In vıtro rartlarda kitozanın fibroblast aktivitesine olan etkisi: İmmünhistokimyasal ve elektron mikroskopik çalışma
Başlık çevirisi mevcut değil.
- Tez No: 248361
- Danışmanlar: PROF. DR. SERAP ARBAK
- Tez Türü: Tıpta Uzmanlık
- Konular: Histoloji ve Embriyoloji, Histology and Embryology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2008
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Marmara Üniversitesi
- Enstitü: Tıp Fakültesi
- Ana Bilim Dalı: Histoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 99
Özet
Lineer bir polisakkarid olan kitozan yakn bir geçmite biyomedikaluygulamalarda kullanlm olup in vitro çalmalarda hücresel büyüme üzerine olanetkisi ve hücre tabakas oluturma amasndaki etkisi gösterilmitir. ÇalmamzdaSwiss 3T3 fare embriyonik fibroblastlar üzerine kitozann solüsyon ve membranformlarnn olas etkisini karlatrmal olarak incelemeyi amaçladk. Çalmada 3deney gurubu oluturulmutur: hücrelerin kitosan içermeyen medyumda büyütüldüügrup (Kontrol Grubu); hücrelerin % 2.0'lk kitozan membran formunun üzerindeüretildii grup (Membran Grubu) ve hücrelerin 100 Nl % 2.0'lk kitozan solüsyonformunu içeren medyumda üretildii grup (Solüsyon Grubu).Çalmamzn bu aamasnda, 2 deiik metod uygulanmtr:A) Membran ve solüsyon formlar ayr ayr olmak üzere kitozann üzerine hücreekiminin oluturulduu metod (Metod 1),B) Önce hücreyi ortama ekip, daha sonra kitozan membran formunun ve solüsyonformunun ayr ayr, kültür edilen hücrelerin üzerine eit miktarda ilave edildiimetod (Metod 2).Hücresel proliferasyonu belirleme amac ile deneylerin 5. ve 10. günlerindehücrelere 5-bromo-2-deoksiüridin (BrdU) uygulanm ve hücreler anti-BrdU ileinkübe edilmitir.MTT {3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5 difeniltetrazolyum bromür} ile hücrecanll tayini yaplmtr. Kollajen sentezini belirleme amac ile anti-fare kollajen Iprimer antikoru kullanlmtr.Her grup için, yukarda belirtilen medyum içerisinde sferoid hücre kültürüoluturulmu ve bu hücreler taramal ve geçirimli elektron mikroskopundaincelenmitir.BrdU ile iaretleme testlerinde Metod 1 uygulandnda kitozan membranformunun hem 5. hem de 10. günlerde hücre proliferasyonu açsndan en etkin grubuoluturduu izlenmitir. metod 2'de ise kitozan solüsyon formunun 5. günde,membran formunun ise 10. günde hücre proliferasyonu açsndan en etkin gruplaroluturduu belirlenmitir.ivMTT sonuçlar istatistiksel olarak incelendiinde metod 1'de kitozanmembran formu içeren grup 5. günde çok yüksek oranda hücre canll gösterirken,kitozan solüsyon grubunun buna yakn bir canllk orann metod 2 uygulandnda 5.günde gösterdii izlenmitir.Taramal ve geçirimli elektron mikroskopik incelemelerinde, hücreseluzantlarda belirgin art, hücre membranlarnn korunmas ve hücrelerarasbalantlarn sk konumu eklindeki bulgular özellikle metod 1'de membran grubu,metod 2'de ise hem membran hem de solüsyon gruplarnda kitozan içermeyenkontrol grubuna kyasla kitozann hücre büyümesi ve canll açsndan oldukçaetkin olduunu vurgulamtr.Kollajen immünhistokimyas sonras ise en youn kollajenimmünboyanmasnn metod 1 ve 2 de, 10. günde, kitozan membran formunda olduugörülmütür.Sonuç olarak; kitozann Swiss 3T3 fare ebriyonik fibroblastlarnda hücreproliferasyonunu ve hücreleraras tutunmay arttrc etkisi en belirgin olaraközellikle kitozann membran formunda deneylerin 10. gününde izlenmitir.
Özet (Çeviri)
Chitosan, a linear polysaccharide, has been recently used in biomedicalapplications. In vitro studies demonstrated its effect on cellular growth and itsstimulatory action on cellular layer formation. Our present study aims to comparethe proliferative effects of chitosan in membranous and solution forms on Swiss 3T3mouse embryonic fibroblasts.Three experimental groups were formed: cells were cultured in a normalmedium without chitosan (Control Group); cells were cultured either in a mediumcontaining 2.0% chitosan in membranous form (Membrane Group) or 100Nl ofchitosan solution in concentration of 2.0% (Solution Group). Two different methodshave been used in the experiments: cells cultured on the medium containing chitosanin solution or membraneous forms (Method 1); chitosan solution or membraneousforms were added into the medium containing previously cultured cells (Method 2).At 5th and 10th days of the experiment for both methods, cells were treatedwith 5-bromo-2-deoxyuridine (BrdU) and then incubated with anti-BrdU primaryantibody to assess cellular proliferation.MTT {3-(4,5-dimethyltiazol-2-il)-2,5 diphenyl tetrasolium bromure} wasperformed in order to assess cellular viability. Mouse monoclonal anti-collagen 1primary antibody was used to indicate collagen synthesis. For each group, spheroidcell cultures grown in the above-mentioned media were investigated at transmissionand scanning electron microscopical levels to observe the cellular behaviour.BrdU labelling tests indicated a higher proliferation index in membrane groupof method 1 at 5th and 10th days. For second method, membraneous form at 10th day,and solution form at 5th day were the most effective groups by means of cellularproliferation.MTT results reflected a high cellular viability in the method 1 at 5th day ofmebraneous form, whereas cellular viability was highest in the solution form ofmethod 2 at 5th day.Transmission and scanning electron microscopical investigations of theexperimental groups revealed the cells with well-defined cellular projections, intactvicellular membranes and tight intercellular junctions. They were prominent especiallyin membrane group of method 1 and in membrane and solution groups of method 2.Prominent collagen synthesis was determined in membrane groups at 10thdays for both methods.We can conclude that chitosan in membranous form at 10th day of theexperiment performed a significant proliferative effect and increased the ratio of cellto-cell junctions on Swiss 3T3 mouse embryonic fibroblasts in vitro conditions.
Benzer Tezler
- Kortikosteroitlerin dermatolojik formülasyonlarının hazırlanması ve in vitro-in vivo değerlendirilmesi
Preparation of dermatological corticosteroid formulations and ın vitro-ın vivo evaluation
TANER ŞENYİĞİT
Doktora
Türkçe
2010
Eczacılık ve FarmakolojiEge ÜniversitesiFarmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ÖZGEN ÖZER
- Dental cerrahi işlemler sonrasında kemik rejenerasyonunda kullanılmak üzere büyüme faktörü ve antibiyotik yüklü nanopartikül, film ve greft materyali kombinasyonlarının hazırlanması ve değerlendirilmesi
The preparation and evaluation of the combination of growth factor and antibiotic drug loaded nanoparticles, film and graft material to be used for bone regeneration after dental surgical procedures
MİRAY İLHAN
Doktora
Türkçe
2019
Eczacılık ve FarmakolojiAnkara ÜniversitesiFarmasötik Teknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. MÜGE KILIÇARSLAN
- Hidroksiüre türevi schiff bazı metal komplekslerinin in vivo ve in vitro antitümör özelliklerinin araştırılması
The investigation of antitumuor properties in vitro and in vivo of hydroxyurea derivative schiff base metal complexes
HAFİZE TELÇEKEN
- Çörek otu (nigella sativa L.) esansiyel yağının ratlarda bağırsak kasılımları üzerine etkisi.
The effect of nigella sativa essential oil on intestinal contractions in rat
NUBİN YALÇIN
Yüksek Lisans
Türkçe
2019
FizyolojiAfyon Kocatepe ÜniversitesiFizyoloji (Veterinerlik) Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AZİZ BÜLBÜL
- Silostazol ve pentoksifilinin hipoksik ve normoksik koşullarda in vitro ortamda rat aortası endotel fonksiyonları üzerindeki etkileri
The effects of silostazole and pentoxifilina medicine on rat aorta endothelial functions in vitro with hypoxic and normoxic conditions
FECRİYE SUBAŞI GÜR
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2016
Göğüs Kalp ve Damar CerrahisiAdnan Menderes ÜniversitesiKalp ve Damar Cerrahisi Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. SELİM DURMAZ