Piruvatkinazın plasentadan kısmi saflaştırılması ve kinetik özellikleri
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 22373
- Danışmanlar: DOÇ. DR. BOLKAN ŞİMŞEK
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 1992
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Gazi Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 92
Özet
-62- 6. ÖZET însan plasentasında iki tip piruvat kinaz (E.C.2.7.1.40) bulunduğu ve bunlardan L (veya R) tipinin alyuvar kaynaklı, diğerinin ise plasental kaynaklı olduğu gözlendi. Plasental piruvat kinaz asit kesitlemesi, Sephadex G25 jel eleme ve S-Sepharose iyon değiştirme kromotografisi kullanılarak % 60 verim ve 62 ünite/miligram'lık özgül etkinlikle saflaştınldı. Elde edilen enzim % 50 gliserol (v/v) 5mM 12.5 mM Tris/HCl, pH 7.4 tamponunda -10°C de saklandığında aktivi- te kaybına uğramadığı bulundu. İndirgenmemiş plasental piruvat kinaz değişken substrat olarak PEP ve ADP kullanıldığında Lineweaver-Burk grafiğinde, 1 mM FDP varlığında ve yokluğunda, aşağı kıvrılma gözlendi. Aym en zim eğer -10°C de 282 mM 2-ME ile 4 saat veya 0.5 mM DTT ile 30 dakika inkübe edilecek olursa Lineweaver-Burk grafiğinin Linear hale geldiği gözlendi. İndirgenmiş plasental piruvat kinazın FDP varlığında ve yokluğunda PEP için Km değerleri 0.33-0.50 mM olarak bulundu. İndirgenmiş plasental piruvat kinazın ADP için Km'ini FDP'nin değiş tirmediği (Km= 0.5 mM) gözlendi.
Özet (Çeviri)
-63- 7. SUMMARY It was observed that there are two types of pyruvate kinase (E.C.2.7.1.40) in human placenta : one of them was the L- (or R) type deriving from erythrocytes the other was the placental type. Placental type pyruvate kinase was purified using acid fractionation, Sephadex G25 gel filtration and S-Sepharose ion exchange chromatography. The yield and the specific activity of the partially purified pyruvate kinase was 60 percent and 62 units per miligram protein, respectively. The purified enzyme was stable when stored at -10°C in 12.5 mM Tris/HCl, pH 7.4 containing 5 mM MgCL2, 0.5 mM EDTA, 5 mM 2-ME, 50 mM (NH4)2S04 and 50 percent glycerol (v/v). The unreduced placental kinase showed downward curvature in Lineweaver-Burk plots for PEP and ADP as the variable substrate in the presence and absence of fructose- 1,6-diphosphate (FDP= 1 mM). When the enzyme incubated with 282 mM 2-ME (at -10°C for 4 hours) of with 0.5 mM DTT (at 37°C for 30 min) the Lineweaver-Burk plots for PEP and ADP as the variable substrate became linear in the presence and absence of FDP (1 mM). When the enzyme reduced as above, the Km values of 0.33 and 0.50 mM for PEP in the presence and absence of FDP, were obtained. The Km of the unreduced placental pyruvate kinase for ADP was not affected by FDP (Km = 0.5 mM for ADP).
Benzer Tezler
- Investigation of allosteric inhibition effect in pyruvate kinase by constrained molecular dynamics simulation method
Piruvat kinazın allosterik olarak inhibe edilmesinin kısıtlanmış moleküler dinamik similasyon methodu kullanılarak incelenmesi
REYHAN AKKAYA
Yüksek Lisans
İngilizce
2021
BiyokimyaKadir Has ÜniversitesiHesaplamalı Biyoloji ve Biyoinformatik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EBRU DEMET AKDOĞAN
- Meme kanserli hastalarda tümör M2-piruvat kinaz enziminin karakterizasyonu
Chracterization of tumor M2-pk (pyruvati kinase) enzyme in breast carcinoma
ERKAN GÖRÜR
- Gonadotropin stimülasyonundan sonra aspire edilen ovulasyon öncesi oositlerin yardımcı üreme yöntemleriyle döllenebilme özelliklerinin olgunlaşma (Maturite) evreleri yönünden ışık ve elektron mikroskop düzeylerinde incelenmesi
Light and ultrastructurel investigation of aspirated preovulatuar oocytes stimulated by gonadotropins from point of fertilizability as to the maturity stages, using assisted reproduction techniques
MEHMET CINCIK
Doktora
Türkçe
1997
MorfolojiHacettepe ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AYSEL ŞEFTALİOĞLU
- N-nitrozodietilamin ve kararlı metaboliti olan asetaldehit'in piruvat kinaz ve glukoz -6-fosfat dehidiogenaz enzimleriyle in vitro etkileşimi
The In vitro interaction between N-nitrosodiethylamin and its stable metabolite acetaldhyde and pyruvate kinase and glucose -6-phosphate dehydrogenase enzymes
SEVTAP BAKIR
- Photobromination of (+)-camphene and efficient synthesis of novel camphene based compounds through suitable reactions
(+)-kamfenin fotobrominasyonu ve uygun reaksiyonlar yoluyla yeni kamfen temelli bileşiklerin etkili sentezi
MD ZAHIDUL ISLAM