Geri Dön

İnsan göbek kordon kanı ve periferik kan kaynaklı mezenkimal kök hücrelerinin in vitro kültür ortamına adaptasyonuna etki eden faktörlerin incelenmesi

Investigation of factors affecting adaptation of human umbilical cord blood and peripheral blood derived mesenchymal stem cell in vitro

PDF İndir

  1. Tez No: 295809
  2. Yazar: OLGA NEHİR ÖZTEL
  3. Danışmanlar: PROF. DR. ADİL ALLAHVERDİYEV
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyomühendislik, Bioengineering
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2010
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Yıldız Teknik Üniversitesi
  10. Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Biyomühendislik Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 183

Özet

Günümüzde kordon kanı (KK) kök hücre (KH) çalışmalarına ilgi giderek artmaktadır. Bunun nedeni, KK'nın, kemik iliği, periferik kan (PK) ve yağ dokusu ile kıyaslandığında daha genç hücreleri içermesi, yaşayabilme yeteneklerinin yüksek olması gibi özelliklere sahip olmasıdır. Mezenkimal kök hücrelerin diğer bir kaynağı olan PK, kolaylıkla elde edilebilmesi ve ön çalışmalar için uygun bir kaynak olması nedeniyle tercih edilmektedir. Kordon kanından MKH'lerinin kültürü, yapılmasında mevcut olan zorluklardan dolayı dünyanın az sayıda laboratuvarında yapılmaktadır. Ülkemizde ise, bu konu ile ilgili çalışmalar sadece KK'ından hematopoetik ve MKH izolasyonu, immünofenotiplendirilmesi, kriyoprezervasyonu (Prof. Dr. Tülay İREZ) ve transplantasyonuyla sınırlıdır. Buna göre de bu çalışmanın amacı farklı donörlerin periferik ve kordon kanından elde edilen MKH'lerin izolasyonuna, in vitro kültürde adaptasyonuna ve proliferasyonuna etki eden çeşitli faktörlerin (fiziksel, kimyasal, donöre bağlı) etkisini incelemek olmuştur. Çalışmalarda 15 Kordon kanı ve 30 periferik kan örneği kullanıldı. Deneylerde farklı izolasyon yöntemleri (Ficoll, eritrosit lizis ve santrifügasyon), hücre sayımı ve canlılık tayini, hücre kültürü, mikroskobik ve Flow Sitometrik yöntemler kullanıldı. Bu çalışmada ilk kez olarak kordon kanından mononükleer hücre izolasyonunda Ficoll gradienti yönteminin (900xg hızda) incelenen yöntemler arasında en uygun yöntem olduğu, mezenkimal kök hücrelerinin izolasyon, ve adaptasyonunda +%15 HyClone serum ve düşük glikoz içeren DMEM besiyerinin kültürün yapılmasında kullanılan flasklardan ise Falcon marka flaskların en uygun olduğu tespit edildi. Flow Sitometrik analizler sonucunda, kordon kanındaki mezenkimal kök hücre miktarının, izolasyon öncesi %0,04, izolasyon sonrası %1,22 ve kültürde %10,22 olduğu belirlendi (p

Özet (Çeviri)

The very promising features of cord blood stem cell studies have been attracting more and more interest nowadays. Compared to the well-known stem cell sources such as bone marrow, peripheral blood and adipose tissue, cord blood consists of younger cells with a higher survival ability. However, in the preliminary studies, peripheral blood, which also includes mesenchymal stem cells (MSC), has been preferred much more since it can be accessed easily. As likes to preripheral blood, cord blood include mesenchymal stem cells. Nevertheless, due to presence of lower amount of MSC in cord bloos and some technical difficulties in its in vitro culture, it is rarely processed by research laboratories.In our country, practiced studies of cord blood are limited with hematopoetic and mesenchymal stem cell isolation, immunophenotyping, cryopreservation (Prof. Dr. Tülay İREZ) and transplantation from cord blood. The aim of this study was following to the isolation of mesenchymal stem cells from pheripheric and cord blood, donated from different donors, to investigate the effects of a several physical, chemical and donor-related factors on cell proliferation and adaptation of these cells in vitro culture conditions. 15 cord blood and 30 peripheral blood samples were processed in this study. Cells were isolated via ficoll, erytrocyte lysis and centrifugation based different methods. In order to the assess the efficiency of these isolation methods cell count and survival assessment, cell cultuvation, microscopic and flow cytometric methods were efficiently performed.This present study proposed for the first time that the use of Ficoll gradient method (900xg speed) in mononuclear cell isolation from cord blood is more suitable than the other examined methods. Additionally, cullture medium consisiting of %15 HyClone serum and DMEM (with low glucose) yielded higher amount of MSC and provided cells better cultural environment. Finally, culture flask (Falcon BD, U. S.A) was the most appropriate in culture of MSC. Flow cytometric analysis of MSCs revealed that the percentage of MSC in cord blood was qradually increased with a significant amount; 0,04% at pre-isolation, 1,22% during isolation and 10,22% after culture (p

Benzer Tezler

  1. Tez No

    637220

    Small molecule-mediated human HSC expansion and development of HSC expansion medium

    Küçük molekül-aracılı insan HKH çoğaltımı ve HKH çoğaltımı için besiyeri geliştirilmesi

    ESRA ALBAYRAK

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2020

    BiyomühendislikYeditepe Üniversitesi

    Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. FATİH KOCABAŞ

  2. Tez No

    158149

    Göbek kordon kanı ve periferal kan kök hücre ürünlerinde CD34(+) hücre ile CD133(+) hücre ekspresyonu

    Başlık çevirisi yok

    SÜLEYMAN NURİ BAYRAM

    Tıpta Uzmanlık

    Türkçe

    Türkçe

    2004

    Çocuk Sağlığı ve HastalıklarıEge Üniversitesi

    Çocuk Sağlığı ve Hastalıkları Ana Bilim Dalı

    PROF.DR. SAVAŞ KANSOY

  3. Tez No

    305513

    Kordon kanından elde edilen kök hücrelerin diferansiyasyonu, moleküler ve biyokimyasal analizleri.

    Molecular and biochemical analysis, differantiation of stem cells derived from cord blood.

    İDİL ÇETİN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2011

    Biyolojiİstanbul Üniversitesi

    Biyoloji Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. MEHMET RIFKI TOPÇUL

  4. Tez No

    382404

    Ex Vivo granülositer koloni oluşturan insan göbek kordon kanı hücrelerinin kök hücre fenotip analizi

    Phenotypical analysis of Ex Vivo granulocyte colony forming human umblical cord blood cells

    EMİNE BEGÜM GENÇER

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2014

    BiyolojiAnkara Üniversitesi

    Temel Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. MERAL BEKSAÇ

  5. Tez No

    489766

    Hücre tabaka mühendisliği ile göbek kordonu perisitlerinden üç boyutlu damar grefti eldesi

    Generation of three-dimensional vascular graft from umbilical cord pericytes using cell sheet engineering

    BEYZA GÖKÇINAR YAĞCI

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2018

    BiyolojiHacettepe Üniversitesi

    Kök Hücre Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. BETÜL ÇELEBİ SALTIK

Geri Dön