarımı ile oluşan hücresel ölüm apoptotik ölümken,süperoksit ve NO'in birlikte bulunduğu durumlarda baskın olan ölüm şekli nekrotik ölümolmuştur. Bu sonuçlar, NO'in hücresel ölüm şeklini (ortamda baskın olan radikale bağlıolarak) yönlendirmede temel bir rol oynadığını göstermiştir.BHV-1'de ya normal hücresel mikro çevrede ya da kanser hücresinde ?E? döneminden ?L?dönemine geçiş sırasında sunulan proteinler, staurosporin ile uyarılmış apoptozu bilebaskılamaktadırlar. Tersine normal bir hücresel mikro çevrede (MDBK) BHV-1 ?E? genlerisunulurken apoptoz en fazla uyarılırken, kanser hücrelerinde (HEp-2) ?IE? genleri sunulurkenapoptoz uyarılmıştır. BHV-1 apoptozunun kaspaz-8 yolağı ile yani ?dış membran reseptör?yolağından oluştuğunu göstermiştir.SHSY5Y hücrelerinde; ekzojen NO (GSNO), peroksinitrit (SIN-1) radikalinin baskın olduğumikroçevrede, DOXO, CIS, ETOP sağaltım modellerinde, CARBO+ETOP uygulamasında,peroksinitrit ve süperoksit; CIS+ETOP uygulamasında ekzojen NO ve süperoksit hücreölümünü arttırmışlardır.Kelly hücrelerinde; ekzojen NO (GSNO), peroksinitrit (SIN-1) ve süperoksit ve hidroksilradikalleri (H2O2) radikalinin baskın olduğu mikro çevrede, DOXO, CIS, ETOP sağaltımmodellerinde CARBO peroksinitrit ve süperoksit, CIS+ETOP uygulaması, ekzojen NO ilebirlikte, CARBO+ETOP uygulamasında hem ekzojen NO hem de süperoksit hücre ölümünüarttırmıştır. Sağaltım sürecindeki nöroblastoma hücrelerinde gözlenen apoptotik hücre ölümü,ortamda peroksinitrit bulunduğunda 2. 74 kat; ekzojen NO bulunduğunda 2. 18 kat; ROSbaskın bir ortamda 3. 45 kat artmıştır.Bu sonuçlar, mikro çevrede bulunan serbest radikalin cinsine bağlı olarak sağaltımsüreçlerinin etkilendiğini desteklemektedir.TÜRKÇE ANAHTAR KEL MELERNöroblastoma, tümör mikro çevresi, in vitro sağaltım modeli, ROS, RNS, apoptotik yolak.2

Özet (Çeviri)

Aim and Hypothesis: One of the main targets of the studies which aim to optimize appliedchemotherapy strategies more effectively and to develop new therapy strategies is the tumormicroenvironment and natural anti tumor systems. It is thought that many interactionsbetween tumor cell and its microenvironment play an effective role in the survival of thetumor cell. It is known that a microenvironment including reactive oxygen and nitrogenproducts, may affect distinct pathways by producing distinct metabolites in cellular processes.Effects of the RNS and ROS based microenvironment components on therapy processes;apoptotic pathways are new study areas which are aimed to develop therapy strategies andchemotherapy therapy in more appropriate compositions. The aim of this study is to showhow a reactive oxygen and nitrogen based microenvironment may affect the apoptoticpathway and therapy processes by forming an in vitro cancer therapy model.Method: An in vitro therapy model was formed in SHSY5Y, Kelly, HeLa and HEp -2 celllines. In experimental design of ROS and RNS based microenvironment L -Arg, GSNO, SIN -1, H2O2, and L -NAME, SOD, Ebselen, Aminoguanidine, Bicarbonate (as inhibitors) wereused. BHV -1 was used as a viral infection model. Cytotoxic effects on cells were determinedby MTT and XTT methods. For apoptotic cellular death; Hoechst 33342 / Propidium iodidenuclear staining, in situ TUNEL technique (TdT-mediated dUTP nick end labeling technique),and for early determination of the apoptosis; Annexin V labeling were used. Nitric oxideresponses were determined as total nitrite by Griess Reagent.Results and Conclusion: In experiments which the responses against microenvironmentchanges in cervical carcinoma cell line are searched, L -Arg (endogen NO donor) stimulatedthe apoptotic pathway in a dose-response manner. Cellular death increased synergistically1when NO was stimulated in conditions which superoxide was in the microenvironment.Endogen NO stimulated cellular death type was apoptotic, but dominant cellular death typewas necrotic when superoxide and NO were together. These results showed that NO played anessential role in mediating the cellular death according to the dominant radical in themicroenvironment.The proteins expressed during the transition from ?E? stage to ?L? stage either in normal or incancer microenvironment in BHV -1 infection; also inhibit the staurosporin stimulatedapoptosis. On the contrary, apoptosis was stimulated at most in a normal microenvironment(MDBK cells) when BHV -1 ?E? genes are expressed whereas when ?IE? genes wereexpressed in a cancer (HEp -2 cells) microenvironment. It was shown that BHV -1 stimulatedapoptosis was through caspase-8 pathway (means through ?outer membrane receptor?).In DOXO, CIS and ETOP therapy protocols in SHSY5Y cells, cell death was increased.When exogenous NO (GSNO) and peroxynitrite (SIN -1) were dominant inmicroenvironment, In CARBO + ETOP therapy protocols in SHSY5Y cells; cell death wasincreased when peroxynitrite and superoxide were dominant in microenvironment.And in CIS+ETOP therapy protocols in SHSY5Y cells, cell death was increased whenexogenous NO and superoxide were dominant.In DOXO, CIS, ETOP therapy protocols in Kelly cells, cell death was increased when ROSand RNS were dominant in microenvironment. In CARBO application, peroxynitrite andsuperoxide radicals; in CIS+ETOP application, exogenous NO; in CARBO+ETOPapplication both exogenous NO and superoxide increased the cellular death.Apoptotic cellular death in neuroblastoma cells during therapy process was increased 3,45times when ROS was dominant; 2,18 times when exogenous NO was dominant; and 2,74times when peroxynitrite was dominant in the microenvironment.These results support that therapy processes are affected by the type of free radical in themicroenvironment.KEY WORDSNeuroblastoma; tumor microenvironment; in vitro therapy model; ROS; RNS; apoptoticpathway2

Benzer Tezler

  1. Tez No

    124393

    Capsaici'nin in vitro ortamda erişkin sıçan spermatogenik hücre hatlarında proliferasyona ve bu süreçte gözlenen apoptozise etkileri

    The effect of capsaicin on proliferation and apoptosis of rat spermatogenic cell lines in vitro

    Ş. CANAN MIZRAK

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2003

    Veteriner HekimliğiUludağ Üniversitesi

    Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HATİCE ERDOST

    DOÇ. DR. SEMİHA NOYAN

  2. Tez No

    118737

    Büyüme faktörüyle uyarılmış kordon kanı mononükleer hücrelerinin in vitro kültürlerde proliferasyonu ve immünfenotipik özelliklerinin incelenmesi

    Evaluation of immunophenotypic characteristics and proliferation of in vitro cultures of cord blood mononuclear cells stimulated with growth factors

    FARUK SÜZERGÖZ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2002

    Allerji ve İmmünolojiİstanbul Üniversitesi

    İmmünoloji Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. SERAP ERDEM KURUCA

  3. Tez No

    872121

    Sıçan izole torasik aortunda perivasküler adipoz doku fonksiyonundaki yaşa bağlı değişimin In Vitro ve In vivo çalışmalarla değerlendirilmesi

    Evaluation of age-related changes in perivascular adipose tissue function in rat isolated thoracic aorta through In Vitro and In Vivo studies

    GAYE ÖZTÜRK

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    Eczacılık ve FarmakolojiHacettepe Üniversitesi

    Farmakoloji Ana Bilim Dalı

    DR. ÖĞR. ÜYESİ MELİKE HACER ÖZKAN

  4. Tez No

    288425

    Adipoz kökenli erişkin kök hücrelerin radyoterapi uygulanmış deride primer yara iyileşmesi üzerindeki etkisi

    The effect of adipose derived adult stem cells in primary wound healing on irradiated skin

    KORAY URGU

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    Plastik ve Rekonstrüktif CerrahiDokuz Eylül Üniversitesi

    Plastik ve Rekonstrüktif Cerrahi Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. CAN KARACA

  5. Tez No

    762307

    Deneysel peritonit oluşturulmuş rat ileum ve kolonunda hidrojen sülfürün motilite üzerine etkisinin ve olası etki mekanizmalarının invitro araştırılması

    Invitro investigation of the effect of hydrogen sulphide on motility and potential mechanisms of action in experimental induced peritonitis in rat ileum and colon

    EVREN TUNCER

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2022

    Eczacılık ve FarmakolojiSivas Cumhuriyet Üniversitesi

    Tıbbi Farmakoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. ŞAHİN YILDIRIM

Geri Dön