Immobilization of his-tagged human kappa opioid receptor on a cantilever array biosensor for detection of narcotics in bodily fluids
İnsan kapa opioid almaçlarının insan vücut sıvılarından uyuşturucu tayini amacıyla biyosensör yüzeyine sabitlenmesi
- Tez No: 256120
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. HALİL KAVAKLI
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Mühendislik Bilimleri, Engineering Sciences
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2009
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Koç Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Malzeme Bilimi ve Mühendisliği Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Biyosensörler, kimyasal ve biyolojik moleküller arasındaki etkileşimleri gözlemlemek ve yeni molekülleri bulmak üzere kullanılabilecek önemli cihazlardır. Biyolojik moleküllerin yüzeye sabitlenmesi, biyosensör üretiminde krtitik rol oynamaktadır. Bu çalışmada, insan ? opioid almaçlarının (hKOR) biyosensör alanında yeni bir uygulama olan insan vücut sıvılarından uyuşturucu tayini yapılması amacıyla yüzey işlevselleştirilmesi gerçekleştirilmiştir. Bu amaçla, almaçlar ilk olarak ifade vektörlerine klonlanıp Escherichia coli'de ifade ettirilmiştir. Daha sonra, rekombinant hKOR affinite kromatografi yöntemi ile saflaştırılıp, biyosensör yüzeyine tiyol ve Ni-NTA grupları aracılığı ile sabitlenmiştir. Başarıyla yüzeye sabitlenen almaçlar flurosan mikroskobu ile görüntülenmiştir. Altı histidin ile işaretlenmiş hKOR ve histidin antikoru arasındaki protein- antikor etkileşimi doğrudan ve etiket gerektirmeyen bir yöntemle gösterilmiştir.
Özet (Çeviri)
Biosensors are promising devices for detecting interactions between both chemical and biological molecules and exploring a novel molecule. The immobilization of biological molecules on surfaces has a crucial role in the fabrication of biosensors. This study presents functionalization of human ? opioid receptor (hKOR) for a novel biosensor application to detect drug molecules from human bodily fluids. For this purpose, the receptor was first cloned to expression vectors and expressed in Escherichia coli. Then, recombinant hKOR was purified by affinity chromatography. For the first time, the purified receptor was immobilized on the micro-fabricated cantilever array biosensor via thiol groups and Ni-NTA complex. The immobilization of the receptors was verified with fluorescence microscopy. A specific and label-free detection of interaction between hexa-histidine tagged hKOR and his-antibody has been demonstrated.
Benzer Tezler
- MHV antikorunun tayininde kullanılacak indirekt ELISA tekniği için tavuk Marek hastalığı virusunun (MHV) katı faza immobilize edilmesi
The Immobilization of Marek's disease virus (MDV) to solid phase to be used in the indirect ELİSA technique for determination of MDV antibody
Ş.TÜRCAN GÜRCAN
- Tavşanlarda marek hastalığı virusu (MHV) antikorunun eldesi ve ELISA yöntemi için katı faza immobilizasyonu
Isolation of the antibody against Marek disease virus (MDV) from rabbits and its immobilization to solid phase for the ELİSA technique
JAFAR GAREAYAGHİ
- Electroinitiated polymerization of acrylamide, acrolein and copolymerization
Başlık çevirisi yok
BİLGE HACIOĞLU
- Trypsin immobilization on porous styrene-maleic anhydride copolymer
Başlık çevirisi yok
SARA SHAGHAGHİ
- Sıçanlarda deneysel olarak oluşturulan stress ülserine cimetidin, metoclopramid, histidin ve tirozin'in mide mukozasındaki etkileri
Başlık çevirisi yok
BAHADIR ÜRESİN
- Çapraz bağlı poli (vinil pirolidon) hidrojellerinin hazırlanması ve enzim tutuklamasında kullanılması
Başlık çevirisi yok
MURAT ŞEN
