İnsan miyoblast ve mezenkimal kök hücre yüklenmiş aselüler çizgili kas kaynaklı doğal ve yarı-yapay iskelelerin çizgili kas dokusu oluşturma potansiyeli
Skeletal muscle tissue formation potential of asellular skeletal muscle originated native and semi-syntetic scaffolds loaded with human myoblasts and mesenchymal stem cells
- Tez No: 311210
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. HALİME KENAR
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Genetik, Genetics
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2012
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Kocaeli Üniversitesi
- Enstitü: Sağlık Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kök Hücre Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 82
Özet
Bu çalışmada amaç, hücrelerinden arındırılmış doğal kas iskeleleri ve hücresiz doğal kas komponentleri (protein, glikoprotein) tutturulmuş daha geniş boyuttaki yarı-yapay iskeleler kullanarak, doğuştan (örn: yarık dudak hastalığı) veya kaza sonrası meydana gelen (özellikle yüz kaslarında) kas eksikliklerini gidermek için kas yamalarının üretilmesidir. Çalışmada iskelelerin hücresel bileşenleri miyoblast ve mezenkimal kök hücreler (MKH'ler) gibi iki farklı hücre kaynağından seçilmiş ve kas yaması üretimi için en uygun iskele ve hücre tipi araştırılmıştır. Miyoblastlar insan çizgili kas dokusundan, MKH'ler de insan menstrual kanından izole edilmiş, akım sitometri ve kemik ile yağ dokusuna farklılaşma testleri ile karakterize edilmiştir. İnsan çizgili kas parçalarının deterjan türevli maddelerle hücrelerinden arındırılması ile doğal iskeleler, elektro-eğirme yöntemi ile üretilen paralel mikrofiberli iskeleler üzerine çapraz bağlayıcı moleküllerle doğal kas komponentlerinin (protein, glikoprotein) bağlanması ile de yarı-yapay iskeleler üretilmiştir. Doğal, yapay ve yarı-yapay iskeleler üzerine menstrual kan kökenli MKH ve miyoblast hücreleri ekilerek, 21 gün boyunca inkübe edilmiştir. 21 günün sonunda sabitlenen hücreler kas dokusuna özgü çeşitli proteinlerin (MyoD, Desmin, Alfa-aktinin) ifadelerinin belirlenmesi amacıyla immünfloresan olarak boyanmış ve ayrıca da SEM mikrofotoğrafları alınmıştır. Ayrıca 21 günün sonunda iskeleler üzerindeki hücre çoğalması WST-1 hücre canlılık testi ile belirlenmiştir. Yapılan tüm bu analizler sonucunda, doğal dokunun ve yapay iskelenin, hücre tipi olarak ise miyoblastların kas yaması üretiminde en etkili oldukları belirlenmiştir. Yapay iskelenin ve miyoblastların kullanımıyla yönlendirilmiş kas yaması eldesi daha başarılı olmuştur.
Özet (Çeviri)
Production of skeletal muscle grafts on the acellular native scaffolds and on larger size semi-syntetic scaffolds with crosslinked acellular native skeletal muscle components (Protein, glycoprotein) was aimed in this project to heal congenital (for example: Cleft Lip Disease) or accidental maxillofacial (especially due to traffic accidents) skeletal muscle tissue defects. In addition, two different stem cell types, MSC and myoblasts, were used as a cellular component of these scaffolds, so the most suitable cell and scaffold types were studied to produce a skeletal muscle patch. Myoblasts were isolated from human muscle tissue, MSCs were obtained from human menstrual blood, and they were characterized by using flow cytometry and by differentiation to osteogenic and adipogenic lineages. Skeletal muscle pieces were treated with detergent like chemicals to remove the donor cells existing in the native tissue and so the native acellular scaffolds were obtained by this way, and with the aim of producing semi-synthetic scaffolds, native skeletal muscle components (Protein, glycoprotein) were cross-linked to the eletrospun syntetic scaffolds. Human myoblasts and human menstrual blood derived mesenchymal stem cells (hMB-MSC) were seeded on the native, syntetic and semi-syntetic scaffolds and cultured on them for 21 days. After 21 days, the cells were fixed and stained immunocytochemically against some skeletal muscle tissue specific proteins (MyoD, Desmin, Alpha-actinin) to determine the specific protein expression. In addition, the cells were examined with SEM. Separately, after 21 days, cell proliferation on scaffolds was determined by using WST-1 test. After all analyses, it was determined that native acellular and syntetic scaffolds, and miyoblasts as a cell type were effective in producing a muscle tissue graft. Producing oriented muscle tissue patch was more successful when synthetic scaffolds and myoblasts were used together.
Benzer Tezler
- Application of human mesenchymal stem cells to 3D silk fibroin scaffolds for cardiac tissue engineering
İnsan mezenkimal kök hücrelerinin 3B ipek fibroin yapı iskelelerine uygulanarak kardiyak doku mühendisliğinde kullanılması
GİZEM MERVE ŞAHİN
Yüksek Lisans
İngilizce
2017
Biyomühendislikİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FATMA NEŞE KÖK
DR. YÜKSEL ÇETİN
- Contribution of mesenchymal stem cells in cell based therapies
Mezenkimal kök hücrelerin hücre temelli terapilere katkısı
ZEYNEP TOKCAER KESKİN
Doktora
İngilizce
2010
Biyolojiİhsan Doğramacı Bilkent ÜniversitesiMoleküler Biyoloji ve Genetik Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. KAMİL CAN AKÇALI
- Sıçanda miyokardiyal iskemi sonrası doku onarımında insan göbek kordonu stroması kaynaklı mezenkimal kök hücrelerin tedavi edici etkisinin araştırılması
Investigating the therapeutic effects of human umbilical cord derived mesenchymal stromal stem cells in tissue repair after myocardial ischemia in rats
ZEYNEP YIĞMAN
Tıpta Uzmanlık
Türkçe
2015
Göğüs Kalp ve Damar CerrahisiAnkara ÜniversitesiHistoloji ve Embriyoloji Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ALP CAN
- N-ras ve H-ras onkogenlerinin p53 ve MDM2 proteinlerinin sentezi üzerine etkilerinin DNA hasarlı kültür hücrelerinde araştırılması
Investigation of effects of N-ras and H-ras oncogenes on synthesis of p53 and MDM2 proteins in DNA-damaged cell lines
EMEL ERGENE
- In vitro skeletal muscle model development through co-culture of cells
İn vitro iskelet kas modelinin ortak-kültür aracılığıyla geliştirilmesi
AYŞE BURCU ERTAN
Doktora
İngilizce
2017
Biyolojiİstanbul Teknik ÜniversitesiMoleküler Biyoloji-Genetik ve Biyoteknoloji Ana Bilim Dalı
DOÇ. DR. FATMA NEŞE KÖK
PROF. DR. GAMZE KÖSE