Geri Dön

İskemi ve reperfüzyon sonrasi erken dönemde kan beyin bariyerinin zedelenmesinde nitratif ve oksidatif mekanizmalarin farede kranial pencere ve izole retina modellerinde incelenmesi

Effects of nitrative/oxidative stress mechanisms on early blood brain barrier injury after ischemia/ reperfusion studied by cranial window and isolated retina models

  1. Tez No: 248255
  2. Yazar: ATAY VURAL
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. YASEMİN GÜRSOY ÖZDEMİR
  4. Tez Türü: Doktora
  5. Konular: Nöroloji, Neurology
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2010
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Hacettepe Üniversitesi
  10. Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Temel Nörolojik Bilimler Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Temel Nörolojik Bilimler Bilim Dalı
  13. Sayfa Sayısı: 99

Özet

İskemi/reperfüzyon sırasında, nörovasküler ünitede meydana gelen değişiklikler mikrosirkülasyonun bozulmasına ve enfarkt alanının penumbraya doğru genişlemesine sebep olmaktadır. Trombolitik ve nöroprotektif ajanlar bu durumu düzeltmekte yetersiz kalmaktadır. Önceki çalışmalarda ex vivo histolojik yöntemlerle iskemi/reperfüzyon sonrası mikrodamarlarda boğumlanmalar oluştuğu ve boğumlanmaların arasında eritrositlerin hapsolduğu gösterilmiş, peroksinitritin (oksidatif ve nitratif strese yol açan bir radikal) bu boğumlanmaların oluşumunda rolü olduğu saptanmış ve bu boğumlanmaların perisitlerin kasılmasına bağlı olabileceği önerilmişti. Bu tez çalışmasında ilk olarak önceki bulguların in situ test edilmesi amacıyla iskemi sırasında ve sonrasında mikrodolaşımda meydana gelen değişikliklerin ve ek olarak bu değişikliklerin peroksinitritle olan ilişkisinin intravital görüntüleme yöntemleriyle incelenmesi hedeflendi. Daha sonra perisitlerin bu değişikliklerde oynadıkları rolün direkt gözlenmesi amacıyla retina mikrodamarları izole edilerek, OGD ve peroksinitrit uygulanmasına cevapları mikroskop altında incelendi. Son olarak, peroksinitritin kan beyin bariyeri hasarında rolü olan MMP-2 ve 9 üzerindeki etkisi zimografi yöntemiyle çalışıldı. İntravital görüntüleme için kraniyal pencere açıldıktan sonra farelere FITC-Dekstran verildi ve orta serebral arter tıkanması gerçekleştirildi. Flüoresan görüntülerde 2 saat iskemi sonunda mikrodamarların %56±3'ünde, takip eden 2 saat reperfüzyonun sonunda ise %62±3'ünde kesintiler tespit edildi (n=3). Bu kesintilerin içinde eritrositlerin hapsolduğu saptandı. Reperfüzyondan önce verilen PBN (serbest radikal temizleyicisi) boğumlanmış damar oranını anlamlı derecede azaltarak %30±4'e düşürdü (n=3). Topikal peroksinitrit uygulanması, mikrodamarların %54±4'ünde (n=3) segmental darlıklara yol açarken ebselen (peroksinitrit temizleyici molekül) verilen grupta bu oran %28±3'e (n=3) düştü. İzole retina mikrodamarlarında perisitlerin OGD`ye cevaben kasılarak komşu damar çapını bazalin %62±4'üne indirdikleri gözlendi (n=9). Reoksijenizasyon sıvısına geçilmesi ile bu oran değişmezken (%61±9, n=3) reoksijenizasyon sıvısına PBN eklenen grupta düzelme (%87±4) saptandı (n=5). Zimografi çalışmasının ilk bulguları düşük konsantrasyonlardaki peroksinitritin (1?10 µM) MMP-9 aktivasyonuna yol açabileceğine işaret etmektedir. Bu bulgular iskemi ve reperfüzyonun patofizyolojisinde peroksinitrit aracılı perisit disfonksiyonunun ve buna bağlı mikrodolaşım bozukluğunun rolü olabileceğini göstermektedir.

Özet (Çeviri)

Ischemia/reperfusion may disrupt microcirculation and promote progression of the infarct to the penumbra. Although there are strategies for opening of occluded artery via thrombolytic agents and protection of cell death with neuroprotective agents, they are yet inadequate in clinical trials. Previously, microvascular constriction after ischemia/reperfusion was demonstrated ex vivo in histological sections through increased peroxynitrite (an oxidative and nitrative radical) production. Pericytes may actively contract and cause these constrictions. First aim of this thesis is to test mentioned findings about vascular constriction and the role of pericytes in these constrictions in situ (live animal model) by investigating microcirculatory changes during and after 2 hours of ischemia/reperfusion and after topical application of peroxynitrite with help of intravital microscopy. Second aim is to directly observe changes in pericytes after OGD or peroxynitrite application in isolated retinal microvessel preparation. Third aim is to study the effect of peroxynitrite on MMP-2 and 9 activation which were shown to play an important role in blood brain barrier damage by gelatin zymography method. For intravital imaging experiments, first a cranial-window was opened and FITC-Dextran was injected to mice and MCA occlusion was induced. Fluorescent images revealed that constrictions were detected on %56±3 of microvessels at the end of 2 hours of ischemia and following 2 hours of reperfusion this ratio was %62±3 (n=3). Entrapped erythrocytes were detected around these constrictions. PBN, a free radical scavenger, given before reperfusion significantly decreased the ratio of capillaries displaying constrictions to 30±4% (n=3). Peroxyitrite caused segmental constrictions on 54±4% of capillaries (n=3) while peroxynitrite scavenger ebselen significantly reduced peroxynitrite-induced capillary constrictions to 28±3% (n=3). During OGD of isolated retinal microvessels, pericyte contraction was observed and neighbouring vessel diameter was reduced to %62±4 of its baseline value (n=9). After reperfusion with normoxic and normoglycemic solution, this ratio was detected %61±9 (n=3). After addition of PBN to reperfusion solution, this ratio increased to %87±4 (n=5). Findings of of the gelatin zymography study were preliminary. Results imply that lower concentrations of peroxynitrite (1?10 µM) may cause MMP-9 activation. The results of this thesis showed that microcirculatory constrictions were also present in in-situ ischemia/reperfusion model and after direct application of peroxynitrite which were resolved with scavenging agent. During direct retinal pericyte examinations pericytes constricted after OGD and peroxynitrite applications.

Benzer Tezler

  1. Deneysel sepsis modelinde hidroksiürenin proinflamatuar sitokin ve doku histopatolojileri üzerine etkileri

    The effects of hydroxyurea on proinflammatory cytokine and tissue histopathology in experimental sepsis model

    GÖKÇEN KÜLTÜROĞLU

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2019

    Anestezi ve ReanimasyonSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Anesteziyoloji ve Reanimasyon Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. JÜLİDE ERGİL

  2. Karaciğer sirozunda ve karaciğer transplantasyonu sonrası endotel disfonksiyonunun araştırılması

    Assessment of endothelial dysfunction in cirrhosis and after liver transplantation

    FEHMİ HİNDİLERDEN

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2010

    Gastroenterolojiİstanbul Üniversitesi

    İç Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SEBAHATTİN KAYMAKOĞLU

  3. Yenidoğanın hipoksik iskemik beyin hasarında malondialdehid prostaglandin E2 ve vitamin E düzeyleri

    Malondialdehyde prostaglandin E2 and vitamin E levels in neonates with hypoxin ischemic brain damage

    TÜLİN GÜR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    1995

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıGazi Üniversitesi

    DOÇ.DR. KIVILCIM GÜCÜYENER

  4. Genç iskemik inmelerde erken dönemde kan beyinbariyeri bozukluğu ile klinik bulgular arasındakiilişkinin incelenmesi

    Investigation of the relationship between blood-brainbarrier disorder and clinical findings in the earlyperiod of young ischemic strokes

    MİNA ÜZÜLMEZ YILDIZ

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2024

    NörolojiSağlık Bilimleri Üniversitesi

    Nöroloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. AYSUN SOYSAL

  5. Hipoksik iskemik beyin hasarı oluşturulmuş yenidoğan sıçanlarda levetirasetam uygulamasının nöronal apopitozis ve motor yetiler üzerine etkilerinin değerlendirilmesi

    The evalution of lthe effects of levetiracetam application on neunoral apoptosis and motor impairment in hypoxic ischemic brain injury created rats

    MUSTAFA KÖMÜR

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıMersin Üniversitesi

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. ÇETİN OKUYAZ