Isolation, purification and characterization of catalase from Phanerochaete Chrysosporium
Katalaz enziminin Phanerochaete Chrysosporium dan izolasyonu, saflaştırılması ve karakterizasyonu
- Tez No: 305246
- Danışmanlar: PROF. DR. LEMAN TARHAN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Biyokimya, Biochemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2012
- Dil: İngilizce
- Üniversite: Dokuz Eylül Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Bölümü
- Bilim Dalı: Biyokimya Ana Bilim Dalı
- Sayfa Sayısı: 86
Özet
Katalaz, hücre ve dokuların hidrojen peroksidin toksik etkilerinden korunmasında temel rol oynayan antioksidan enzimlerden biridir.Çalışma kapsamında, yüzde 60 amonyum sülfat çöktürmesi, yüzde 60 etanol çöktürmesi, DEAE selüloz anyon değiştirici kromatografisi ve son saflaştırma basamağı olarak da sephacryl- s-200 jel filtrasyon kromatografisi uygulanarak beyaz çürükçül fungus Phanerochaete chrysosporium katalazı 129,10 kat saflaştırılmıştır. Saflaştırılmış katalazın moleküler ağırlığı jel filtrasyonu ile yaklaşık 290 kDa olarak bulunmuştur. SDS-PAGE jel elektroforezi saflaştırılmış enzimin 72 kDa ağırlığında dört eşdeğer subunitten oluştuğunu göstermiştir. Saflaştırılmış enzimin optimum pH değeri 7,5 ve optimum sıcaklığı 30 derece olarak bulunmuştur. Enzim bazik bölgede daha stabil olup 60 derece 2 saat sonunda yaklaşık yüzde 25 aktivite kaybına uğramıştır. Saflaştırılmış katalaz için Km ve Vmax değerleri sırasıyla 290,69 mM ve 250000 U/mg olarak bulunmuştur. İmazalil ve procymidon fungusitleri saflaştırılmış katalaz aktivitesini inhibisyona uğratmazken benomil fungusitinin yarışmasız inhibitör etkisine sahip olduğu belirlenmiş ve Ki değeri 1,158 mM olarak bulunmuştur.
Özet (Çeviri)
Catalase is one of the antioxidant enzymes that plays a major role in the protection of the cells and the tissues from the toxic effects of hydrogen peroxide.In this study, 129.10-fold catalase enzyme purification was obtained from white rot fungus Phanerochaete chrysosporium by 60 percentage ammonium sulphate precipitation, 60 percentage ethanol precipitation, DEAE-cellulose anion exchange and by applyingsephacryl-s-200 gel filtration chromatography as a final purification step. The molecular weight of purified catalase was found about 290 kDa with gel filtration chromatography. SDS-gel electrophoresis results indicated that Phanerochaete chrysosporium catalase consists of four apparently identical subunits, with a molecular weight of around 72 kDa. Optimum pH and the temperature values of the purified catalase was found as 7.5 and 30 celcius, respectively. It was found that purified catalase was more stable in the basic region and it lost its catalitic acitivity about 25 percentage at 60 celcius. The Km and Vmax values were found as 290.69 mM and 250000 U/mg respectively for the purified catalase. It was not observed that imazolyl and procymidon had inhibition effects on purified catalase. However, it was found that benomyl inhibited purified catalase as non-competitive inhibitor and Ki value was determined as 1.158 mM.
Benzer Tezler
- Sığır dili (hydnum repandum ) mantarından katalazın üçlü faz ayırma sistemiyle izolasyonu, immobilizasyonu ve karakterizasyonu
Isolation, immobilization and characterization of catalase from siğirdi̇li̇ (hydnum repandum ) mushroom by tri̇ple phase separati̇on system
IŞIL NUR TABARU
Yüksek Lisans
Türkçe
2022
KimyaIğdır ÜniversitesiBiyomühendislik ve Bilimleri Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ AYŞE TÜRKHAN
- Proteaz üreticisi mikroorganizmaların izolasyonu, tanımlanması ve proteaz enzimlerinin biyoteknolojik uygulanabilirliği
Protease producer microorganisms isolation and identification from Kırıkkale and biotechnological applicability of protease
FATMA ŞEYMA DUMAN
- Termofilik bakterilerden lipaz üreticisi suşların belirlenmesi, enzimin saflaştırılması, karakterizasyonu ve biyoteknolojik uygulanabilirliğinin araştırılması
Determination of lipase producer from thermophilic bacteria and purification of enzyme, characterization and investigation of biotechnological applicability
İKRA ÖZKAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2020
GenetikAtatürk ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. AHMET ADIGÜZEL
- Rize ili topraklarından izole edilen Bacillus türlerinin bakteriyosin içeriklerinin, aktarılabilir antibiyotik ve ağır metal dirençlerinin belirlenmesi
Bacteriocin contents of Bacillus isolated from soil of Rize province, determination of transferable antibiotic and heavy-metal resistance
ŞEYMA ŞENSOY KARAOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2013
BiyolojiRecep Tayyip Erdoğan ÜniversitesiBiyoloji Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. DR. ELİF SEVİM
- Sarımsak filizinden asit fosfatazın kısmi saflaştırılması ve özelliklerinin incelenmesi
Partial purification and characterization of acid phosphatase from garlic seedling
SERDAR BAZAROV