Halofilik arke kaynaklı amilaz enziminin saflaştırılması
Purification of halophilic archaea origin amylase enzyme
- Tez No: 301071
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. GÜL ÖZYILMAZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2011
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Mustafa Kemal Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 72
Özet
Bu çalışmada ekstraselüler halofilik arke kaynaklı amilaz enziminin izolasyonu ve karakterizasyonu gerçekleştirilmiştir. Bu amaçla kullanılacak ekstraselüler halofilik arke izolatının seçimi amilaz aktivitesine göre yapılmıştır. Amilaz enziminin saflaştırılmasında sırasıyla diyaliz, konsantratör ile deriştirme, kalsiyum alginatla biyoseçimli izolasyon ve DEAE-Sefadeks iyon değiştirici kromatografisi teknikleri kullanılmıştır. Amilaz enzimi, kalsiyum alginat ile kısmen izole edildiğinde spesifik aktivite 5.115 U/mg protein olarak bulunmuş ve bu aşamada enzim 77.5 kat saflaştırılmıştır. DEAE-Sefadeks iyon değiştirici kromatografisi ile yapılan bir sonraki saflaştırma basamağında ise amilaz enziminin spesifik aktivitesi 10.00 U/mg prot. olarak bulunmuş ve enzim bu basamakta 151.52 kat saflaştırılmıştır. Çalışmada saflaştırılmış halofilik arke kaynaklı amilaz enziminin en yüksek aktivite gösterdiği pH, sıcaklık ve NaCl derişimleri belirlenerek karakterizasyonu da yapılmıştır. Buna göre seçilen A-235 izolatından elde edilen amilaz enziminin optimum pH, sıcaklık ve NaCl derişimi sırasıyla pH 5, 50 ºC ve 3 M NaCl olarak belirlenmiştir. Bu koşullarda farklı derişimdeki nişasta derişimlerine bağlı olarak aktiviteler belirlendiğinde Km ve Vmax değerleri ise Lineweaver-Burk denklemine göre sırasıyla 4.1 mg nişasta/mL ve 0.42 mg nişasta/dk.mL olarak hesaplanmıştır.
Özet (Çeviri)
In this study, isolation and characterization of extracellular halophilic archaeal amylase enzyme was carried out. Halophilic archaeal starin was selected according to amylase activity. Dialisis, concentrating by concentrator, bioselective participitation by calcium alginate and DEAE-Sephadex ion exchange choromatography methods were used in sequence. Amylase enzyme was partially isolated by calcium alginate with 5.115 U/mg starch as specific activity, and enzyme was 77.5 fold purified at this stage. In subsequent purification step by DEAE-Sephadex ion exchange choromatography, spesific activity was found as 10.00 U/mg protein and amylase was purified 151.52 fold. Purified amylase enzyme was characterized by determination optimal pH, temperature and NaCl concentraion of A-235 strain were pH 5, 50 ºC and 3 M, respectively. When amylase activities were determined at optimal conditions, Km and Vmax values were calculated as 4.1 mg starch/ mL and 0.42 mg starch/min.mL according to Lineweaver-Burk Plot.
Benzer Tezler
- Halofilik arke kaynaklı lipaz enziminin saflaştırılması ve karakterizasyonu
Purification and characterization of extracellular lipase from halophilic archaea
TANJU YILDIZ
- Functional significance of fructan biosynthesis in halophilic archaea and eubacteria
Halofilik arke ve öbakterilerde fruktan biyosentezinin fonksiyonel önemi
ONUR KIRTEL
Doktora
İngilizce
2021
BiyomühendislikMarmara ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EBRU TOKSOY ÖNER
PROF. DR. WİM VAN DEN ENDE
- Halofilik mikroorganizmalar tarafından fenolün biyodegradasyonu
Phenol biodegradation by halophilic microorganisms
EDA AÇIKGÖZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
BiyolojiMustafa Kemal ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. BİRGÜL ÖZCAN
- Azo tekstil boyalarının renk ve toksisitesinin halofilik arkeler tarafından giderimi
Decolorization and detoxification of textile azo dyes by halophilic archaea
EVRİM YILDIZ
- Çankırı Çankaya Tuz Madeni'nden halofilik arkelerin izolasyonu ve karakterizasyonu
Isolation and characterization of halophilic archaea from Çankırı Çankaya Salt Mine
EVRİM YILDIZ
Yüksek Lisans
Türkçe
2008
BiyolojiMustafa Kemal ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. MAHMUT ÇALIŞKAN
YRD. DOÇ. DR. BİRGÜL ÖZCAN