Pluronik F68 polimerinin mezenkimal kök hücrelerin elektroporatik özelliklerine etkisi
The effect of pluronic F68 polymer on electroporatic features of mesenchymal stem cells
- Tez No: 300297
- Danışmanlar: DOÇ. DR. FERRUH ÖZCAN, PROF. DR. FİKRETTİN ŞAHİN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyoloji, Biology
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2011
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Gebze Yüksek Teknoloji Enstitüsü
- Enstitü: Mühendislik ve Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Moleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 73
Özet
Gen ve hücre terapisi Alzheimer, Parkinson, Diyabet ve kanser gibi birçok hastalık için yeni tedavi stratejilerinin geliştirilmesinde umut verici olmaktadır. Yeni tedavileri geliştirmek için ideal kök hücreleri kullanmak ve etkili gen aktarım yöntemleri oluşturmak önemlidir. Yakın bir zamanda insan diş jerm kök hücrelerinin (İDJKH) hızlı çoğalma ve farklılaşma kapasitesine sahip mezenkimal kök hücre özellikleriyle aynı olduğu ispatlanmıştır. Elektroporasyon, gen ve hücre terapi uygulamalarında insan diş jerm kök hücrelerini transfekte etmek için etkili ve güvenli bir yöntemdir. Elektroporasyonun dezavantajı, elektroporasyon sonrasında hücre membranındaki hasardan kaynaklanabilecek olan hücre fizyolojisi, gen ekspresyonu ve çoğalmasındaki değişikliklerle ilişkili olabileceği gösterilmiştir. Pluronik F68 blok kopolimerinin hücre membranları ile etkileşime geçtiği ve stabilize ettiği belirlenmiştir.Bu çalışmada F68, insan diş jerm kök hücrelerinin elektroporasyonunda transfeksiyon verimini arttırmadaki etkisinde ilk kez kullanılmıştır. Sonuçlarımızda, F68'in varlığında pEGFP-N2 plasmidi ile transfekte edilen hücrelerin, F68'in uygulanmadığı durumda transfekte edilen grupla karşılaştırıldığında daha fazla oranda EGFP pozitif hücre varlığı ve daha düşük oranda hücre ölümü gözlemlenmiştir. Buna ek olarak, İDJKH, pEGFP ve pDsRed ile birlikte transfekte edildiğinde F68'in varlığındaki elektroporasyon sonrasında EGFP ve RFP pozitif hücrelerin sayısı belirlenmiştir. Embriyonik kök hücre markörleri olan Oct4 ve Klf4 genlerinin ekspresyonlarını analiz ettiğimizde F68 uygulanan hücreler, F68 uygulanmayan hücrelere göre daha yüksek ekspresyon seviyesine sahip olduğu bulunmuştur.Bu bulgulara göre; F68'in gen ve hücre terapisinde uygulanmak üzere etkili bir gen aktarım metodu sağlayarak mezenkimal kök hücrelerdeki transfeksiyon etkinliğini arttırdığı savunulabilir.
Özet (Çeviri)
Gene and cell therapies promise new treatment strategies for many diseases such as Parkinson, Alzheimer's disease, Diabetes and Cancer. In order to develop these new treatments it is important to use ideal stem cell and also establish efficient gene delivery protocols. Recently, it has been shown that Human Tooth Germ Stem Cells (HTGSCs) display Mesenchymal Stem Cell (MSCs) characteristics with high proliferation and differentiation capacity. It was shown that electroporation is a safe and efficient method to transfect HTGSCs for gene and cell therapy applications. The drawbacks of electroporation was shown to be related to altered cell physiology, gene expression and cell proliferation after electroporation which might stem from damages in cell membranes during electroporation. Pluronic F68 block co-polymer was determined to be interacting with cell membranes and stabilizing them during electroporation.In this study, F68 has been used for the first time to increase the transfection efficiency in electroporation of HTGSCs. Our results revealed that the cells transfected with pEGFP-N2 plasmid in the presence of F68 had the highest percentage of EGFP positive cells and showed lowest cell death when compared with control group where F68 was not used. Moreover when HTGSCs were transfected with both pEGFP-N2 and pDsRed (Red Fluorescent plasmid expressing plasmid), the number of both EGFP and RFP positive cells were detected after electroporation in the presence of F68. When we analyzed the expression of Embryonic Stem Cell marker genes Oct4 and Klf4 we have found that F68 treated cells has higher expression of Oct4 and Klf4 than non-treated cells.The results of the present study suggested that F68 might be used to increase transfection efficiency in MSCs providing a powerful non viral gene delivery method to be used in gene and cell therapy applications.
Benzer Tezler
- Effect of P85, F68 and F127 pluronic block copolymers on osteogenic, chondrogenic and adipogenic differentiation of human tooth germ stem cells (HTGSCs)
P85, F68 ve F127 pluronic polimerlerin insan diş germ kök hücrelerinin kemik, kıkırdak ve yağ hücrelerine farklılaşması üzerine olan etkisi
AYŞEGÜL DOĞAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2011
BiyoteknolojiYeditepe ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FİKRETTİN ŞAHİN
- The role of pluronic F68 and F127 combined growth factors and stem cells in reducing ketamine induced neurotoxicity
Pluronik F68 ve F127 ile birleştirilmiş büyüme faktörlerinin ve kök hücrelerin ketaminin neden olduğu nörotoksisiteyi azaltmadaki rolü
DİLEK MERCAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2011
NörolojiYeditepe ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FİKRETTİN ŞAHİN
- PEO-PPO-PEO triblock copolymers in aqueous solutions: Micellization & self-assembly into fiberlike aggregates
Su içinde PEO-PPO-PEO triblock kopolimerleri: Miselizasyonları ve fiber şeklindeki çökeltilere kendinden yapılanmaları
ECE AYTAN
Yüksek Lisans
İngilizce
2014
KimyaKoç ÜniversitesiMalzeme Bilimi ve Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ADEM LEVEND DEMİREL
- Effect of boron and F68 pluronic block copolymer combination on adipogenic differentiation of human adipose stem cells
Bor ve F68 blok kopolimer kombinasyonun insan adipoz kök hücrelerinin yağ hücrelerine farklılaşması üzerindeki etkisi
AYSU YILMAZ
Yüksek Lisans
İngilizce
2014
BiyoteknolojiYeditepe ÜniversitesiBiyoteknoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. FİKRETTİN ŞAHİN
- Effect of F68, F127 and P85 pluronic block copolymers on odontogenic differentiation of human tooth germ stem cells (hTGSCs)
F68, F127 ve P85 pluronic polimerlerinim insan diş germ kök hücrelerinin diş hücrelerine farklılaşması üzerine olan etkisi
PAKİZE NESLİHAN TAŞLI
Yüksek Lisans
İngilizce
2011
BiyoteknolojiYeditepe ÜniversitesiBiyoteknoloji Bölümü
PROF. DR. FİKRETTİN ŞAHİN