Paraoksonaz enziminin glutaraldehit ile immobilizasyonu ve bazı ağır metallere karşı afinitesinin araştırılması
Immobilization with glutaraldehyde of paraoxonase enzyme and investigation of some heavy metals effects onto the enzyme affinity
- Tez No: 245721
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. ÖZEN ÖZENSOY GÜLER
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2009
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Balıkesir Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 80
Özet
Bu çalışmada, ilk olarak sığır serum PON1 enzimini saflaştırmak amacıyla Sepharose 4B L-tirozin 1-naftilamin kimyasal yapısındaki hidrofobik etkileşim kromatografi jeli kullanılmış ve PON1 enzimi saflaştırılmıştır. SDS-PAGE ile serbest enzim için saflık kontrolü yapılmıştır.İkinci aşamada, enzim farklı glutaraldehit yüzdelerinde immobilize edilmiş ve enzim aktivitesi en fazla % 7 glutaraldehit oranında immobilize edilen enzimde gözlenmiştir. Dolayısıyla deneysel çalışmamızın bundan sonraki aşamalarında, % 7 glutaraldehit oranında immobilize edilen enzim dikkate alınmıştır. Buradan immobilize ve serbest enzim için enzim ünitesi ve substrat konsantrasyon değerleri hesaplanarak Km ve Vmax değerleri elde edilmiş ve serbest enzimin katalitik etkinliğinin immobilize enzime göre daha fazla olduğu gözlenmiştir.Son aşamada da Mn+2, Co+2, Cu+2 metallerinin (%7) immobilize ve serbest paraoksonaz enzimi üzerindeki inhibisyon etkileri çalışılmıştır. Cu+2 metalinin paraoksonaz enzim aktivitesi üzerindeki etkisine bakıldığında immobilize ve serbest enzimi inhibe ettiği gözlenirken, Mn+2 ve Co+2 metallerinin immobilize enzimi aktive ettiği, fakat serbest enzimi inhibe ettiği gözlenmiştir.ANAHTAR SÖZCÜKLER: Paraoksonaz, enzim immobilizasyonu, glutaraldehit, enzim inhibisyonu.
Özet (Çeviri)
In this research, paraoxonase 1 (PON1) was purificated from serum blood by using sepharose 4B L-tirozin 1-naftylamin hydrofobic interaction chromotography gel and purification of the enzyme was controlled by sodium dodecylsulfate polyacrylamide gel electrophoresis.Paraoxonase enzyme was immobilized at different ratios of glutaraldehyde and the maximum activity was observed at the ratio of % 7 immobilized enzyme. So this immobilized enzyme was investigated for other steps of our experiment. And for immobilized and free enzyme, enzyme units and substrate concentrations were calculated. Km and Vmax plots were determined and catalytic efficiency of free enzyme was bigger than immobilized enzyme.And finally, the effects of inhibition of Mn+2, Co+2, Cu+2 metals onto the immobilized and free enzyme activity were studied. When the effect of Cu+2 onto the immobilized and free enzyme were investigated, the inhibition of enzyme was observed. But on the other hand, the activation of immobilized enzyme was observed and inhibition of free enzyme was observed with Mn+2 and Co+2 metals.KEYWORDS: Paraoxonase, enzyme immobilization, glutaraldehyde, enzyme inhibition.
Benzer Tezler
- İnsan PON1 enziminin saflaştırılması, manyetik kitosan nanopartikülleri üzerine immobilize edilmesi, metal hibrit nano yapılarının hazırlanması ve bazı ilaçların enzim sistemleri üzerine etkilerinin in vitro olarak araştırılması
Purification of PON1 enzyme, immobilization of pon1 enzyme on magnetic chitosan nanoparticles, preparation of metal hybrid nano structures and investigation of effects of some drugs on enzyme systems as in vitro
FARZAD GHEBLEH
Doktora
Türkçe
2017
Mühendislik BilimleriAtatürk ÜniversitesiNanobilim ve Nanomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HAYRUNNİSA NADAROĞLU
- İnsan serum paraoksonaz enziminin kitosan üzerine immobilizasyonu ve karakterizasyonu
Immobilization of human serum paraoxonase on chitosan and characterization of immobilized paraoxonase
UTKU ÇOLAK
Yüksek Lisans
Türkçe
2011
BiyokimyaBalıkesir ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. NAHİT GENÇER
- Paraoksonaz enziminin hidrofobik etkileşim tekniği ile saflaştırılması ve bazı bileşiklere karşı afinitesinin incelenmesi
Purification of paraoxonase enzyme by hydrophobic interaction technique and investigation of its affinity to certain compounds
HATİCE YÜKSEL
Doktora
Türkçe
2023
BiyokimyaBalıkesir ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
PROF. DR. OKTAY ARSLAN
DOÇ. DR. ADEM ERGÜN
- Paraoksonaz enziminin saflaştırılarak grelin hormonuna karşı kinetiğinin araştırılması
Pruifiying enzym paraoxonase and investigating its kinetic against ghrelin hormone
UĞUR AŞKIN
- İnsan serumunda paraoksonaz enziminin saflaştırılması ve aktivitesinin araştırılması
Purification of human serum paraoxonase enzyme and investigation of activity
HALİL BADEM