Penisilin g açilaz saflaştırılması için yeni destek materyali
New support material for penicillin g acylase purification
- Tez No: 315516
- Danışmanlar: YRD. DOÇ. DR. SERPİL ÖZKARA YAVUZ
- Tez Türü: Yüksek Lisans
- Konular: Kimya, Chemistry
- Anahtar Kelimeler: Belirtilmemiş.
- Yıl: 2012
- Dil: Türkçe
- Üniversite: Anadolu Üniversitesi
- Enstitü: Fen Bilimleri Enstitüsü
- Ana Bilim Dalı: Kimya Ana Bilim Dalı
- Bilim Dalı: Belirtilmemiş.
- Sayfa Sayısı: 101
Özet
Penisilin G açilaz (EC 3.5.1.11), endüstriyel süreçlerde yarı sentetik penisilinlerin üretiminde kullanılmaktadır. Penisilin açilaz enzimininsaflaştırılması, yarı sentetik penisilinlerin ve sefalosporinlerin üretimine imkânsağlar. Sunulan çalışmada, penisilin açilaz saflaştırılması için tekrar kullanılabilirmakrogözenekli kriyojel biyoafinite kromatografi adsorbenti hazırlanmıştır.Kriyojeller makrogözeneklere sahiptir. Bu özellikler, kriyojellerin nano-mikroölçek aralığında herhangi bir difüzyon sorunu olmaksızın kullanımına olanaksağlamaktadır. Çalışmada; ilk olarak, 4-aminoantipirin, metakroil klorür ilereaksiyona sokularak metakroil amidoantipirin (MAAP) monomeri sentezlenmişve elde edilen yapı FTIR ile karakterize edilmiştir. Daha sonra; MAAP ve 2-hidroksietilmetakrilat (HEMA) komonomerleri polimerleştirilerek poli(HEMAco-MAAP) kriyojel kolon sentezlenmiştir. Hazırlanan kriyojellerin spesifik yüzeyalanı 25.8 m2g-1, şişme değeri % 1463.97 olarak bulunmuştur. Çalışmanın ikinciaşamasında ise MAAP içeren kriyojel kolonlara sulu çözeltilerden ve doğalkaynaklardan penisilin açilaz adsorpsiyonu incelenmiştir. Poli(HEMA-co-MAAP)kriyojellerin maksimum adsorpsiyon kapasitesi 190.2 mgg-1 (pH 5.0 ve 2 saat)olarak bulunmuştur. Doğal kaynaklardan penisilin açilaz saflaştırılması hızlıprotein sıvı kromatografisi (FPLC) ile gerçekleştirilmiştir. Penicilliumchrysogenum NRRL 1951, Penicillium crysogenum 807 ve Penicilliumpurpurogenum 455 ham ekstraktlarından penisilin açilaz saflaştırma faktörü sırasıile 17.89, 54.9 ve 10.0 olarak bulunmuştur. Kriyojellerden penisilin açilazdesorpsiyonu, 1 M NaOH kullanılarak gerçekleştirilmiştir. Tekrarlanan 6adsorpsiyon-desorpsiyon döngüsü sonucunda kriyojellerin adsorpsiyonkapasitesinde önemli bir azalma olmadığı belirlenmiştir. Sonuç olarak;poli(HEMA-co-MAAP) kriyojel, penisilin açilazın hızlı, ucuz ve spesifiksaflaştırılması için uygun kullanım potansiyeline sahiptir.
Özet (Çeviri)
Penicillin G acylase (EC 3.5.1.11) has been used in the production ofsemi-synthetic penicillins in industrial processes. Purification of penicillin acylaseenzyme enables the production of semi-synthetic penicillins and cephalosporins.In the present study, bioaffinity chromatography adsorbent has prepared for thepurification of penicillin acylase in the form of reusable cryogel which has macropores. These characteristics have enabled cryogels to be used in nano-micro scalerange without any diffusion problem. In this study, firstly, methacryloylamidoantipyrine (MAAP) monomer has synthesized reacting 4-aminoantipyrinewith methacryloyl chloride and the obtained structure has characterized by FTIR.Then, poly(HEMA-co-MAAP) cryogel column has synthesized by thepolymerization of MAAP and 2-hydoxyethylmethacrylate (HEMA) comonomers.The specific surface area and swelling value of prepared cryogels have found tobe 25.8 m2g-1 and 1463.97 %, respectively. In the second stage of the study, theadsorption of penicillin acylase has investigated from aqueous solutions andnatural sources on cryogel columns containing MAAP. The maximum adsorptioncapacity of poly(HEMA-co-MAAP) cryogels has calculated as 190.2 mgg-1 (pH5.0 and 2h). The purification of Penicillin acylase from natural sources hasachieved by fast protein liquid chromatography (FPLC). Penicillin acylasepurification factor from the extract of Penicillium chrysogenum NRRL 1951,Penicillium crysogenum 807 and Penicillium purpurogenum 455 has found to be17.89, 54.9 and 10.0, respectively. Desorption of penicillin acylase from cryogelshas achieved by using 1 M NaOH. It has been determined that there was nosignificant decrease in adsorption capacity of cryogels after 6 adsorptiondesorptioncycles. As a result, poly(HEMA-co-MAAP) cryogels have a suitable
Benzer Tezler
- Penisilin açilaz (PA) saflaştırılması için süpermakrogözenekli hidrofobik afinite sorbentler
Supermacroporous hydrophobic affinity sorbents for penicilline acylase (PA) purification
AHMET HAMDİ DEMİRÇELİK
- Penisilin asilaz üreten rekombinant E.coli soylarında gen ekspresyonu, enzimin saflaştırılması ve nitelendirilmesi
Gene expression in penicillin acylase producing recombinant E.coli strains, purification and characterization of the enzyme
HÜLYA AKDEMİR
Yüksek Lisans
Türkçe
2006
BiyolojiGebze Yüksek Teknoloji EnstitüsüBiyoloji Ana Bilim Dalı
Y.DOÇ.DR. SALİHA İŞSEVER ÖZTÜRK
- Antipirin bazlı monolitik kolon geliştirilmesi ve penisilin amidohidrolaz enzimi ayrılmasında kullanımı
Investigation of antipyrine containing monolithic column and its use for purification of penicillin amidohydrolase
RÜSTEM KEÇİLİ
- Antibiyotik üretiminde kilit unsur olan 6-APA sentezi için katalitik kriyojel kolonlar
Catalytic cryogel columns for the synthesis of 6-APA which is a key ingredient in the production of antibiotics
CEYLAN HACIOĞLU
Yüksek Lisans
Türkçe
2014
BiyokimyaAnadolu ÜniversitesiKimya Ana Bilim Dalı
YRD. DOÇ. SERPİL ÖZKARA YAVUZ
- Penisilin G amidaz'ın sıcaklık dayanımını iyileştirmek için N-izopropilakrilamid/ maleik anhidrit bazlı uyarı-cevap kopolimerlerinin sentezi ve kullanımı
The Synthesis and usage of N-isopropylacrylamide/ maleic anhydride based stimuli-responsive copolymers for improving thermal stabilization of penicillin G amidase
VOLKAN KÖSELİ
Yüksek Lisans
Türkçe
2002
Kimya MühendisliğiHacettepe ÜniversitesiKimya Mühendisliği Ana Bilim Dalı
PROF. DR. ERHAN BİŞKİN