Biyomalzeme kullanımına yönelik sığır sıs deselülerizasyonu ve sıçanlarda kritik boyutlu tam kalınlık yara iyileşme modelinde etkinliğinin değerlendirilmesi
Decellularization of bovine sis for biomaterial use and assessment of efficacy in a rat critical-size full-thickness wound repair model
- Tez No: 311967
- Danışmanlar: PROF. DR. Y. MURAT ELÇİN
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Dermatoloji, Biyokimya, Kimya, Dermatology, Biochemistry, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Doku mühendisliği, Yara iyileşmesi, Tissue engineering, Wound healing
- Yıl: 2012
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Ankara Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: Belirtilmemiş.
Özet
Bu çalışmada, biyomalzeme kullanımına yönelik sığır ince barsak submukoza tabakasının (SIS) yeni tasarlanan yöntem ile deselülerizasyonu gerçekleştirildi. Bu amaçla mekanik, kimyasal ve fiziksel yöntemlerin beraber kullanımını kapsayan ideal bir protokol geliştirilerek büyük ölçüde hücrelerinden arındırılmış lifsi yapıda membranlar hazırlandı. Deselülerizasyon yönteminin etkinliği SEM, histokimya ve DNA içeriği analizleriyle belirlendi. Deselülerize edilen membranların yüzey özellikleri ile su ve tampon tutma kapasiteleri de incelendi. Daha sonra, deselülerize sığır SIS membranlara sıçan kemik iliği mezenkimal kök hücreleri (Kİ-MKH) tohumlandı ve 21 gün boyunca kültürü sürdürüldü. Deney süresince, belirli zaman noktalarında hücrelerin canlılığı ve çoğalması MTT [3-(4,5-dimetildiyazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolyum bromür] yöntemi ve histokimyasal analizlerle takip edildi. Sıçan Kİ-MKH'leri tohumlanmış ve hücresiz sığır deselülerize SIS membranlarının sıçanlarda kritik boyutlu (7 cm2) tam kalınlık yara iyileşme modelinde etkinliğinin incelenmesi amacıyla in vivo çalışmalar tasarlandı. Çalışmada, aynı boyutta oluşturulan açık yaralar kontrol olarak kullanıldı. İyileşme süreci boyunca, yara boyutunda meydana gelen değişim, iltihaplanma, kızarıklık, şişme, vb. durumlar günlük makroskopik olarak takip edildi. Ayrıca yara iyileşme sürecinin daha iyi değerlendirilebilmesi amacıyla, belirli zaman noktalarında doku örneklerinin sıçanlardan eksplante edilmesinin ardından histo- ve immünhistokimya boyamaları ile analiz edildi. Deselülerize sığır SIS membranlarının sıçan Kİ-MKH'ler için uygun bir iskele olduğu ve yara iyileşmesini kontrole göre daha az skar oluşumu ile yaklaşık iki kat hızlandırdığı belirlendi. Elde edilen sonuçlar, deselülerize sığır SIS membranlarının, hücresiz veya Kİ-MKH'leri ile kombine edilerek, rejeneratif tıpta yara grefti olarak kullanılma potansiyeline sahip olduğu görüşünü desteklemektedir.
Özet (Çeviri)
In this study, bovine small intestinal submucosa (SIS) was decellularized using a novel method for use as a biomaterial. For this aim, highly fibrous and cell free membranes were prepared with the optimized method involving chemical, physical and mechanical treatments. The efficiency of the decellularization method was assessed using SEM, histochemistry and DNA content analyses. Surface properties and water/buffer uptake capacity of decellularized membranes were also assessed. Afterwards, rat bone marrow mesenchymal stem cells (BM-MSCs) were seeded and cultured on decellularized bovine SIS membranes up to 21 days. During this period, cell viability and proliferation were evaluated via MTT [3-(4,5-dimethyldiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide] assay and histochemical staining at predetermined time points. The in vivo studies were designed to investigate the efficacy of empty and BM-MSCs-seeded bovine SIS, in the critical-size (7cm2) full-thickness rat skin defect model. The open wound in same size was chosen as the control. During the healing process, observations such as changes in the diameter, inflammation, bleariness, exudation and swelling were recorded daily for each wound macroscopically. And also, samples were explanted from rats at predetermined time points and were evaluated using histology and immunohistochemistry for in-depth analyses of the wound healing process. Findings supported the notion that, decellularized bovine SIS membranes could be a suitable scaffold for rat BM-MSCs and accelerate wound healing approximately two-fold, with minor scarring. In conclusion, decellularized bovine SIS has potential as a wound graft in regenerative medicine alone or in combination with BM-MSCs.
Benzer Tezler
- Investigation of effect of novel technologies' implementation to future internal combustion engines
Yeni teknolojilerin geleceğin içten yanmalı motorlarına uyarlanmasının etkilerinin incelenmesi
ANIL ALAGÖZ
Yüksek Lisans
İngilizce
2018
Makine Mühendisliğiİstanbul Teknik ÜniversitesiMakine Mühendisliği Ana Bilim Dalı
DR. ÖĞR. ÜYESİ HİKMET ARSLAN
- Mobilyada biyomalzeme uygulamalarının sürdürülebilirlik bağlamında değerlendirilmesi: Bir sehpa tasarımı örneği
Evaluation of biomaterials applications in furniture in the context of sustainability: An example of a coffee table design
SELİN İLERİ
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
Endüstri Ürünleri TasarımıEge ÜniversitesiEndüstriyel Tasarım Ana Bilim Dalı (disiplinlerarası)
DR. ÖĞR. ÜYESİ PINAR KÖYMEN ÇAĞAR
- Nefes figürü yaklaşımı ile sentezlenmiş gözenekli poliüretan filmlerin hazırlanması, karakterizasyonu ve biyouyumluluklarının değerlendirilmesi
Preparation, characterization and biocompatibility evaluation of porous polyurethane films synthesized by breath figure approach
GİZEM DABAN
Yüksek Lisans
Türkçe
2018
BiyomühendislikHacettepe ÜniversitesiBiyomühendislik Ana Bilim Dalı
PROF. DR. EMİR BAKİ DENKBAŞ
- Grafen kuantum noktaların yeşil yöntemle üretimi ve biyosensör uygulamaları için enzim immobilizasyonu
Green synthesis of graphene quantum dots and enzyme immobilization for biosensor applications
EBRAR TUĞBA YEŞİLKAYA
Yüksek Lisans
Türkçe
2026
KimyaMarmara ÜniversitesiEczacılık Temel Bilimleri Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ELİF ÇALIŞKAN SALİHİ
- Elektroforetik biriktirme yöntemiyle Ti6Al4V köpüklerinin hidroksiapatit ile kaplanması
Hydroxyapatite coating on Ti6Al4V foams by using electrophoretic deposition method
FURKAN SARI
Yüksek Lisans
Türkçe
2024
Mühendislik BilimleriKocaeli ÜniversitesiMetalurji ve Malzeme Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. HALİL İBRAHİM BAKAN