Paraoksonaz enziminin saflaştırılarak grelin hormonuna karşı kinetiğinin araştırılması
Pruifiying enzym paraoxonase and investigating its kinetic against ghrelin hormone
- Tez No: 246993
- Danışmanlar: PROF. DR. FİKRET KARATAŞ
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Paraoxonase I, purification, bovine liver, ghrelin, HPLC
- Yıl: 2009
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Fırat Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 83
Özet
Bu çalışmada, metabolizma için büyük öneme sahip olan Paraoksonaz 1 (E.C. 3.1.1.2. ve E.C. 3.1.8.1.) enzimi, sığır karaciğerinden saflaştırılmaya çalışılmıştır. Bu amaçla homojenizasyon, ultrasantrifüj, % amonyum sülfat çöktürmesi, DEAE-Sefaroz iyon değişim kromatografisi ve Sefadeks G-200 jel filtrasyonu kromatografisi sırasıyla uygulanmıştır. Bu işlemler sonucunda Paraoksonaz 1 enzimi 23,93 U/mg protein spesifik aktivite ile homojenata göre 26,30 kat saflaştırılmıştır. Saflaştırılan Paraoksonaz 1 enziminin molekül ağırlığı SDS-PAGE ile 45,2 kDa olarak hesaplanmıştır. Paraoksonaz 1 enziminin pH:7,1 ve 37 0C'de optimum aktivite gösterdiği saptanmıştır. Substrat olarak fenil asetat kullanıldığında Km değeri 0,074 + 0,002 mM ve Vmax değeri 36,42 U/mg olarak hesaplanmıştır. Paraoksonaz 1 enziminin aktif grelin hormonuna etki ettiği ve aktif grelin hormonunu 20 dakika sonunda % 61,20 oranında inaktif greline dönüştürdüğü bulunmuştur.Anahtar Kelimeler : Paraoksonaz 1, saflaştırma, sığır karaciğeri, grelin, HPLC
Özet (Çeviri)
In this study, enzyme paraoxonase I (E.C. 3.1.1.2. and E.C. 3.1.8.1.) that has major importance for metabolism is tried to be purified from bovine liver. For this purpose homogenization, ultracentrifugation, fractionation with ammonium sulphate precipitation, DEAE-Sepharose ion exchanger chromatography and Sephadex G-200 gel filtration chromatography was applied respectively. In the end of this process Paraoxonase 1 enzyme 23,93 U/mg protein specific activity has been 26,30 fold purified than the homogenate. Molecule weight of Paraoxonase 1 enzyme is measured as 45.2 kDa by SDS-PAGE. Optimum activity of Paraoxonase 1 enzyme has been observed at pH:7.1 and 37 0C. Phenyl acetate used as substrat, Km value was 0,074 + 0,002 mM and Vmax value was 36,42 U/mg. It is observed Paraoxonase 1 enzyme effects to ghrelin hormone and turns 61.20% of active ghrelin hormone to inactive ghrelin hormone in after 20 minutes.
Benzer Tezler
- Tavşan karaciğer paraoksonaz enziminin saflaştırılarak kinetik özellikleri, endojen substratları ve antioksidan özelliklerinin araştırılması.
Purification of rabbit liver paraoxonase enzyme and investigation of its kinetic properties, endogenous substrates and antioxidant properties.
TÜLİN BAYRAK
- İnsan serum paraoksonaz enziminin saflaştırılarak kinetik özellikleri, endojen substratları ve antioksidan özelliklerinin araştırılması
Purification, determination of kinetic properties, physiological substrates and mechanism of antioxidant actions of human serum paraoxonase
AHMET BAYRAK
- Paraoksonaz (PON1) enziminin üç faz ayrımı (ÜFA) yöntemiyle saflaştırılması, karakterize edilmesi ve karadut (Moris nigra) ekstraktları immobilize edilmiş γ-Fe2O3 nanopartiküllerinin PON1, glioblastoma ve primer rat korteks sinir hücreleri üzerine etkilerinin araştırılması
Characterization and purification of paraoxonase (PON1) enzyme by TPP (Three phase partitioning) and investigation of effects of black mulberry (Moris nigra) extracts are immobilized of γ-Fe2O3 nanoparticles on PON1, glioblastoma and primary rat cortex nerve cells
SEMRA ÇİÇEK
Doktora
Türkçe
2016
BiyoteknolojiAtatürk ÜniversitesiTarımsal Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HAYRUNNİSA NADAROĞLU
- İnsan serum paraoksonaz enziminin kitosan üzerine immobilizasyonu ve karakterizasyonu
Immobilization of human serum paraoxonase on chitosan and characterization of immobilized paraoxonase
UTKU ÇOLAK
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
BiyokimyaBalıkesir ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. NAHİT GENÇER
- Paraoksonaz enziminin hidrofobik etkileşim tekniği ile saflaştırılması ve bazı bileşiklere karşı afinitesinin incelenmesi
Purification of paraoxonase enzyme by hydrophobic interaction technique and investigation of its affinity to certain compounds
HATİCE YÜKSEL
Doktora
Türkçe
2023
BiyokimyaBalıkesir ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. OKTAY ARSLAN
DOÇ. DR. ADEM ERGÜN