Geri Dön

Alkol dehidrogenaz bağlı manyetik nanopartiküllerin kiral alkol üretiminde kullanılmak üzere geliştirilmesi

Development of alcohol dehydrogenase conjugated magnetic nanoparticles for production of chiral alcohol

PDF İndir

  1. Tez No: 300296
  2. Yazar: BETÜL GENÇ
  3. Danışmanlar: DOÇ. DR. AYHAN ÇELİK
  4. Tez Türü: Yüksek Lisans
  5. Konular: Biyokimya, Biochemistry
  6. Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
  7. Yıl: 2011
  8. Dil: Türkçe
  9. Üniversite: Gebze Yüksek Teknoloji Enstitüsü
  10. Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
  11. Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
  12. Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
  13. Sayfa Sayısı: 172

Özet

Özgün özellikleri ve biyomoleküllerle aynı boyutta olma durumları gibi çeşitli özelliklerinden dolayı nanopartiküllere ilgi gün geçtikçe artmaktadır. Bu özelliklerle birlikte manyetik nanopartiküller nanokatalizör olarak enzim-nanopartikül konjuge sistemi olarak hazırlanabilmektedir.Bu çalışmada hem katekol grubu ile modifiye hem de modifiye olmamış manyetik demir oksit nanopartikülleri sentezlenmiştir. Süperparamanyetik özellikte oldukları belirlenmiş ve çeşitli metotlarla yüzey karakterizasyonları yapılmıştır.Biyokatalizör olarak kullanılacak alkol dehidrogenaz enzimi mezofilik olan Staphylococcus saprophyticus bakterisinden pET14b vektör sistemine klonlanmıştır. Tahmini alkol dehidrogenaz genini taşıyan pET14b plazmidi E. Coli BL21(DE3) ekspresyon kompetent hücrelerine aktarılmıştır. Hem IPTG indüksiyonu ile hem de oto-indüksiyon besiyerinde eksprese edilen alkol dehidrogenaz enzimi inklüzyon cisimciği olarak elde edilmiştir. in vivo doğru katlanma veya in vitro tekrar katlanma çalışmaları sonucu alkol dehidrogenaz enzimi saf olarak elde edilmiş ancak aktif formda elde edilememiştir. Bu proteinle ilgili çalışmalar devam etmektedir. Bu nedenle çalışmalarda Bacillus thuringiensis kaynaklı alkol dehidrogenaz enzimi kullanılmıştır.İmmobilizasyon sisteminin ekonomik olmasını sağlamak için kofaktör rejenerasyonunda Candida methylica kaynaklı format dehidrogenaz kullanılmış ve tüm immobilizasyon sistemleri bu enzim ile optimize edilmiştir.Manyetik nanopartiküllere OXDC ve cmFDH koimmobilizasyonu başarı ile gerçekleştirilmiştir. Kiral alkol üretiminde kullanılmak üzere dizan edilen alkol dehidrogenaz ve format dehidrogenaz birlikte immobilizasyon çalışmaları geliştirilmektedir.

Özet (Çeviri)

Nanomaterials have atracted great interest because of specific properties such as magnetic behavior and conductivity and various attributes, including the similar size of biomolecules. Nanoparticles have designed enzyme-nanoparticles conjugate system as nanocatalyst with this properties.In this study, both catechol modified and unmodified magnetic iron oxide nanoparticles were synthesized and surface characterizations were analyzed with various methods.Alcohol dehydrogenase as biocatalyst was cloned into pET14b vector system from Staphylococcus saprophyticus. pET14b vector containing putative alcohol dehydrogenase gene was transformed into E.Coli BL21(DE3) expression competent cells. Alcohol dehydrogenase was expressed as inclusion bodies with IPTG induction and in auto-induction medium. Alcohol dehydrogenase enzyme was purified as pure but not in active form with in vivo and in vitro refolding applications. Therefore alcohol dehydrogenase from Bacillus thuringiensis was used in this study.Formate dehydrogenase from Candida methylica was used for cofactor regeneration that makes immobilization system economic and all systems were optimized with formate dehydrogenase.Oxalate decarboxylase and formate dehydrogenase coimmobilization was carried out successfully. Alcohol dehydrogenase and formate dehydrogenase coimmobilization have been developed for chiral alcohol synthesis.

Benzer Tezler

  1. Tez No

    309862

    Manyetik boya-ligand afinite nanoyapılarını kullanarak Saccharomyces cerevisiae'den alkol dehidrogenaz enziminin saflaştırılması

    Purificaiton of alcohol dehydrogenase from Saccharomyces cerevisiae using magnetic dye-ligand affinity nanostructures

    NAZİFE KAYA

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2012

    BiyokimyaAdnan Menderes Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    YRD. DOÇ. DR. DENİZ AKTAŞ UYGUN

  2. Tez No

    346340

    İkili enzim sistemi ile önemli alkol bileşikleri sentezi

    The synthesis of important alcohol compounds by coupled enzyme system

    FATİH AKTAŞ

    Doktora

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    BiyokimyaGebze Yüksek Teknoloji Enstitüsü

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. AYHAN ÇELİK

  3. Tez No

    348558

    İmmobilize metal afinite kromatografisi ile maya alkol dehidrogenaz enziminin saflaştırılması

    Purification of yeast alcohol dehyrogenase by immobilized metal affinity chromatography

    BEGÜM AKDUMAN

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2013

    BiyokimyaAdnan Menderes Üniversitesi

    Kimya Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. DENİZ AKTAŞ UYGUN

  4. Tez No

    163955

    İnsan karaciğer dokusundan ADH aktivitesinin tayini

    Determination of ADH activity from human liver

    ASLI DEMİR

    Yüksek Lisans

    Türkçe

    Türkçe

    2005

    Adli TıpAnkara Üniversitesi

    Adli Bilimler Ana Bilim Dalı

    DOÇ. DR. YAŞAR BİLGE

  5. Tez No

    745306

    Structural modifications and novel mini chaperone designs of an archaeal small heat shock protein, TPV sHSP14.3

    Bir arkea küçük ısı şoku proteinin (TPV sHSP14.3) yapısal modifikasyonlar ve özgün küçük şaperon tasarımları

    SEMA ZABCI

    Doktora

    İngilizce

    İngilizce

    2022

    BiyolojiOrta Doğu Teknik Üniversitesi

    Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı

    PROF. DR. SEMRA KOCABIYIK

Geri Dön