Kolinesterazlarda yapı-katalitik etki ilişkisinin triarilmetan ve fenoksazin yapılı ligandlar aracılığıyla araştırılması
The study of structure-effect relations in cholinesterases by use of triarylmethane and phenoxazine dyes
- Tez No: 248228
- Danışmanlar: PROF. DR. NAZMİ ÖZER
- Tez Türü: Doktora
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2010
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 93
Özet
Triarilmetan (pararozanilin (PR), malakit yeşili (MG) ve metil yeşili (MeG)), fenoksazin (meldola mavisi (MB), nil mavisi (NB)) ve fenotiyazin (metilen mavisi (MetB)) yapılı bileşiklerin insan plazma bütirilkolinesterazın (BChE) ve yılanbalığı asetilkolinesteraz (eAChE) aktivitesi üzerindeki inhibitör etkileri, 25°C'de, 50 mM MOPS (pH 8), 0.125 mM 5, 5'-ditiyobis-(2-nitrobenzoik asit), 0.05-0.4 mM bütiriltiyokolin (BTC) ve asetiltiyokolin (ATC) ve 0-25 uM ligand içeren ortamda, spektrofotometrik olarak araştırıldı. MG ve PR, insan plazma bütirilkolinesterazı üzerinde lineer karışık tipte inhibitör etki gösterirken ( MG: Ki = 0.28 ± 0.037 uM, a = 23 ± 7.4 ; PR: Ki = 1.9 ± 0.23 uM, a = 13 ± 4.8) , MeG kompetitif tipte inhibisyona yol açtı (Ki = 0.12 ± 0.017 uM). MB, NB ve MetB ise, aynı enzim üzerinde nonlineer inhibisyona neden oldu ve çoklu bağlanma olduğu düşünüldü. Sırasıyla Ki değerleri MB, NB ve MetB için; 0.64 ± 0.05uM; 0.085 ± 0.026 uM; 0.42 ± 0.04 uM'dı. Çalışılan tüm ligandlar, karşılaştırma yapmak amacıyla yılanbalığı asetilkolinesterazı üzerinde denendi. Tüm bileşikler, mekanizma açısından benzerlik göstererek eAChE'ı lineer- veya düşük b değerli hiperbolik-karışık tipte inhibe ettiler. MG ve PR lineer inhibisyona yol açarken (MG: Ki = 1.9 ± 0.51 uM, a = 4.8 ± 1.8; PR: Ki = 8.4 ± 0.67 uM, a = 5.8 ± 2.0) ; hiperbolik karışık inhibisyona neden olan MeG, MB, NB ve MetB için inhibisyon parametreleri sırasıyla Ki = 0.27 ± 0.017 uM, a = 2.7 ± 0.32, b = ? 0.20 ± 0.011; Ki = 0.035 ± 0.010 uM,a= 1.9 ± 0.37, b = 0.28 ± 0.080; Ki = 0.026 ± 0.0034 uM, a = 2.4 ± 1.1, b = ? 0.18 ± 0.014'dü. Ligandların BchE ve eAChE'e olan farklı ilgileri ve inhibisyon mekanizmalarındaki değişikliğe enzimlerin aktif bölge oyuğu ve periferal anyonik bölgelerindeki (PAB) farklılıkların neden olduğu düşünüldü.
Özet (Çeviri)
The inhibitory effects of triarylmethane [pararosaniline (PR), malachite green (MG), methyl green (MeG)], phenoxazine [meldola blue (MB), nile blue (NB)] and phenothiazine [methylene blue (MetB) compounds on human plasma cholinesterase (BChE) and eel acetylcholinesterase (eAChE) were examined spectrophotometrically at 25°C in the assay mixture containing 50 mM MOPS buffer (pH 8), 0.125mM 5,5?-dithiobis(2-nitrobenzoic acid), 0.05-0.4mM butyryltiocholine (BTC) and asetylthiocholine (ATC) and 0-25 µM ligand. MG and PR caused linear mixed type inhibition on human plasma cholinesterase ( MG: Ki = 0.28 ± 0.037 uM, a = 23 ± 7.4 ; PR: Ki = 1.9 ± 0.23 uM, a = 13 ± 4.8) , while MeG resulted in competitive inhibition (Ki = 0.12 ± 0.017 uM). MG, NB and MetB caused nonlinear inhibition suggesting cooperative binding at two sites. Ki values for MG, NB and MetB were 0.64 ± 0.05 uM; 0.085 ± 0.026 uM; 0.42 ± 0.04 uM respectively. Ligands were also tested on eel acetylcholinesterase for comparison. All compounds showed linear or low b ? valued hyperbolic mixed type inhibition an eAChE with similar mechanisms. MG and PR caused linear mixed type inhibition (MG: Ki = 1.9 ± 0.51 uM, a = 4.8 ± 1.8; PR: Ki = 8.4 ± 0.67 uM, a = 5.8 ± 2.0) ; while MeG, MB, NB and MetB acted as hyperbolic mixed type inhibitors with parameters Ki = 0.27 ± 0.017 uM, a = 2.7 ± 0.32, b = ? 0.20 ± 0.011; Ki = 0.035 ± 0.010 uM, a = 1.9 ± 0.37, b = 0.28 ± 0.080; Ki = 0.026 ± 0.0034 uM, a =1.8 ± 0.21, b = 0.15 ± 0.006 ve Ki = 0.017 ± 0.0063 uM, a = 2.4 ± 1.1, b = ? 0.18 ± 0.014 respectively. Variety in inhibition mechanisms and affinities of the ligands to BChE and eAChE were thought to be originate from the differences at the active site gorge and peripheral anionic site (PAB) of the enzymes.
Benzer Tezler
- İnsan serum bütirilkolinesterazı ve eritrosit asetilkolinesterazının statin türevleri ile etkileşiminin incelenmesi
Effects of statins on human serum butyrylcholinesterase and erythrocyte acetylcholinesterase
MELTEM ATAY
- Selective and sensitive determination of real-time Butyrylcholinesterase activity via Phenoxy 1,2-dioxetane-based chemiluminescent probe
Fenoksi 1,2-dioksetan temelli kemilüminesan ajan kullanımıyla gerçek zamanlı Butirilkolinesteraz aktivitesinin seçici ve hassas tayini
ALPEREN ACARI
Yüksek Lisans
İngilizce
2023
BiyolojiKoç ÜniversitesiSağlık Bilimleri Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ SAFACAN KÖLEMEN
- İnsan serum bütirilkolinesterazının olası lipolitik aktivitesi-lipid metabolizması ile ilişkisi
Potential lipolytic activity of human serum butyrylcholinesterase-its function in lipid metabolism
MÜSLÜM GÖK
- Kolinesterazların plazma, eritrosit, amnion sıvısında incelenmesi ve nöral tüp defektlerine uygulanması
Determination of cholinesterases in plasma erythrocytes amniotic fluid and application of these enzymes in to neural tube defects
SAFİYE TAĞA İBİLİOĞLU
- Triarilmetan ve fenoksazin yapılı boyaların plazma kolinesterazına etkisi
The effect of triarylmethane and phenoxazine dyes on human plasma cholinesterase
TUBA TÜYLÜ KÜÇÜKKILINÇ
