Geri Dön

Aktivasyon temeline dayalı amperometrik biyosensör sistemleri geliştirilmesi ve uygulamaları

Developing activation based amperometric biosensor systems and applications

PDF İndir

  1. Tez No: 202083
  2. Yazar: PINAR AKBAYIRLI
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. EROL AKYILMAZ
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Aktivasyon temelli biyosensör, katalaz, askorbat oksidaz, glukoz, bakır, Activation based biosensor, catalase, ascorbate oxidase, glucose, copper
  7. Yıl: 2007
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Ege Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 98

Özet

Bu tezde, aktivasyon temeline dayalı olarak glukoz tayini için katalaz ve bakır tayini içinde askorbat oksidaz temelli biyosensörler geli?tirildi. Her iki biyosensör için belirtilen enzimler immobilizasyon materyali olarak jelatin ile karı?tırılarak elde edilen enzim-jelatin karı?ımları çözünmü? oksijen probu üzerine yayıldı ve glutaraldehit ile çapraz bağlandı. Ölçümlerin temel prensibi enzimatik reaksiyonlar uyarınca aktivatör etkisi gösteren glukoz ve bakır konsantrasyonlarıyla orantılı olarak tüketilen oksijen miktarının farklanmasının belirlenmesidir. Bu prensipten yola çıkarak tüketilen oksijen miktarındaki artı?ın glukoz ve bakır konsantrasyonlarıyla doğru olarak deği?tiği standart grafikler yardımıyla sonuçlara ula?ılmı?tır. Hazırlanan biyosensörler için öncelikle biyoaktif tabaka bile?enlerinin optimizasyonları gerçekle?tirildi. Optimizasyon çalı?maları sonucunda katalaz biyosensörü için en uygun enzim miktarı, jelatin miktarı ve glutaraldehit yüzdesi sırasıyla; 662 U/cm2, 5,9 mg jelatin/cm2 ve %2,5, askorbat oksidaz biyosensörü için ise sırasıyla; ; 6,7 mg/cm2 homojenat, 5,9 mg jelatin/cm2 ve %2,5 olduğu saptandı. Çalı?ma ko?ullarının optimizasyonu denemeleri sonucunda katalaz biyosensörü için çalı?ma tamponunun pH:7,0, 50mM?lık fosfat tamponu olmasına ve ölçümlerin 35oC sıcaklıkta gerçekle?tirilmesine, askorbat oksidaz biyosensörü için ise çalı?ma tamponunun pH: 7,5, 50mM Tris-HCl tamponu olmasına ve ölçümlerin 35oC sıcaklıkta gerçekle?mesine karar verildi. Hazırlanan biyosensörlerin karakterizasyon çalı?malarında, katalaz biyosensörü ile glukoz için 0,5-5,0 ?M konsantrasyon aralığında, askorbat oksidaz biyosensörü ile bakır için yine 1,0-5,0 ?M konsantrasyon aralığında doğrusal sonuçlar alınabildiği belirlendi. Geli?tirilen biyosensörlerin tekrarlanabilirliğine yönelik yapılan çalı?malarda; katalaz biyosensörü için 3 ?M glukoz standardı ve 1mM H2O2 varlığında (n=8) ile ortalama değer X=3.05 ? M, standart sapma, S.S = ? 0.08 ve varyasyon katsayısı V.K = % 2,64, askorbat oksidaz biyosensörü için ise 2,5 ?M bakır standardı ve 15 ?M L-askorbik asit standardı (n=8) ile ortalama değer X=2.44 M, standart sapma, S.S= 0.018 ve varyasyon katsayısı, V.K= %0.72 olarak bulundu. Ayrıca biyosensörlerin operasyonel kararlılıkları, depo kararlılıkları , bazı maddelerin aktivasyon etkileri gibi parametreleri belirlendi. Farklı kan örneklerinde glukoz, farklı ilaç örneklerinde ise bakır tayinleri ve analitik parametreler belirlendi.

Özet (Çeviri)

In this thesis, activation based amperometric biosensor systems were developed. Catalase based biosensor for glucose determination and ascorbate oxidase based biosensor for copper determination were prepared. In order to prepare biosensors, enzymes mixed with immobilization material gelatin and the crosslinked with glutaraldehyde after fixed on pretreated teflon membrane. The principle of the measurements based on the determination of the differences at consumed oxygen levels related to concentration of glucose and copper ions that activated the enzymes. Determinations were carried out by standart curves which were obtained by the measurements of increase in the consumed oxygen level related to glucose and copper concentration. Firstly, the optimum concentration of the bioactive layer components were established for both biosensors. In the optimization studies the most suitable enzyme, gelatine amounts and glutaraldehyde ratio were determined as 662 U/cm2, 5.9 mg gelatin/cm2 and 2.5 %, for catalase biosensor and 6,7 mg/cm2 homogenat, 5.9 mg gelatin/cm2 and 2.5 % for ascorbate oxidase biosensor respectively. For catalase biosensor pH:7.0, 50mM phosphate buffer and 35oC, for ascorbate oxidase biosensor pH: 7.5, 50mM Tris-HCl buffer and 35oC were established as providing the optimum working conditions. In the characterization studies, a linearity in the glucose concenration range 0.5-5.0 ?M was obtained with catalase biosensor and a linearity in the copper concentraion range 1.0-5.0 ?M was obtained with ascorbate oxidase biosensor. The repeatability studies (n=8) revealed that for 3 ?M glucose and 1mM H2O2, the avarege value ( x ) was 3.05 ? M, standart deviation (SD) was ? 0.08 and variation coefficient (CV) was 2.64 % for catalase biosensor and the repeatability studies (n=8) revealed that for 2.5 M copper and 15 M L-ascorbic acid , the avarege value ( x ) was 2.44 M, standart deviation (SD) was 0.018 and variation coefficient (CV) was 0.72 % for ascorbate oxidase biosensor. Besides, operational and storage stability of both biosensors were investigated. In addition, glucose concentration of different blood samples, copper concentration of different medicine samples and analytical parameters were determined.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    758331

    The effect of BFPP mutations on trafficking, signaling and function of ADGRG1/GPR56 receptor

    BFPP mutasyonlarının ADGRG1/GPR56 reseptörünün trafiği, sinyalizasyonu ve işlevi üzerindeki etkisi

    NİL DEMİR

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ÇAĞDAŞ DEVRİM SON

    DR. ORKUN CEVHEROĞLU

  2. Tez No

    725147

    Moderating role of the dark triad personality traits on the association between emotional labor and work outcomes: An examination based on activation/inhibition pathways

    Karanlık üçlü kişilik özelliklerinin duygusal emek ile iş çıktıları arasındaki ilişki üzerindeki moderatör rolü: Aktivasyon/engelleme yollarına dayalı bir inceleme

    AYSU ÇETİNBİNİCİ

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    PsikolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Psikoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. YONCA TOKER GÜLTAŞ

  3. Tez No

    200864

    Katı oksit yakıt hücreli enerji üretim sistemlerinin alternatif kriterlere göre performans analizi

    Performance analysis of solid oxide fuel cell based energy generation systems with alternative criteria

    ALİ VOLKAN AKKAYA

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2007

    Makine MühendisliğiYıldız Teknik Üniversitesi

    Makine Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. BAHRİ ŞAHİN

  4. Tez No

    517625

    Cross-dataset person re-identification

    Çapraz veri küme kişiyi yeniden tanıma

    ANIL GENÇ

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2018

    Bilgisayar Mühendisliği Bilimleri-Bilgisayar ve Kontrolİstanbul Teknik Üniversitesi

    Bilgisayar Mühendisliği Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. HAZIM KEMAL EKENEL

  5. Tez No

    827860

    Derin öğrenme ve büyük veri analitiği yöntemleriKullanarak Covid-19 yayılımının ileriye dönük tahmini

    Forecasting the spread of covid-19 using deep learning and big data analytics methods

    CYLAS KIGANDA

    Yüksek Lisans

    İngilizce

    İngilizce

    2023

    Bilgisayar Mühendisliği Bilimleri-Bilgisayar ve KontrolGazi Üniversitesi

    Bilgisayar Bilimleri Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MUHAMMET ALİ AKCAYOL

Geri Dön