Termofil moderately halofilik Bacillus sp. suşlarından amilaz enzimi üretimi ve endüstriyel kullanım olanaklarının araştırılması
Amylase enzyme production and investigation of possibilities in industrial usage from thermophile moderately halophilic Bacillus sp
- Tez No: 200324
- Danışmanlar: PROF.DR. BURHAN ARIKAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2007
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Çukurova Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 109
Özet
Bu çalışmada Bacillus sp. suşlarından haloalkalofilik, termofil ve termostabil amilaz enzimi izolasyonu ve karakterizasyonu gerçekleştirilmiştir. Bu amaçla katı besiyerinde bakterinin üreme ve enzim sentezleme sıcaklık ve pH aralığı saptanmıştır. Amilaz enzimi ile optimum aktivite sıcaklığı, optimum pH, termal stabilite, pH stabilitesi, NaCl'n aktiviteye etkisi, farklı inhibitör, şelatör, metal iyonları ve deterjanların etkisi ve SDS-PAGE analizleri yapılmıştır. SDS-PAGE analizlerine göre 116.000 ve 97400 Da'luk iki bağımsız band ortaya çıkmıştır. Bakteriler 20-60?C aralığında üreme gösterirken enzim sentezi 20-55?C aralığında gerçekleşmiştir. Bununla birlikte en yüksek üreme ve enzim sentezi ortalama %84 ile 25-55?C aralığında elde edilmiştir. İzole edilen bakteriler pH 7.0-12.5 aralığında üreme ve enzim sentezi gerçekleştirirken optimum üreme ve sentez pH 8.5 ve 55?C de elde edilmiştir. SB-28 suşu pH 9.5 ve 55?C de en yüksek enzim sentezini gerçekleştirmiştir. SB-28 amilaz enziminin optimum aktivitesini pH 12.5 ve 140?C de göstermiştir. Enzim pH 9.0-12.0 aralığında 72 saat sonunda %54 koruduğu bulunmuştur. Enzim 120 dakika ön inkübasyondan sonra 140?C de inaktive olma yerine %408 oranında aktivite göstermiştir. SB- 28 amilaz enzimi faklı NaCL konsantrasyonlarında 55?C de 60 dakika sonunda en yükse aktivitesini %89 ile %10 konsantrasyonda göstermiştir. SB-28 amilaz enzimi EDTA da %65.42, CaCL2 de %70.20, PMSF de %74.23, ß-merkaptoethanol de %81.0, SDS de %71.0, Triton X-100 de %82.03, Na-sülfide de %80.0, NaCL de %74.20, ZnCL2 de %68.10, 1,10- phenantroline de %65.40 ve Üre de %11.20 direnç göstermiştir. İzole edilen verilere göre enzim deterjanlara dirençli, halofil, ekstrem alkalofil, pH stabil, ultratermofil, indüklenebilir termostabil özellik göstermektedir. Enzim özelikle nişastanın sıvılaştırılması ve tekstil endüstrisinde öncelikli kulanım alanı bulacaktır.
Özet (Çeviri)
In this study, haloalkalophile, thermophile and thermostable amylase enzyme from Bacillus sp strains was isolated and characterised. Therefore the temperature and pH range was determined for enzyme production and bacterial growth on solid media. Optimum activity temperature, optimum pH, thermal stability, pH stability of the isolated amylase as well as effect of NaCl, some inhibitors, chelators, metal ions and detergents on enzyme activity were determined. SDS-PAGE analyses were also carried out. Analyses of the enzyme by SDSPAGE revealed two independent bands (116.000 and 97400 Da.). While the bacteria grow at between 20-60OC, the enzyme production was occurred between 20-55oC. But the highest growth rate and enzyme production were obtained 25-55oC with an average %84. As isolated strains showed growth and enzyme synthesis at pH 7.0-12.5 range, optimum growth and enzyme production occurred at pH 8.5 and 55oC. Among the strains, SB-28 showed the maximum enzyme synthesis at pH 9.5 and 55oC. Optimum activity of the SB-28 amylase was at pH12.5 and 140oC. The enzyme was retained it`s activity around %54 at the end of 72 hours between pH 9.0 and 12.0. The enzyme after 120 min preincubation at 140oC was not inactivated, instead activated to be around 408%. On the other hand, the enzyme showed the maximum activity, 89%, on 10% NaCl concentration after 60 min incubation at 55oC. Additionally, SB-28 retained it`s activity in the presence of EDTA, CaCl2, PMSF, 2-Mercaptoetanol, SDS, Triton-X, Na-Sulfite, NaCl, ZnCl2, 1-10Phenantroline and the urea at the rate of 65.42%, 70.20%, 74.23%, 81.0%,71.0%, 82.03%,80.0%,74.20%, 68.10%,65.40% and11.20% respectively. According to these results, the isolated enzyme is resistand to detergents, and halophile, extreme alkalophile, pH stable, ultrathermophile, and inducible thermostable. As a result this SB- 28 amylase enzyme could find an important place for the usage in textile and starch liquefaction industries.
Benzer Tezler
- Yozgat Eosen yaşlı denizel tortulların paleoiklimsel değerlendirmeleri
Palaeoclimatic evolution of the Eocene marine sediments in Yozgat
EMEK AŞKIN ŞAYİR
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
Deniz BilimleriDokuz Eylül ÜniversitesiDeniz Bilimleri ve Teknolojisi Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MİNE SEZGÜL KAYSERİ ÖZER
- Sıcak su kaynaklarından bakteri izolasyonu, tanımlanması ve Alicyclobacillus acidocaldarius subsp. Rittmanii'nin b-galaktozidaz enziminin saflaştırılması
Identification, isolation of bacteria from the hot spring and the purification of ß-galactosidase in Alicyclobacillus acidocaldarius subspecies Rittmanii
REYHAN GÜL GÜVEN
- Bazı jeotermal kaynaklardan termofilik bakterilerin izolasyonu ve endüstriyel öneme sahip enzimlerin belirlenmesi
Isolation of thermophilic bacteria and determination of their industrially important enzymes from some geothermal sources in Turkey
HATİCE AKDAŞ
Doktora
Türkçe
2012
BiyolojiSüleyman Demirel ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AYNUR GÜL KARAHAN
PROF. DR. MUHSİN KONUK
- Molecular cloning, overexpression and characterization of thermostable esterase and lipase from Thermophilic bacillus sp.
Termal kararlı esteraz ve lipaz enzimlerinin Termofilik bacillus sp.'den moleküler klonlanması, ifadelenmesi ve karakterizasyonu
HASAN CİHAD TEKEDAR
Yüksek Lisans
İngilizce
2009
Biyomühendislikİzmir Yüksek Teknoloji EnstitüsüBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. ALPER ARSLANOĞLU
YRD. DOÇ. GÜLŞAH ŞANLI
- Termofil Bacillus sp.'den alkalin, termofilik, oksidant dirençli selülaz üretimi ve karakterizasyonu
Production and characterzation of alkaline, thermophilic, highly thermostabil and oxsidant resistant cellulase from a thermophilic Bacillus sp.
YASEMİN CAF
Yüksek Lisans
Türkçe
2012
BiyoteknolojiÇukurova ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. BURHAN ARIKAN