The effect of BFPP mutations on trafficking, signaling and function of ADGRG1/GPR56 receptor
BFPP mutasyonlarının ADGRG1/GPR56 reseptörünün trafiği, sinyalizasyonu ve işlevi üzerindeki etkisi
- Tez No: 758331
- Danışmanlar: DOÇ. DR. ÇAĞDAŞ DEVRİM SON, DR. ORKUN CEVHEROĞLU
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2022
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Orta Doğu Teknik Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 79
Özet
İki Taraflı Frontoparietal Polimikrojiri, beyin korteks yüzeyinde normalden daha küçük (mikro) ve çok sayıda (poli-) girus ve sulkus şeklinde kusurlarla karakterize kalıtsal bir beyin anormalliğidir. ADGRG1/GPR56 genindeki 20'den fazla mutasyonun, Türk hastalar da dahil olmak üzere çeşitli klinik araştırmalarda BFPP geliştirdiği gösterilmiştir. ADGRG1/GPR56 reseptörü adezyon G proteinine kenetli reseptör ailesinin (aGPCR) bir üyesidir. Bu mutasyonların bazılarının reseptörün hücre yüzeyi ekspresyonunu azalttığı bulunmuş olsa da, ADGRG1/GPR56 fonksiyonunu etkileyen BFPP mutasyonlarının yapısal özellikleri ve moleküler mekanizmaları henüz bilinmemektedir. Çalışmanın amacı (i) BFPP mutasyonları taşıyan ADGRG1/GPR56 reseptörlerinin hücre yüzeyi ekspresyon profilini lazer taramalı konfokal mikroskop ile (ii) mutant reseptörler ile Gα12 arasındaki ve (iii) mutant reseptörler ile β-arrestin proteini arasındaki etkileşimleri Biyolüminesans Rezonans Enerji Transferi (BRET) temeline dayalı biyosensörler yolu ile canlı hücrelerde araştırmaktır. Bu bağlamda, sekiz farklı yanlış anlamlı mutasyon, bölgeye yönelik mutajenez yöntemi ile ADGRG1/GPR56 reseptörü üzerinde oluşturulmuştur. Sonuçlar mutant reseptörlerin doğal fenotip ile karşılaştırıldığında, reseptörün hücre yüzeyi ekspresyonunu azalttığını göstermektedir. Gβ/ɣ ve GRK temelli BRET biyosensörleri, reseptörün Gα12 ile eşleşmesini araştırmak için kullanılmıştır. Sonuçlar C346S, W349S ve L640R mutasyonlarının, doğal fenotip ile karşılaştırıldığında, reseptörün Gα12 ile etkileşimini azalttığını göstermektedir. Arrestin temelli BRET biyosensörleri ise, reseptör aktivasyonu neticesinde beta-arrestin molekülünün hücre zarındaki birikimini araştırmak için kullanılmıştır. Sonuçlar, tüm BFPP mutantlarının, doğal fenotip reseptör ile karşılaştırıldığında beta-arrestin molekülünün hücre zarında birikimini azalttığını göstermektedir.
Özet (Çeviri)
Bilateral frontoparietal polymicrogyria (BFPP) is a hereditary brain abnormality characterized by defects on the brain cortex surface in the form of smaller (micro-) and multiplexed (poly-) gyri and sulci. More than 20 mutations in the ADGRG1/GPR56 gene have contributed to BFPP in various clinical studies, including in Turkish patients. ADGRG1/GPR56 receptor belongs to the adhesion G protein-coupled receptor family (aGPCR). Even though some of these mutations were found to reduce cell surface expression of the receptor, structural properties and molecular mechanisms of BFPP mutations that affect ADGRG1/GPR56 function are yet unknown. The study aims to (i) visualize the cell surface expression of tagged ADGRG1/GPR56 receptors carrying BFPP mutations using a laser scanning confocal microscope, (ii) investigate the effects of BFPP mutations on the receptor and Gα12 interactions, and (iii) investigate the effects of BFPP mutations on the receptor and β-arrestin interactions using Bioluminescence Resonance Energy Transfer (BRET) biosensors in live cells. Herein, eight missense BFPP mutations were introduced on ADGRG1/GPR56 receptor by using site-directed mutagenesis. The results showed mutant receptors had decreased cell surface expression compared to the wild-type. Gβ/ɣ and GRK, based BRET biosensors were used to investigate the coupling of ADGRG1/GPR56 with Gα12. C346S, W349S, and L640R mutations decreased the interaction of the receptor with Gα12 with respect to the wild-type. Arrestin-based BRET biosensor was used to investigate β-arrestin recruitment following receptor activation. All mutations tested in this study showed decreased beta-arrestin recruitment to the plasma membrane compared to the wild-type.
Benzer Tezler
- Musca Domestica'nın farklı jenerasyonlarına Azamethiphos'un etkisi
The Effect of Azamethiphos on different generations of Musca Domestica
MEHMET DİNLER
Yüksek Lisans
Türkçe
1998
MikrobiyolojiAnkara ÜniversitesiParazitoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ZAFER KARAER
- Genotip, cinsiyet ve çevre sıcaklığının tavşanlarda yaşama gücü, büyüme, hematolojik değişiklikler ve bazı fizyolojik parametrelere etkileri
The Effect of genotype, sex, environmental temparature on livability, growth and some physiological traits in laboratory rabbits
Ş. NESRİN ONGUN
- Konsantre yem ağırlıklı beslenen besi sığırlarında değişik düzeylerde verilen sodyum bikarbonatın besi performansı ve bazı rumen sıvısı metabolitlerine etkisi
The Effect of different amount of sodium bicarbonate in rations on fattening performance and some ruminal parameters of beef cattle fed high level of concentrate
ZÜHTÜ AYNAGÖZ
Doktora
Türkçe
1997
Veteriner HekimliğiAnkara ÜniversitesiHayvan Besleme ve Beslenme Hastalıkları Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ŞAKİR DOĞAN TUNCER
- Kuzu konsantre yemlerine farklı oranlarda katılan adi fiğin (Vicia sativa L.) besi performansı, sindirilme derecesi ile bazı kan ve rumen sıvısı metabolitleri üzerine etkisi
The Effect of the rations containing different amounts of common vetch seed (Vicia sativa L.) on growth performance, digestibility and some blood and rumen metabolites on male lambs
İSMAİL KAYA
Doktora
Türkçe
1997
Veteriner HekimliğiAnkara ÜniversitesiHayvan Besleme ve Beslenme Hastalıkları Ana Bilim Dalı
DOÇ.DR. SAKİNE YALÇIN
- Halotan anestezisinin plazma lipid peroksidasyonu üzerine etkisi
The Effect of halothane anaesthesia on plasma lipid peroxidation
PINAR YILMAZ